Page 63 - 《广西植物》2022年第12期
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12 期 姚新转等: 茶树 TIFY 基因家族鉴定及非生物胁迫下表达分析 2 0 5 3
实时荧光定量( RT ̄qPCR) 分析ꎮ MeJA 处理下ꎬ大 菜( Brassica napus) BnaJAZ7 ̄A3 / BnaJAZ7 ̄C3 的 过
多数 TIFY 有明显的响应ꎬ但不尽相同ꎬ如 MeJA 显 表达提高冷害胁迫(He et al.ꎬ 2020) 等中被研究ꎬ
著诱导了 TIFY1、TIFY6 和 TIFY11 的表达ꎬ表达量 然而茶 树 TIFY 基 因 特 性 和 系 统 进 化 等 却 未 见
随时间的增加而增加ꎬ在 12 h 时表达量最高ꎬ随后 报道ꎮ
降低ꎬ而 TIFY15 在不同时间段表达变化不大ꎻ冷 茶树 中 19 个 TIFY 基 因 被 鉴 定ꎬ 结 果 表 明
胁迫下ꎬ TIFY 都存在响应ꎬ但不尽相同ꎬ如冷胁迫 TIFY 基因家族包含 4 个亚蛋白家族且各家族成员
显著诱导了 TIFY8 和 TIFY11 的表达ꎬ表达量随时 中 TIFY ̄motif 的氨基酸序列包含多种类型ꎬTIFY
间的增加而增加ꎬ而 TIFY2 在不同时间段表达变 蛋白在拟南芥、水稻、毛果杨和茶树 4 个物种间分
化不大ꎬTIFY6 随时间的增加而增加ꎬ随后降低ꎻ干 为 7 个类群ꎮ 除 CsTIFY8、CsTIFY14、 CsTIFY15 和
旱处理下ꎬ TIFY 基因均表达ꎬ但表达水平有一定 CsTIFY16 外ꎬ其他 15 个 CsTIFY 都分别分布在 2、
差异ꎬ干旱胁迫显著诱导了 TIFY6 和 TIFY11 的表 3、6、8、9、12、13 和 15 染色体上ꎬ其中 CsTIFY 各成
达ꎬ表达量随时间的增加而增加且在 12 h 时表达 员在染色体形成了 4 对同源基因簇ꎬ说明该成员
量最高ꎬ随后降低ꎬ而 TIFY8 表达基本没有影响ꎻ 间存在一定的进化关系ꎮ
盐 胁 迫 下ꎬ TIFY1、 TIFY2、 TIFY11、 TIFY15 和 茶树 TIFY 基因家族进化关系较近的成员间具
TIFY18 随胁迫时间增加ꎬ随后降低ꎬ而 TIFY6 不随 有基本相同的内含子 / 外显子组成ꎬ同水稻( Ye et
时间的变化而变化ꎬ可知转录组数的基因表达量 al.ꎬ 2009 ) 和 二 穗 短 柄 草 ( Brachypodium
和 RT ̄qPCR 基因表达量趋势基本一致(图 6)ꎮ distachyon)(Zhang et al.ꎬ 2015) 研究的 TIFY 基因
2.8 茶树 CsTIFY 基因表达模式分析 家族规律基本一致ꎬ不同分组的成员间的组成存
将不 同 基 因 表 达 量 数 据 进 行 热 图 分 析ꎬ 在差异(Xu et al.ꎬ 2012ꎻHakata et al.ꎬ 2017)ꎮ 对
CsTIFY1、CsTIFY2、 CsTIFY3 在各个组织表达量都 于 TIFY 的保守基序ꎬTIFY8 仅含有 TIFYꎬ此外ꎬ其
较高ꎬ而 CsTIFY5 和 CsTIFY7 在各个组织几乎不表 成 员 TIFY8、 TIFY9、 TIFY10、 TIFY12、 TIFY13、
达且 CsTIFY11 在根、顶芽、嫩叶和花表达较高基 TIFY14、 TIFY15、 TIFY18 和 TIFY19 缺 少 了 JAS ̄
本一致ꎬ其中 CsTIFY6 在顶芽表达量最高ꎬ表明茶 dominꎬ这些具有特殊结构的成员可能在茶树的进
树 CsTIFY 基因家族成员在不同组织器官表达均 化中具有独特性(赵晓晓等ꎬ2019)ꎮ
存在差异性ꎬ暗示其可能基因功能存在分化( 图 茶树 CsTIFYs 启动子与激素、胁迫相关的作用
7)ꎮ 元件占主导地位ꎬ但不同基因作用元件的种类和
个数均不同( Xie et al.ꎬ 219)ꎬ随着激素种类和程
3 讨论与结论 度的改变ꎬ茶树 CsTIFYs 基因响应发生改变ꎬ进而
导致其功能差异性ꎮ 此外ꎬ部分基因含有不同的
TIFY 基因是植物特有的转录因子ꎬ有可以调 胁迫响应元件[低温响应元件( Box 4、LTR)、干旱
控植物分生组织分裂等重要作用ꎬ并显著影响植 响应 元 件 ( Box 4、 GATA ̄motif、 W box 和 AT ̄rich
物的生长发育( 赵晓晓等ꎬ2019ꎻ温东等ꎬ2020ꎻLiu element)、盐响应元件( GATA ̄motif、W box 和 AT ̄
et al.ꎬ 2020ꎻ沙伟等ꎬ2021)ꎮ 尤其是 JAZ 蛋白ꎬ不 rich element)、激素响应元件(ARE、Box 4、CGTCA ̄
仅是茉莉酸(jasmonic acidꎬ JA)信号通路的重要负 motif、TGACG ̄motif、 ABRE、 AAGAA ̄motif) 及 逆 境
调控转录因子ꎬ还是激素网络的调控枢纽ꎬ通过诱 响应元件( MYB、G ̄Box、MYC 和 STRE) 等]ꎬ推测
导茉莉酸刺激来启动茉莉酸应答基因的转录( 吴 CsTIFY 可能参与不同激素信号转导调节ꎬ从而对
莹等ꎬ 2008)ꎮ 水稻 OsJAZ9 与 OsSLR 的互作介导 环境 胁 迫 作 出 应 答ꎮ 为 了 更 好 地 了 解 茶 树
了茉莉酸与赤霉素( gibberellinꎬ GA) 的拮抗作用 CsTIFYs 基因的表达差异ꎬ本研究对 CsTIFYs 在不
来协调 植 株 应 急 响 应 ( Um et al.ꎬ 2018)ꎻ JAZ1 / 同组织的基因表达进行分析ꎬ结果发现茶树 TIFY1
JAZ4 与 CBF 诱导因子相互作用抑制转录 ICE1 的 基因对不同胁迫不同时间段表达量都很高ꎬ只有
功能ꎬ从而减弱了 CREPEAT BINDING FACTORS 在 PEG ̄6000 和盐胁迫下ꎬTIFY1 随时间的增减表
(CBFs)的表达ꎻJAZ1 或 JAZ4 的过表达抑制拟南 达量 降 低ꎬ TIFY1、 TIFY2、 TIFY3、 TIFY6、 TIFY11、
芥对冻胁迫的响应(Hu et al.ꎬ 2013)ꎻ在甘蓝型油 TIFY12、TIFY14 和 TIFY16 激 素 处 理 高 表 达ꎬ 而