Page 93 - 《广西植物》2023年第1期

１ 期 苏秀丽等: 黄花倒水莲内生真菌生物活性评价及 ＨＮＬＦ￣４４ 菌株鉴定 ８ ９

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔ Ｐｏｌｙｇａｌａ ｆａｌｌａｘ ｈａｓ ａ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ. Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｆｕｌｌｙ ｄｅｖｅｌｏｐ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
ｆｕｎｇｉ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｗｉｌｄ Ｐ. ｆａｌｌａｘ ａｎｄ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ￣ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｉｔｈ ａｎ ａｎｔｉ￣ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ
ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｐ. ｆａｌｌａｘ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ａｓ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｂｊｅｃｔꎬ ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ａｇａｉｎｓｔ ｓｉｘ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｌａｔｅ ｃｏｎｆｒｏｎｔａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄꎻ ａｎｄ ｔｈｅ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂｙ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ＤＰＰＨ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｔｏｔａｌ
ｒｅｄｕｃｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｒｏｔｈ. Ｆｉｎａｌｌｙꎬ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｉｔｈ ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｎｄ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｔｈｅｎ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｔｒａｉｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌａｎｋｉｎｇ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ
ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ｉｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔꎬ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｗｏ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｐ. ｆａｌｌａｘ ｈａｄ ｏｂｖｉｏｕｓ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｎ
ｓｉｘ ｋｉｎｄｓ ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ. ｓｐ. ｃｕｂｅｎｓｅꎬ Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ ｚｉｎｇｉｂｅｒｉꎬ Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉꎬ Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ

ｆｉｊｉｅｎｓｉｓꎬ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉꎬ Ｆ. ｏｘｙｓｐｏｒｕｍꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ５０.３％ ｔｏ ９１.４％. Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍꎬ ＨＮＬＦ￣５ ｓｔｒａｉｎ
ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉꎬ ｗｉｔｈ ａ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ７３.２％ꎬ ａｎｄ ＨＮＬＦ￣４４ ｓｔｒａｉｎ ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ
ｅｆｆｅｃｔ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ. ｓｐ. ｃｕｂｅｎｓｅꎬ ｗｉｔｈ ａ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ９１.４％. (２) Ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
ｏｆ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇａｌ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｒｏｔｈ ｈａｄ ｇｏｏｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ｔｈｅ ＤＰＰＨ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｒａｔｅ ｗａｓ
ａｂｏｖｅ ８０％ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｖａｌｕｅ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０.２７９ ２ ｔｏ ０.７４８ ８. (３) Ｉｔ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｓｅｅｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ
ｓｔｒａｉｎ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＨＮＬＦ￣４４ ｓｔｒａｉｎ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ｆｕｎｇｕｓ. Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ
ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｐｏｌｙｇａｌａ ｆａｌｌａｘ ｈａｖｅ ａ ｇｏｏｄ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｐｌａｎｔ ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ
ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ｗｈｉｃｈ ｌａｙｓ ｔｈｅ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｎｅｗ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｆｒｏｍ
Ｐ. ｆａｌｌａｘ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｐｏｌｙｇａｌａ ｆａｌｌａｘꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔꎬ ａｎｔｉｆｕｎｇｉꎬ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ

