Page 43 - 《广西植物》2022年第8期

ऐ 期 黎 芳 婷 等 ᧥ 广西三种真红树植物可培养细菌多样性及其生物活性初筛 ϟ ԰ ँ Ꭾ
ϟ঎԰঎ሕ 细菌发酵粗提物的活性筛选 ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾϟ԰ϟܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾ࿗ᤃሕܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾጢϟऐᖔ可能为潜在
ϟ঎԰঎ሕ঎ ϟ 细菌发酵及粗提物提取 জ 参 考 李蜜等 新物种ᖔ图 ϟ 为潜在新菌与相似度最高对照菌的
ྉ԰ԡ԰ԡɯ的方法发酵可培养细菌ᖔ离心收集的发酵 શ᥋Ȯ 系统进化树ᤥϟϟ 个潜在新物种隶属于 ँ 科 ϟϟ
液用等体积的乙酸乙酯萃取ᖔ减压蒸干乙酸乙酯 属ᖔ其中 ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾ࿗ᎮᎮ 和 ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ ᎮᎮᤃϟ 分别与纤维
层ᖔ用甲醇溶解收集ᖔ挥干甲醇即得细菌发酵粗提 单胞 菌属的巴基斯坦纤维单 胞 菌 ྉ ࣷᓣᤀᤀࣩᤀᅳቂᅳႥᐹ໧
物ᖔ置于 ࿗ቩ 冰箱保存备用ᤥ ᡓᐹҧᔠ໧ᡙᐹႥᓣႥ໧ᔠ໧ ɯ 和 ᤹ᐹʗቂᅳʗᔠዞᅳᤀᐹ 属的 ᤹ᐹʗቂᅳʗᔠዞᅳᤀᐹ
ϟ঎԰঎ሕ঎԰ 细菌抑菌实验জ 检定板的制备᧥参考许敏 ҧᅳʗᓣዞࣩ໧ 相似度最高ᖔ可能为稀有放线菌ᤥ 说明真
等ྉ԰ԡϟᤃɯ的方法ᖔ将生长良好的指示菌接种于装 红树植物可培养细菌多样性丰富ᖔ可为研究生物
有 ጢԡ ቝᓂ 已灭菌 ᓂା 液体培养基的三角瓶中ᖔϟऐԡ 活性物质提供良好的菌株资源ᤥ
ʢኼቝᔽႿ 摇床培养 ँၤ 得到对数生长期的指示菌混 ԣॹԣ ᇺጇ 株细菌在不同真红树植物ܓ植物部位及培养
᥋ϟ
悬液ᖔ取混悬液加入灭菌后低于 ጢጢ ቩ 的 ᓂାྉዶɯ 培 基中的分布
养基中ᖔ稀释成 ԡ঎ሕᠮ的浓度ᤥ 灭菌的 ᓂା 固体培 不同植物种类及不同植物生境影响其可培养
养基倾注到培养皿中ᖔ凝固后ᖔ再倾注一层加有指 细菌的丰富程度ᤥ 如图 ԰ 所示ᖔ从不同样品中分
示菌的培养基ᖔ待其凝固即得检定板ᤥ 离得到细菌多样性依次是木榄 ሕᢦ红海榄ᢦ秋茄 ԰ᢦ
纸片扩散法进行抑菌活性检测᧥参考曾臻和 秋茄 ϟᢦ木榄 ԰ᢦ木榄 ϟᤥ ሕ 株木榄均采集于防城
谭强来ྉ԰ԡϟँɯ 的方法ᖔ用甲醇溶解配成 ԰ԡ ቝ੫ኼ 港ᖔ但分离到的菌株种类及数量不同ᖔ可能由于植
᥋ϟ 物采集时的老嫩程度及所取的植物组织部位差异
ቝᓂ 的细菌发酵粗提物ᖔ吸取 ጢဂᓂ 至直径为 ᤃቝቝ
的无菌滤纸片上ྉ加入 ጢဂᓂ 甲醇的滤纸片作阴性 所致ᤥ 两株秋茄分别采样于北海海域两个采样
对照ɯᖔ挥干甲醇ᖔ贴于检定板表面ᖔ于 ሕᎮ ቩ 培养 点ᖔ采集地点不一致ᖔ分离到的细菌种属数量和物
԰࿗ ၤᖔ观察并记录抑菌圈的大小ᖔ实验重复 ሕ 次ᖔ计 种完全不同ᤥ 秋茄 ϟྉ èϟɯ 分离得到的 ऐ 株细菌为

算抑菌圈平均值ᤥ 喜盐噬冷菌ྉዛᤀ੖ᅳʗᔠᡓ၊ᐹ੖ࣩ໧ ၊ᐹᤀᅳᡓ၊ᔠᤀࣩ໧ɯܦዛࣩʗᐹႥᡙᔠቂᅳႥᐹ໧
ϟ঎԰঎ሕ঎ሕ 细菌酶活性实验জ 酶活性菌株的筛选᧥参 ዞᅳʗᐹᤀᔠዞᔠʐᐹܦ特基拉芽孢杆菌ྉଧᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ ᡙᓣफࣩᔠᤀᓣႥ໧ᔠ໧ɯܦ越
考杨桂柳等ྉ԰ԡϟጢɯ 的方法ᖔ点植法将对数生长期 南芽孢杆菌ྉ ଧॹ צᔠᓣᡙႥᐹቂᓣႥ໧ᔠ໧ɯܦ海水纪氏菌ྉ ȣᔠᓣᤀᤀᐹ

