Page 150 - 《广西植物》2021年第12期
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ԡ ँ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷
出ᖔ各因素对愈伤诱导率的影响 较 为 复 杂ᤥ 在 ԣॹᇺ 愈伤组织来源途径的确定
᧕ᔀ༁ᔽ੫Ⴟ᥋ጶᡱᔀʢᡷ 软件所分析的等高线及响应面中ᖔ等 从茎段横切片上来看ᖔ可观察到干细胞形成
高线的形态可反映因素间交互作用的大小ᖔ圆形 的细胞团ᖔ经中性红染色ᖔ可观察到排列紧密的细
表 示 交互作用小ᖔ 椭圆形则相反 ྉ 代文亮 等ᖔ 胞团ྉ图 ϟ᧥᧧ᖔȮᖔɯᤥ 随着细胞团的不断分裂ᖔ可观
ԡԡᎮɯᖔ响应面的坡度变化可反映出各因素对响应 察到细胞团形成胚状体结构ྉ图 ϟ᧥Ȯᖔᓂɯᖔ甚至有胚
值的影响力ᖔ坡度越缓表明影响越小ᖔ反之亦然 状体萌发的结构ྉ图 ϟ᧥Ȯɯᖔ在茎段切片的表面可观
ྉ张黎明等ᖔԡϟ࿗ɯᤥ 由图 可知ᖔ时间与 શዶዶ 浓 察到胚状体萌发形成的胚状体茎和胚状体芽ྉ 图
度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度与 શዶዶ 浓度的交互作用较强ᖔ同时 ϟ᧥᧕ɯᤥ 经中性红染色ᖔ在茎段形成层的细胞内部
时间对 શዶዶ 浓度及 ᤃ᥋ାዶ 浓度的影响较大ᤥ 这也 可观察到大量的微小液泡及所形成的细胞团ྉ 图
反映在方差分析中ྉ表 ɯᖔ在三个因素中只有时间 ϟ᧥ᥘɯᖔ众多微小液泡是干细胞的一大特征ᖔ表明
猕猴桃幼嫩茎段的形成层中存在有干细胞ᖔ且分
对愈伤诱导率和植物形成率呈显著性差异ྉ ۗ ፪
裂形成细胞团ᖔ这些细胞团随后形成愈伤或胚状
ԡԡጢɯᤥ 软件所得的回归方程为 ɔ ᢉͱ ϟᎮ ऐሕँ ऐ շ
ϟ ँᤃऐଝ շ ϟԡँऐଝ շ ँऐሕଝ ͱ ሕ ጢଝ ଝ ͱ ϟሕ ሕଝ ଝ շ 体ᖔ最终形成胚状体芽及幼苗ᤥ
ϟ ሕ ϟ ϟ
ԣॹ 幼苗生根培养基的选择
Ꭾ ϟଝ ଝ ͱ ሕ ࿗ଝ ͱ ϟ ँϟଝ ͱ ϟ ԡϟᎮϟ ଝ ྉ ቴ ᢉ
ሕ ϟ ሕ
ԡँᤃ࿗ɯᤥ 式中᧥ɔ 为愈伤诱导率ଫଝ ܦଝ ܦଝ 分别为 幼苗接种在生根培养基上 ϟጢ ʛ 后ᖔ发现几乎
ϟ ሕ
时间ܦશዶዶ 浓度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度ᤥ 方程拟合非常好ᖔ模 所有幼苗都能生根ᤥ 从生根的数量及根长上看ᖔ
ϟᣰ ᥘ୩ 更合适ᖔ而在苗高上ᖔϟ ᣰ ᥘ୩ 与 ᥘ୩ 没有差
拟回归模型的 ۗ 值为 ԡԡԡԡ ሕϟ፪ԡԡጢᖔ缺失项的 ۗ
异ᖔ选择 શዶዶ 的生根诱导效果更好ᤥ 这表明猕猴
值为ԡጢϟ ऐᤠԡԡጢᤥ 方程解析后的最佳条件为时
桃幼苗较易生根ᤥ 对少量幼 苗 进 行 移 栽 ྉ 图 ϟ᧥
᥋ϟ ᥋ϟ
间 ऐሕ ၤܦશዶዶ ࿗࿗ጢ ቝ੫ኼᓂ ܦᤃ᥋ାዶ ԡऐ ቝ੫ኼᓂ ᖔ
̀ɯᖔ成活率在 ँጢᠮ以上ᖔ表明猕猴桃组培幼苗的
从中可以看出形成层愈伤诱导需要较长的处理时
移栽要求不高ᤥ
间和较高的生长素ᤥ
随着培养时间的延长ᖔ茎段或茎段切片所形成
的胚性愈伤会分化幼芽ྉ图 ϟ᧥᧕ɯᖔ并形成幼苗ྉ图 ሕজ 讨论与结论