植物内生真菌是指长期生活在健康植物体内ꎬ 病ꎬ 烟 曲 霉 ( Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ) 和 黑 曲 霉 ( Ａ.
但在体内生活的这段时间不会引起宿主产生病害 ｎｉｇｅｒ) 具 有 良 好 的 防 治 作 用 ( 郭 东 升 等ꎬ ２０２０ꎻ
的一类真菌(隋丽等ꎬ２０２１)ꎮ 药用植物内生真菌具 Ｅｒｆａｎｄｏｕｓｔ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎮ 因此ꎬ从药用植物内生真
有良好的抗氧化活性、抑菌活性等ꎬ在农医药行业 菌中获得具有生物活性的次级代谢产物是可行的ꎬ
的活性产物开发中发挥重要作用ꎮ 研究表明ꎬ链格 药用植物内生真菌次级代谢产物为天然产物的开
孢属、间座壳属等内生真菌具有良好的抗氧化活 发提供了强大动力ꎮ
性ꎬ殷娜等(２０２２)从药用植物马利筋中发现具有抗 黄花倒水莲(Ｐｏｌｙｇａｌａ ｆａｌｌａｘ)ꎬ别称黄花远志ꎬ
氧化活性的链格孢属和间座壳属内生真菌ꎻ程庭峰 远志科( Ｐｏｌｙｇａｌａｃｅａｅ) 远志属( Ｐｏｌｙｇａｌａ) 植物ꎬ是
等(２０２１)从野生麻花艽的一株 Ｃａｄｏｐｈｏｒａ ｓｐ.内生 一种深受少数民族喜爱的药用植物( 翁颖妮等ꎬ

真菌 Ｇｓ￣６ 发 酵 液 中 发 现 槲 皮 素 等 黄 酮 类 物 质ꎬ ２０２０)ꎮ 其根部富含皂苷、黄酮、多糖类等物质ꎬ具
ＤＰＰＨ 清除自由基的 ＩＣ 为 ０.０３９ ９ ｍｇ ×ｍＬ ꎬ具有 有抗衰老、 降 血 糖 等 多 种 生 物 活 性 ( 姚 志 仁 等ꎬ
￣１
５０
较强的清除活性ꎻ寇晓琳等(２０２０)从青钱柳中发现 ２０２０ꎻ李根等ꎬ２０２２)ꎮ 目前ꎬ虽然国内外已有许多
３ 株能产生黄酮的链格孢属真菌ꎮ 此外ꎬ镰刀菌属、 有关黄花倒水莲化学成分和药理活性的研究ꎬ但
木霉属等对病原菌具有良好的抑制作用ꎬＺｈａｏ 等 未曾见到有关黄花倒水莲内生真菌及其次级代谢
(２０２０ ) 研 究 发 现 １ 株 内 生 真 菌 Ｓｅｉｍａｔｏｓｐｏｒｉｕｍ 产物生物活性的研究ꎮ 有研究表明ꎬ从药用植物
ｓｐ. Ｍ７ＳＢ ４１ 能够增强宿主植物抵抗蔷薇白粉病的 远志中分离得到的链格孢属内生真菌不仅具有抑
能力ꎬ 降 低 感 染 蔷 薇 白 粉 病 的 风 险ꎮ Ｂｕｃａｒｅｉ 等 菌活性ꎬ而且能够产生皂苷类物质、香豆素等抗氧
(２０１９)将一种白僵菌(Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ)定殖在西 化物质ꎬ具有重要的研究价值( 王玉君等ꎬ２００９ꎻ付
红柿和辣椒植株根部一段时间后发现ꎬ其能够减轻 建红和熊东兰ꎬ２０１３)ꎮ 据此ꎬ我们提出黄花倒水
由灰霉病菌(Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ) 引起的灰霉病病害发 莲内生真菌也具有抗氧化活性、抑菌活性的推测ꎮ
生程 度ꎮ 此 外ꎬ 内 生 真 菌 燕 麦 镰 刀 菌 ( Ｆｕｓａｒｉｕｍ 在内生真菌与宿主有着相似活性的基础上ꎬ以黄
ａｖｅｎａｃｅｕｍ) 和 木 霉 属 ( Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ) 的 康 宁 木 霉 花倒水莲内生真菌为研究对象ꎬ以香蕉专化尖孢
(Ｔ. ｋｏｎｉｎｇｉｉ)和深绿木霉(Ｔ. ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ) 对柑橘青霉 镰刀菌(Ｆｕｓａｒｉｕｎ ｏｘｙｓｐｏｒｕｎ ｆ. ｓｐ. ｃｕｂｅｎｓｅ)、香蕉具