的细菌接种于相应的酶活性平板培养基上ᖔ԰ऐ ቩ ᐹफࣩᔠቂᐹʗᔠ໧ ɯܦ ᒦᐹᤇʗᓣႥऊᔠᐹ ༁ᡱ঎ܦ 植物内微球菌
恒温培养 ࿗ጲᤃ ʛᖔ观察细菌生长情况和菌落周围是 ྉ᤹ᔠዞʗᅳዞᅳዞዞࣩ໧ ᓣႥʐᅳᡓ၊ᡥᡙᔠዞࣩ໧ɯܦ 杀珊瑚橙色单胞菌

否出现透明圈ᖔ实验重复 ሕ 次ᤥ ྉዛࣩʗᐹႥᡙᔠቂᅳႥᐹ໧ ዞᅳʗᐹᤀᔠዞᔠʐᐹɯᖔ秋茄 ԰ྉ è԰ɯ 分离获得的
细菌 为拉氏无色杆 菌 ྉ ዛዞ၊ʗᅳቂᅳᤇᐹዞᡙᓣʗ ʗࣩ၊ᤀᐹႥʐᔠᔠɯܦ
԰জ 结果与分析 ዛ໧ᡙᔠዞዞᐹዞᐹࣩᤀᔠ໧ ໧ᅳᤀᔠ໧ᔠᤀצᐹᓣܦ 暹罗芽孢杆菌 ྉ ଧᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧
໧ᔠᐹቂᓣႥ໧ᔠ໧ɯܦ枯草芽孢杆菌ྉଧॹ צᐹႥᔠᤀᤀᓣᐹɯܦÞᔠዞᡙᔠᤇᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧
ԣॹϓ 三种真红树植物可培养细菌多样性分析 ၊ᐹᤀᅳᡓ၊ᔠᤀࣩ໧ܦ ᤹ᐹʗቂᅳʗᔠዞᅳᤀᐹ ҧᅳʗᓣዞࣩ໧ܦ ᤹ᡥዞᅳᤇᐹዞᡙᓣʗᔠࣩቂ
经菌落形态排重和 ϟᤃ୩ ʢ኏શዶ 基因测序比对 ዞᅳႥዞᓣᡓᡙᔠᅳႥᓣႥ໧ᓣܦ ۗᐹᓣႥᔠᤇᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ ࣩʗᔠႥᐹᤀᔠ໧ܦ ୒၊ᔠႥᓣᤀᤀᐹ
分析ᖔ共获得 ሕጢ 株可培养细菌ᤥሕጢ 株菌株分布在 ʐᐹᓣᢝᓣᅳႥᓣႥ໧ᔠ໧ᖔ两株秋茄植物共有细菌属为芽孢杆菌
԰ሕ 个科 ԰ऐ 个属ᖔሕጢ 株可培养细菌物种组成如表 ԰ 属ᖔ其余均为各自的特有属ᤥ 由此可见ᖔ真红树植
所示ᤥ 其中ᖔ 芽孢杆菌属 ྉ ଧᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ɯ 占菌株总 数 物生长不同阶段及植物生境差异可显著影响其可
ϟ࿗঎ሕᠮᖔ属于优势菌属ᖔ此结果与其他学者研究相 培养细菌物种多样性ᤥ
同ྉ韩敏敏等ᖔ԰ԡ԰ԡɯᖔ这表明芽孢杆菌属占红树植 不同部位的细菌多样性不同ᤥ 由图 ሕ 可知᧥从
物微生物统治地位ᤥ᣽ᔽቝ 等ྉ԰ԡϟ࿗ɯ认为 ϟᤃ୩ ʢ኏શዶ ᤃ 份植物组织茎中分离获得 ϟϟ 株可培养细菌ᖔ隶
基因序列相似性小于ँऐ঎ᤃጢᠮ的菌株有 ऐԡᠮ为潜在 属于 ँ 个属ଫ࿗ 份植物组织根中分离得到的 ϟԡ 株
新物种ᤥ 对三种真红树植物可培养细菌进行新颖 细菌隶属于 ँ 个属ଫሕ 份泥土样品分离得到的 ϟԡ

性分 析ᖔ 发现 ሕጢ 株细菌中有 ϟϟ 株细 菌 的 ϟᤃ୩ 株细菌隶属于 Ꭾ 个属ଫᤃ 份植物组织叶中分离得到
ʢ኏શዶ 基 因 序 列相似性低于 ँऐ঎ ᤃጢᠮᖔ 分别为 的 ऐ 株细菌隶属于 ऐ 个属ଫϟ 份植物组织花中分离

᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾ࿗ᤃ԰ܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾԡᤃᤃܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾ࿗ᎮᎮܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾԡᤃ࿗ܦ 得到的 ԰ 株细菌隶属于 ԰ 个属ଫ԰ 份果实中分离得
᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾԡᤃሕܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾϟϟጢܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ ᎮᎮᤃϟܦ᥈ᣮ᧧ᥘ᧕ Ꭾ࿗ँऐܦ 到 ϟ 株细菌ᤥ 本研究从植物组织茎中分离得到的