Page 115 - 《广西植物》2020年第1期

１ 期 黄宁珍等: 青钱柳的快速繁殖技术 １ １ １

表 １ 青钱柳外植体类型、采样季节和消毒时间对消毒效果的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｔｙｐｅꎬ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｓｅａｓｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａ ｐａｌｉｕｒｕｓ (１４ ｄ)

污染率 外植体
０.１％ ＨｇＣｌ ２
消毒时间 存活率
编号 采样时间 采样部位 Ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ 褐化情况
Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ Ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ
Ｎｏ. Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｔｉｍｅ Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｐａｒｔ ｒａｔｅ Ｂｒｏｗｎｉｎｇ
(％)
ｏｆ ０.１％ ＨｇＣｌ ２
(％) ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ
(ｍｉｎ)
１ ８ 月—１０ 月 顶芽、未木质化及轻微木质化茎段 ５~１０ ６７.６ ０ 全部褐化死亡
Ａｕｇ. ｔｏ Ｏｔｃ. Ａｐｉｃａｌ ｂｕｄｓꎬ ｎｏｎ￣ｌｉｇｎｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｓｌｉｇｈｔｌｙ￣ Ａｌｌ ｂｒｏｗｎｉｎｇ
ｌｉｇｎｉｆｉｅｄ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｅａｔｈ
２ ４ 月—６ 月 顶芽及未木质化茎段 ５~１０ ４９.１ ０ 全部褐化死亡
Ａｐｒ. ｔｏ Ｊｕｎ. Ａｐｉｃａｌ ｂｕｄｓ ａｎｄ ｎｏｎ￣ｌｉｇｎｉｆｉｅｄ ｓｔｅｍ ｓｅｇ￣ Ａｌｌ ｂｒｏｗｎｉｎｇ
ｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｅａｔｈ
３ ４ 月—６ 月 轻微木质化茎段 ５~７ ４５.９±７.２ ａ ８８.７±５.４ ａ 少数褐化死亡
Ａｐｒ. ｔｏ Ｊｕｎ. Ｓｌｉｇｈｔｌｙ￣ｌｉｇｎｉｆｉｅｄ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ Ａ ｆｅｗ ｂｒｏｗｎｉｎｇ ａｎｄ ｄｅａｔｈ
４ ４ 月—６ 月 轻微木质化茎段 ８~１０ ４３.９±５.３ ａ ６５.３±７.９ ｂ 部分褐化死亡
Ａｐｒ. ｔｏ Ｊｕｎ. Ｓｌｉｇｈｔｌｙ￣ｌｉｇｎｉｆｉｅｄ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ Ｐａｒｔｉａｌ ｂｒｏｗｎｉｎｇ ａｎｄ ｄｅａｔｈ
注: 同一列不同的小写字母表示 ０.０５ 水平差异显著ꎮ 下同ꎮ
Ｎｏｔｅ: Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｏｗｅｒｃａｓｅ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ａｔ ｔｈｅ ０.０５ ｌｅｖｅｌ. Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ.

