Page 88 - 《广西植物》2022年第9期
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ϟ ጢ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
۪ၤᑕʢቝᑕዹᔽᑕ ାᔽᆍᡷᔀዹၤ 公司ɯଫ微孔树脂 ᥘऊ᧧ ྉ ऊ۪̀ԡ ᣰ 后ᖔ按照 ᥈ʢᔽᔀ༁༁ 试剂的标准操作处理ᤥ 同一批次的
۪ϟԡᖔᎮጢ ጲ ϟጢԡ ဂቝᖔ日本三菱公司ɯᤥ 细胞按照 ᥘఋ୩ 法测定细胞活力ᤥ
生物安全柜ྉା୩ऊͱϟϟԡԡ᧧᧧ ାͱᣮᖔ济南鑫贝西 所有实验均设置 ሕ 个复孔ᖔ结果以平均值加减
生物技术有限公司ɯଫ二氧化碳细胞培养箱ྉ۪͐᥋ 标准差表示ᤥ 利用 ୩۪୩୩ ጢԡ 软件进行单因素方
ऐԡᖔ济南鑫贝西生物技术有限公司ɯଫ倒置生物显 差分析和 ᧕ࣼႿႿᔀᡷᡷᆥ ༁ 多重比较检验来分析实验的
微镜ྉશ᧧ାͱϟԡԡᖔ宁波永新光学股份有限公司ɯଫ多 数据ᖔۗጐԡԡጢ接受为显著性差异ᤥ 采用回归分析
功能 酶 标 仪 ྉ ᥘВᓂఋ᧧୩ዶશ ᥘሕᖔ 美国 ఋၤᔀʢቝᆍ 公 的方法计算 ᧧ऊ 值ᤥ
ጢԡ
司ɯᤥ
ఋጢ 培养瓶ܦ离心管ܦँᤃ 孔板ྉ 美国 ऊᆍʢႿᔽႿ੫ 公 জ 结果与分析
司ɯଫ胎牛血清 èା୩ྉ 美国 ᥈ᔽᤦዹᆍ 公司ɯଫ᧕ᥘጶᥘ 培
养基ܦ۪ା୩ܦ胰蛋白酶ྉ 以色列 ାᔽᆍᆍ੫ᔽዹᑕ ᧧Ⴟʛࣼ༁ᡷʢᔽᔀ༁ ԣॹϓ 化合物结构鉴定
公司ɯଫ 脂多糖ܦ 地塞米松 ྉ 美国 ୩ᔽ੫ቝᑕ 公司ɯଫ 化合 物 ϓ জ 黄色针状晶体ᖔ 分子式为
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᥈ʢᔽᔀ༁༁ 试剂ܦᥘఋ୩ྉ美国 ۪ʢᆍቝᔀ੫ᑕ 公司ɯᤥ ऊ ̀ ᨃ ᤥጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥࿗࿗ँ Џ ᥘ շ ̀ ᖔ ̀શᥘ
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ϓॹԣ 实验方法 ྉጢԡԡ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ ᨃ᧕ɯ Р᧥ऐϟԡ ྉ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ऐँ ̀झᖔ
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ϟϟ 提取与分离জ 将采集的拔毒散阴干并粉碎 ̀᥋ࣕᖔᤃࣕɯᖔᤃऐँ ྉ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ऐँ ̀झᖔ ̀᥋ሕࣕᖔ ጢࣕɯᖔ
后ᖔ得到样品 ሕϟ Ҵ੫ᖔ用 ँጢᠮ的乙醇常温浸提 Ꭾʛᖔ ᤃ࿗ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ϟ ̀झᖔ ̀᥋ऐɯᖔ ᤃ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ
