Page 132 - 《广西植物》2022年第11期
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ϟ ँ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
胶电泳进行检测ᖔ得到两条 ϟ ԡԡԡ ᤦᡱ 左右的特异 ԣॹᇺ 香蕉矮化突变体与野生型 ᤩዛᇺᅳଝ 蛋白质磷酸
性条带ྉ 图 ϟɯᖔ测序后这 个靶序列的全长均为 位点及其高级结构预测分析
ϟ ԡँᤃ ᤦᡱᖔ将获得矮化突变体 ᤩዛሕᅳଝ 基因命名为 蛋白 磷酸位点分析结果显示ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和
ᤩዛሕᅳଝዛܦ野生型香蕉 ᤩዛሕᅳଝ 基因命名为 ᤩዛሕᅳଝᤩᤥ ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 蛋白均含有丝氨酸ܦ苏氨酸和酪氨酸 ሕ
通过测序得到 ᤩዛሕᅳଝዛ 和 ᤩዛሕᅳଝᤩ 的全长序列均 种氨基酸磷酸化位点ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 分别
为 ϟ ԡँᤃ ᤦᡱᖔᤩዛሕᅳଝዛ 和 ᤩዛሕᅳଝᤩ 的 ᨃè 均为 ऐᤃ࿗ 含有丝氨酸 个和 ࿗ 个ᖔ苏氨酸 Ꭾ 个和 ऐ 个ᖔ酪
ᤦᡱᖔጢࣕ᥋Вఋ 均为 ሕ ᤦᡱᖔ均编码 ऐᎮ 个氨基酸ᤥ 氨酸 个和 ࿗ 个ᤥ 跨膜结构分析显示 ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和
᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 氨基酸序列的期望值分别为 ԡԡሕᎮ ँ 和
ԡԡऐ ँऐᖔ均无跨膜区域ᤥ
利用 ୩ᨃ۪ᥘዶ 在线软件对 ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋
᥈ 蛋白的二级结构的预测分析结果显示ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋᥈
蛋白 含 有 ࿗ 种构象ᖔ 包括 ऐ ጢᎮᠮ 的 ም᥋螺旋ܦ
ϟᤃሕऐᠮ的延伸链ܦሕ࿗ऐᠮ的 Ꮗ᥋转角和 ጢϟጢᎮᠮ的无
规则卷曲ྉ 图 ሕɯଫ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 蛋白含有 ࿗ 种构象ᖔ分
别为 ᤃϟሕᠮ的 ም᥋螺旋ܦϟᎮ࿗ᠮ的延伸链ܦሕ࿗ऐᠮ
的 Ꮗ᥋转角和 ጢँᤃᠮ的无规则卷曲ྉ图 ࿗ɯᤥ
ԣॹ 香蕉矮化突变体与野生型 ᤩዛᇺᅳଝ 氨基酸序列
同源性比对分析
利用 શऊା᧧ 中的 ାᑕ༁ᡷᡱ 分析矮化突变体与野
᤹᧕ᓂጢԡԡԡ ᥘᑕҴᔀʢଫ ዛ ᤩዛሕᅳଝዛଫ ଧ ᤩዛሕᅳଝᤩᤥ
生型香蕉 ᥈ዶሕᆍ 蛋白的氨基酸序列ᖔ同时与其他
图 ϟজ 矮化香蕉与野生型香蕉 ᤩዛሕᅳଝ 基因 ۪ऊ 扩增产物
物种的氨基酸序列同源性比对结果发现ᖔ矮化香
èᔽ੫ ϟজ ۪ऊ ᑕቝᡱᔽᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᡱʢᆍʛࣼዹᡷ༁ ᆍ ᡷၤᔀ ᤩዛሕᅳଝ ੫ᔀႿᔀ