ϟ᧥èɯᖔ当苗长至 ጲሕ ዹቝ 时ᖔ将幼苗切下转至生根培
本研究通过去除茎段周皮降低污染率ᖔ低渗前
养基生根培养ᤥ 各处理组合中幼芽的形成率见表
处理促进茎段干细胞活性ᖔ培养诱导干细胞分裂形
ϟᖔ图 ሕ 为经 ᧕ᔀ༁ᔽ੫Ⴟ᥋ጶᡱᔀʢᡷ ऐԡᤃ 分析所得的效应面
成胚性愈伤及其分化ᖔ并通过响应面设计对处理条
及等高图ᤥ 从图 ሕ 可以看出ᖔ各因素对植株形成率
件的优化ᖔ实现了红阳猕猴桃茎段干细胞直接形成
影响较为复杂ᖔ尤其是 શዶዶ 与处理时间之间ᤥ 从等
幼苗的快繁体系构建ᤥ 该体系中ᖔ在预处理时间ܦ
高线上看ᖔશዶዶ 浓度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度及时间三因素间均
᥋ϟ
શዶዶ 浓度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度分别为 Ꭾጢԡ ၤܦሕԡԡ ቝ੫ኼᓂ ܦ
有较强的互作关系ᖔ而 શዶዶ 与 ᤃ᥋ାዶ 间的互作相对
᥋ϟ
ԡԡ ቝ੫ ኼ ᓂ 时ᖔ 胚性愈伤诱导率达 ྉ ऐᎮ ሕԡ ō
小ଫ从响应面上看ᖔશዶዶ 浓度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度对植株形
ϟԡԡɯᠮଫ在预处理时间ܦશዶዶ 浓度ܦᤃ᥋ାዶ 浓度分别
成率的影响较大ᤥ 从软件中得到各因素对植株形
᥋ϟ
᥋ϟ
为 Ꭾጢԡ ၤܦጢԡԡ ቝ੫ኼᓂ ܦԡԡ ቝ੫ኼᓂ 时ᖔ植株形成
成率影响的回归方程为 ɔ ᢉͱ ϟԡ ሕᎮँշ Ꭾ࿗ሕ ᤃଝ շ
ϟ 率达ྉሕँጢԡ ō ँԡᤃɯᠮᤥ 综合胚性愈伤形成率及植
ϟϟଝ շँ࿗ԡሕଝ ͱ ࿗ऐଝ ଝ ͱሕϟଝ ଝ ͱϟጢᤃଝ ଝ ͱϟሕଝ շ ᥋ϟ
ሕ ϟ ϟ ሕ ϟ 株形成率ᖔ低渗预处理 Ꭾጢԡ ၤܦશዶዶ ጢԡԡ ቝ੫ኼᓂ ܦ
Ꭾᤃଝ ͱᤃጢऐሕଝ ྉቴ ᢉ ԡऐँɯᤥ 式中᧥ɔ 为植株形 ᤃ᥋ାዶ ԡ ቝ੫ኼᓂ 时ᖔ胚性愈伤形成率和植株形成率
᥋ϟ
ሕ
成率ᖔ其他与上述方程的相同ᤥ 表 显示模拟模 分别为ྉ࿗ँ࿗Ꭾ ō ሕϟɯᠮܦྉሕँጢԡ ō ँԡᤃɯᠮᖔ可实
型的 ۗ 值为ԡԡϟϟ ྉ ۗ፪ԡԡጢɯᖔ而拟失项的 ۗ 值 现红阳猕猴桃的高效快速繁殖ᤥ 有关红阳猕猴桃
为ԡሕ࿗ጢ ጢྉۗᤠԡԡጢɯᖔ表明模拟模式较为成功ᤥ 模 的快繁研究中ᖔ文国琴和何震ྉԡԡ࿗ɯ利用红阳猕猴
᥋ϟ
拟方程解析后的最佳条件为时间 ᤃ ࿗ ၤܦ શዶዶ 桃茎段ᖔ在 ᥘ୩շାዶ ϟԡ ቝ੫ኼᓂ շ શዶዶ ԡϟ ቝ੫ኼᓂ ᥋ϟ
࿗ऐ࿗ ቝ੫ኼᓂ ܦᤃ᥋ାዶ ԡ࿗ ቝ੫ኼᓂ ᖔ从中可以看出植 诱导培养基中获得 ऐऐᠮ的愈伤组织诱导率ଫ相应愈
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株形成需要较高的生长素和激动素ᖔ而要求前期 伤在 ᥘ୩ շ ାዶ ԡ ቝ੫ኼᓂ շ શዶዶ ԡϟ ቝ੫ኼᓂ 中ᖔ芽
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的低渗处理时间较短ᤥ 分化率达到 ጢᤃᤃᠮᤥ 甘丽萍等ྉԡϟᤃɯ 也利用红阳