合并提取液并减压浓缩ᖔ重复 ሕ 次ᖔ共得到浸膏 ϟ ̀झᖔ ̀᥋ᤃɯᖔ ጢϟጢ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ Ꭾऐ ̀झᖔ ̀᥋ϟ×ɯᖔ
ϟऐ ੫ᤥ 加水分散浸膏成混悬液ᖔ用乙酸乙酯萃取 ሕऐሕͱሕ࿗ ྉᤃ̀ᖔ ᆍᔀʢᑕᡱᖔ ̀᥋×᥋ᤃ×ɯᤥ ऊ શᥘ ྉϟጢ
ϟሕ
得到粗样 ᤃԡ ੫ᖔ再将其置于微孔树脂 ᥘऊ᧧ 色谱柱 ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ ᨃ᧕ɯ Р᧥ ϟᎮँᤃँ ྉ ऊ᥋࿗ɯᖔ ϟᤃᤃԡሕ ྉ ऊ᥋Ꭾɯᖔ
ሕ
中ᖔ用不同梯度的甲醇 ᨒ 水体系ྉሕԡᨒ Ꭾԡᖔጢԡᨒ ጢԡᖔ ϟᤃሕԡऐ ྉ ऊ᥋ጢɯᖔ ϟᤃϟ ᤃԡ ྉ ऊ᥋࿗ࣕɯᖔ ϟጢँ ԡᤃ ྉ ऊ᥋ँɯᖔ
Ꭾԡ ᨒ ሕԡᖔँԡ ᨒ ϟԡɯ 依次洗脱ᖔఋᓂऊ 点板合并极性相 ϟጢऐ ጢϟ ྉ ऊ᥋ɯᖔ ϟሕጢ ጢᎮ ྉ ऊ᥋ሕɯᖔ ϟሕ ሕᤃ ྉ ऊ᥋ࣕᖔ
同的部分ᖔ得到 èʢ ϟ ጲ èʢ ࿗ 四个组分ᤥ 取 èʢ ྉऐ ᤃࣕɯᖔ ϟᤃँ ྉ ऊ᥋ϟࣕɯᖔ ϟϟᤃϟԡ ྉ ऊ᥋ሕࣕᖔ ጢࣕɯᖔ ϟԡጢᤃᎮ
੫ɯ置于硅胶色谱柱中ᖔ用不同梯度乙酸乙酯和丙 ྉऊ᥋ϟԡɯᖔ ϟԡ࿗ँ࿗ ྉऊ᥋ϟ×ɯᖔ ँँऐᎮ ྉऊ᥋ᤃɯᖔ ँ࿗Ꭾሕ ྉऊ᥋
酮 以及二氯甲烷和甲醇反复洗脱ᖔ 再经过 ऐɯᖔ ᎮᎮϟሕ ྉऊ᥋ጢ×ɯᖔ Ꭾጢԡ ྉ ऊ᥋ሕ×ɯᖔ Ꭾሕԡϟ ྉ ऊ᥋×ɯᖔ
୩ᔀᡱၤᑕʛᔀ ᓂ̀ͱ ԡ ྉ 甲醇ɯ 洗脱ܦ半制备 ۪̀ᓂऊྉ 乙 Ꭾԡԡϟ ྉ ऊ᥋࿗×ɯᖔ ᤃϟ ँऐ ྉ ऊ᥋ᤃ×ɯᤥ 以上数据与文献
腈 ᨒ 水ɯ梯度洗脱ᖔ得到得到化合物 ϓྉऐጢ ቝ੫ɯܦ ྉ李昉等ᖔԡϟԡɯ 基本一致ᖔ故鉴定为 Ҵᑕᔀቝᡱᔀʢᆍ᥋ሕ᥋
ԣྉሕԡ ቝ੫ɯܦྉϟϟ ቝ੫ɯܦጇྉϟԡऐ ቝ੫ɯܦᣤྉᤃϟ ቝ੫ɯܦ ᧣᥋Ꭻ᥋᧕᥋੫ࣼዹᆍᡱᢃʢᑕႿᆍ༁ᔽʛᔀᤥ
᎒ྉ࿗࿗ ቝ੫ɯܦࣽྉᤃጢ ቝ੫ɯܦ࣮ྉ࿗ ቝ੫ɯܦϓԔྉᤃ ቝ੫ᤥ 取 化合 物 ԣ জ 黄 色无定型粉末ᖔ 分子式为
èʢሕྉ ੫ɯ和 èʢ ࿗ྉऐ ੫ɯ 分别置于硅胶色谱柱中用 ऊ ̀ ᨃ ᤥጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥ጢँጢ Џ ᥘ շ ̀ ᖔ ̀શᥘ
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不 同梯度二氯甲烷和甲醇反复洗脱ᖔ 结合 ྉጢԡԡ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ ᨃ᧕ɯ Р᧥ऐԡऐ ྉ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ऐँ ̀झᖔ
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୩ᔀᡱၤᑕʛᔀ ᓂ̀ͱԡ ྉ 甲醇ɯ 以及半制备 ۪̀ᓂऊᖔ分别 ̀᥋ࣕᖔᤃࣕɯᖔᤃँԡ ྉ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ऐऐ ̀झᖔ ̀᥋ሕࣕᖔ ጢࣕɯᖔ