ʢᆍቝ ʛऔᑕʢ ᤦᑕႿᑕႿᑕ ᑕႿʛ औᔽʛ ᡷᢃᡱᔀ ᤦᑕႿᑕႿᑕ 蕉 ᥈ዶሕᆍ 的氨基酸序 列 与 油 棕 ྉᣮ۪ ᡸ
ԡϟԡँϟጢϟሕᎮϟ ɯܦ 海枣 ྉ ᣮ۪ ᡸ ԡԡऐऐϟϟᤃԡሕ ሕ ɯܦ 椰子
对 ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 的氨基酸序列比对分 ྉዶ᧧࿗ጢᤃԡϟϟɯ 的同源性最高ᖔ序列同源性分别为
析结果显示ᖔ两条氨基酸序列之间的同一性高达 ᤃጢᠮܦᤃጢᠮ和 ᤃϟጢᠮᤥ 经序列比对发现ᖔ香蕉矮
化突变体及其野生型亲本 ᥈ዶሕᆍ 的氨基酸序列在
ँऐᤃᠮᖔ存在 ጢ 个位点的差异ᖔ分别位于第 ँ 位ܦ
શ 末端比油棕ܦ海枣和椰子 ሕ 种植物的 ᥈ዶሕᆍ 少
第 ሕऐ 位ܦ第 ऐ࿗ 位ܦ第 ϟँᤃ 位和第 ጢँ 位ྉ图 ɯᤥ
ԣॹԣ 香蕉矮化突变体与野生型 ᤩዛᇺᅳଝ 蛋白质理化 了 ᤃሕ 个氨基酸ᖔऊ 末端少了 Ꭾ 个氨基酸ྉ图 ጢɯᤥ
性质及保守结构域分析 ԣॹጇ 香蕉矮化突变体与野生型 ᤩዛᇺᅳଝ 基因的表达
矮化突变体与野生型香蕉 ᥈ዶሕᆍ 氨基酸序列 模式分析
利用 ीఋ᥋۪ऊ 技术研究 ᤩዛሕᅳଝ 基因在矮化突
的理化性质分析结果显示ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋᥈
分子式分别为 ऊ ̀ શ ᨃ ୩ 和 ऊ ̀ શ 变体及野生型香蕉茎秆生长的不同叶龄期的表达
ϟሕሕऐ ϟጢ ࿗ԡ ሕँጢ ϟᎮ ϟሕሕ ϟጢԡ ࿗ԡ
情况ᤥ 由图 ᤃ 可知ᖔᤩዛሕᅳଝ 基因在矮化突变体及野
ᨃ ୩ ᖔ 蛋白分子量分别为 ሕԡ Ꭾሕጢ ऐ ᧕ᑕ 和 ሕԡ
ሕँᎮ ϟᤃ
ᤃᤃϟϟ࿗ ᧕ᑕᖔ理论等电点均为 ँᎮऐᤥ 其中ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 生型香蕉不同叶龄期的叶片中表达水平不同ᤥ 在
和 ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 蛋白负电荷的残基总数ྉዶ༁ᡱշ᥈ࣼɯ 均 第 ϟԡ 叶和第 ϟጢ 叶龄期 ᤩዛሕᅳଝ 在野生型香蕉叶片
为 ԡ 个ᖔ正电荷的残基总数 ྉዶʢ੫ շ ᓂᢃ༁ɯ 均为 ሕ 中的相对表达量均高于矮化香蕉ᖔ但在第 ԡ 叶和
个ଫ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 蛋白的不稳定指数分别 第 ጢ 叶叶龄期时野生型香蕉叶片中的相对表达
为 ᤃᎮ࿗ᤃ 和 ᤃऐᎮँᖔ均属于不稳定蛋白ଫ脂肪指数 量均显著低于矮化香蕉ᤥ 在野生型香蕉叶片中ᖔ
分别为 Ꭾᤃ ँԡ 和 Ꭾऐ ᤃϟଫ 亲水平均系数分 别 为 ͱ ᤩዛሕᅳଝ 在第 ϟጢ 叶叶龄期表达水平最高ᖔ其次是第
ԡ࿗ԡ 和ͱԡሕᤃᤥ 根据 શऊା᧧ 在线软件对编码蛋白 ϟԡ 叶叶龄期ᖔ而在第 ԡ 叶和第 ጢ 叶叶龄期时表
的结构域分析发现ᖔ᥈ዶሕᆍ᥋᥈ 和 ᥈ዶሕᆍ᥋ዶ 具有 ᥋ 达水平较低ᖔ第 ϟԡ 叶和第 ϟጢ 叶叶龄期的表达水平
շ
酮戊二酸依赖性的双加氧酶与 èᔀ 结合的保守结 极显著高于第 ԡ 叶和第 ጢ 叶叶龄期ᖔ而在第 ԡ
构域ᖔ与其他植物的 ᥈ዶሕᆍ 蛋白相同ᤥ 叶和第 ጢ 叶叶龄期中的表达差异不显著ଫ 在矮化