表 ２ 青钱柳初代诱导培养基及培养效果 Ｌ 时ꎬ所诱导的再生芽以单芽为主ꎻ在 ６￣ＢＡ 浓度
￣１
￣１
Ｔａｂｌｅ ２ Ｐｒｉｍａｒｙ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｅｆｆｅｃｔｓ 为 ４.０ ｍｇ∙Ｌ 时ꎬ所诱导的再生芽中有一定数量
ｏｆ Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａ ｐａｌｉｕｒｕｓ(２１ ｄ)
的丛生芽ꎬ但玻璃化比较严重ꎮ (３) 青钱柳在继代
培养基 芽诱导率 芽高(ｃｍ) 增殖培养基中易玻璃化ꎬ当培养基中 ６￣ＢＡ≥１.０
编号
Ｍｅｄｉｕｍ Ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ Ｈｅｉｇｈｔ ｏｆ ￣１ ￣１
Ｎｏ. ￣１ ｍｇ∙Ｌ 、ＩＢＡ 或 ＩＡＡ 浓度在 ０.１ ｍｇ∙Ｌ 以上时ꎬ随
(ｍｇ∙Ｌ ) ｒａｔｅ (％) ｓｈｏｏｔ
着激素浓度升高和培养代数增多ꎬ玻璃化程度越
１ ＭＳ＋６￣ＢＡ １.０＋ＩＢＡ ０.１ ６８.７±５.６ｂ ３.５±０.３ａ
加严重(图 １:Ｂ)ꎮ (４) 以 ＫＴ 或 ＺＴ 代替 ６￣ＢＡꎬ产
２ ＭＳ＋６￣ＢＡ ２.０＋ＩＢＡ ０.２ ８０.５±６.８ａ ３.５±０.２ａ
生大量愈伤组织ꎬ无法诱导出下一代芽苗ꎮ (５) 以
３ ＭＳ＋６￣ＢＡ ４.０＋ＩＢＡ ０.４ ５２.４±６.５ｃ １.５±０.５ｂ
ＮＡＡ 代替 ＩＢＡ 或 ＩＡＡꎬ诱导的愈伤过多ꎬ虽能诱导
４ ＭＳ＋６￣ＢＡ ８.０＋ＩＢＡ ０.８ ２０.８±３.８ｅ １.０±０.３ｂ
５ ＷＰＭ ＋６￣ＢＡ １.０＋ＩＢＡ ０.１ ５５.２±５.５ｃ ３.０±０.２ａ 出芽苗ꎬ但随着培养进程的后延ꎬ芽苗逐渐黄化ꎮ
６ ＷＰＭ＋６￣ＢＡ ２.０＋ＩＢＡ ０.２ ６８.５±６.４ｂ ３.０±０.２ａ 因此ꎬ可用于青钱柳继代培养的激素组合和浓度
为 ６￣ＢＡ ０.５ ｍｇ∙Ｌ ＋ＩＢＡ ０.０５ ｍｇ∙Ｌ ꎬ在此条件
￣１
￣１
７ ＷＰＭ＋６￣ＢＡ ４.０＋ＩＢＡ ０.４ ４０.２±５.３ｄ １.５±０.４ｂ
下所诱导的再生芽以单芽为主ꎬ增殖系数偏低ꎬ为
８ ＷＰＭ ＋６￣ＢＡ ８.０＋ＩＢＡ ０.８ ９.７±２.３ｆ １.０±０.４ｂ
３.５ / ３５ ｄꎬ但芽苗高壮ꎬ培养 ３５ ｄꎬ平均苗高为 ６.０
￣１
节剂浓度范围较宽ꎬ在 ６￣ＢＡ １. ０ ~ ４. ０ ｍｇ∙ Ｌ ＋ ｃｍ(表 ３ꎬ图 １:ＣꎬＤ)ꎬ适用于生根前的壮苗培养ꎮ
ＩＢＡ ０.１ ~ ０.４ ｍｇ∙Ｌ 浓度范围内ꎬ初代芽诱导率均 ２.３.２ 后续继代增殖培养研究 初步的继代增殖
￣１
￣１ 培养研究表明ꎬ相对适合于青钱柳继代增殖的培
在 ４０.０％ 以上ꎬ其中ꎬ以 ＭＳ ＋ ６￣ＢＡ ２. ０ ｍｇ∙Ｌ ＋
￣１
ＩＢＡ ０.２ ｍｇ∙Ｌ 培养基的初代诱导效果最好ꎬ芽诱 养基为 ＭＳ＋６￣ＢＡ ０.５ ｍｇ∙Ｌ ＋ＩＢＡ ０.０５ ｍｇ∙Ｌ ꎬ
￣１
￣１
导率和芽苗高度均达到最高ꎬ分别为 ８０.５％和 ３.５ 但增殖系数偏低ꎬ为 ３.５ / ３５ ｄꎮ 因此ꎬ在后续的继
ｃｍ(表 ２ꎬ图 １:Ａ)ꎬ可以作为初代诱导培养基ꎮ 代增殖培养研究中ꎬ在低浓度范围内ꎬ通过调整
２.３ 继代增殖及壮苗培养 ６￣ＢＡ和 ＩＢＡ 比例ꎬ并向培养基中添加 ＴＩＢＡꎬ在有
２.３.１ 初步继代增殖培养研究 根据初代培养结 效控制玻璃化的前提下ꎬ提高丛生芽的诱导率和
果设计表 ３ 培养基ꎬ青钱柳初步继代增殖培养结 增殖系数(表 ４)ꎮ 通过综合分析ꎬ得到如下结果:
果如下:(１)青钱柳比较适合在含有 ６￣ＢＡ＋ＩＢＡ 或 (１)经过多次继代培养后ꎬ培养基中的 ６￣ＢＡ
６￣ＢＡ＋ＩＡＡ 激素组合的培养基上生长ꎻ但在诱导丛 浓度相对较高(１.０ ｍｇ∙Ｌ ) 时ꎬ再生芽苗长势偏
￣１
生芽方 面ꎬ 前 者 优 于 后 者ꎮ ( ２) 当 ６￣ＢＡ 浓 度 为 弱ꎬ玻璃化率高达 ７０％ꎬ增殖系数低ꎻ６￣ＢＡ 浓度过
￣１
￣１ 低(０.２ ｍｇ∙Ｌ )时ꎬ虽未出现玻璃化ꎬ 但芽苗普遍
０.５~２.０ ｍｇ∙Ｌ 、ＩＢＡ 或 ＩＡＡ 浓度为 ０.０５~０.２ ｍｇ∙