得到化合物 ᇺྉሕ࿗ ቝ੫ɯܦϓϓྉऐ ቝ੫ɯܦϓԣྉ࿗ϟ ቝ੫ɯܦ ᤃ࿗ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ԡ ̀झᖔ ̀᥋ऐɯᖔ ᤃ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ
ϓᇺྉሕ ቝ੫ɯܦϓྉ࿗ऐ ቝ੫ɯ 和化合物 ϓጇྉሕጢ ቝ੫ɯܦ ԡ ̀झᖔ ̀᥋ᤃɯᖔ ጢϟ࿗ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ Ꭾ ̀झᖔ ̀᥋ϟ×ɯᖔ
ϓᣤྉϟϟԡ ቝ੫ɯᖔ化合物结构图见图 ϟᤥ ࿗ጢ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ϟᤃ ̀झᖔ ̀᥋ϟᎦɯᖔ ϟϟሕ ྉ ሕ̀ᖔ ʛᖔ
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ϟ 抗炎活性实验জ ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 细胞使用 ᧕ᥘጶᥘ ȣ ᢉ ᤃ ̀झᖔ ̀᥋ᤃᎦɯᤥ ऊ શᥘ ྉϟጢ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ ᨃ᧕ɯ
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完全培养基ྉϟԡᠮ èା୩ᖔϟᠮ 青霉素ܦ链霉素ɯᖔ在 ሕᎮ Р᧥ ϟᎮँ࿗ϟ ྉ ऊ᥋࿗ɯᖔ ϟᤃᤃ࿗ ྉ ऊ᥋Ꭾɯᖔ ϟᤃሕԡᎮ ྉ ऊ᥋ጢɯᖔ
ቩܦጢᠮ ऊᨃ 的细胞培养箱中培养ᤥ 选择处于对数生 ϟᤃϟጢሕ ྉ ऊ᥋࿗ࣕɯᖔ ϟጢँ ሕँ ྉ ऊ᥋ɯᖔ ϟጢऐ ᤃ ྉ ऊ᥋ँɯᖔ
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长期的细胞ᖔ按密度为每毫升 ϟġϟԡ 个均匀种入 ँᤃ ϟሕጢጢϟ ྉ ऊ᥋ሕɯᖔ ϟሕ ሕऐ ྉ ऊ᥋ࣕᖔ ᤃࣕɯᖔ ϟ ᎮᎮ ྉ ऊ᥋
孔板ᖔ每孔 ϟԡԡ ဂᓂᤥ 贴壁培养 ϟऐ ၤ 后ᖔ空白组加入 ϟࣕɯᖔ ϟϟᤃϟ࿗ ྉ ऊ᥋ሕࣕᖔ ጢࣕɯᖔ ϟԡ࿗ᤃሕ ྉ ऊ᥋ϟԡɯᖔ ϟԡ࿗ጢऐ
完全培养基ᖔ模型组加入含终浓度为 ϟဂ੫ኼቝᓂ 脂 ྉ੫ዹ ऊ᥋ϟ×ɯᖔ ϟԡ ࿗࿗ ྉ ʢၤᑕ ऊ᥋ϟᎦɯᖔ ϟԡԡ ԡጢ ྉ ऊ᥋ᤃɯᖔ
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多糖ྉᓂ۪୩ɯ的完全培养基ᖔ实验组在模型组的基础 ँ࿗ँϟ ྉ ऊ᥋ऐɯᖔ Ꭾऐ ϟጢ ྉ ੫ዹ ऊ᥋ሕ×ɯᖔ ᎮᎮ ሕ ྉ ੫ዹ ऊ᥋
上加入终浓度为 ጢԡ ဂቝᆍኼᓂ 的待测化合物ᖔ阳性 ጢ×ɯᖔ ᎮጢᎮᎮ ྉ ੫ዹ ऊ᥋×ɯᖔ Ꭾሕऐँ ྉ ʢၤᑕ ऊ᥋࿗Ꭶɯᖔ Ꭾँ
᥋ϟ
对照为地塞米松ྉʛᔀᑕቝᔀᡷၤᑕ༁ᆍႿᔀᖔ᧕ᔀɯᤥ 处理 ࿗ ၤ ྉ ੫ዹ ऊ᥋࿗×ɯᖔ Ꭾϟԡ ྉʢၤᑕ ऊ᥋ሕᎦɯᖔ Ꭾϟ࿗ጢ ྉʢၤᑕ ऊ᥋Ꭶɯᖔ
