Page 147 - 《广西植物》2023年第11期

１１ 期 孙国峰等: 大花地不容块根生物碱成分的研究 ２ １ ０ ７

ｏｆ Ｓ. ｍａｃｒａｎｔｈａ ａｎｄ ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ ｈａｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ (Ａ５４９)ꎬ ｗｉｔｈ ＩＣ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ７.５×
５０
￣４ ￣１ ￣９ ￣１
１０ ｇｍＬ ａｎｄ ６.５９×１０ ｇｍＬ ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ２ꎬ ３ꎬ ４ꎬ ７ꎬ ８ꎬ ９ ａｎｄ １０ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｉｍｅ
ｆｒｏｍ Ｓ. ｍａｃｒａｎｔｈａ. Ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｆｒｏｍ Ｓ. ｍａｃｒａｎｔｈａ ｂｅｌｏｎｇ ｔｏ ｆｉｖｅ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｍｏｒｐｈａｎｅｓꎬ
ｐｒｏａｐｏｒｐｈｉｎｅｓꎬ ａｐｏｒｐｈｉｎｅｓꎬ ｂｅｎｚｙｌｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｉ ｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｏｂｅｒｂｅｒｉｎｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｓｔｅｐｈａｎｉａ ｍａｃｒａｎｔｈａꎬ ａｌｋａｌｏｉｄｓꎬ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓꎬ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ

大花地不容( Ｓｔｅｐｈａｎｉａ ｍａｃｒａｎｔｈａ) 是 １９８８ 年 ４００ 核磁共振谱仪ꎮ
报道的一个新种(罗献瑞ꎬ１９８８)ꎬ该种归属于千金 大花地不容块根ꎬ２０１９ 年 ３ 月购自安国冷背
藤属山乌龟亚属山乌龟组ꎬ主要分布于云南ꎬ由于 药材有限公司ꎬ经乐山师范学院成英副教授鉴定
其花形特殊ꎬ在云南漾濞县的部分家庭将大花地 为防己 科 千 金 藤 属 植 物 大 花 地 不 容 ( Ｓｔｅｐｈａｎｉａ
不容作为观赏植物栽培(谢道涛ꎬ２０１４)ꎮ « 中国植 ｍａｃｒａｎｔｈａ)的块根ꎬ样本保存于乐山师范学院乐山
物志»记载防己科千金藤属植物约 ６０ 种ꎬ分布于 特色农产品药用成分研发工程中心(２０１９０３０１)ꎮ
亚洲和非洲的热带和亚热带地区ꎬ少数产于大洋
洲ꎬ分布于中国的千金藤属植物有 ３９ 个种ꎬ分别 ２ 提取与分离
属于 ３ 个亚属(千金藤亚属、粉防己亚属和山乌龟
亚属)ꎬ其中山乌龟亚属植物具有块根ꎬ生物碱含 ２.１ 总生物碱的提取
量较高ꎬ活性强(朱兆仪等ꎬ１９８３)ꎮ 山乌龟亚属植 取大花地不容块根 ３ ｋｇꎬ首先经 ６０ ℃烘干后粉
物中广西地不容、云南地不容、小叶地不容研究比 碎ꎬ过 １０ 目筛ꎬ将大花地不容块根小颗粒倒入 １００ Ｌ
较充分ꎬ尤其对广西地不容的研究显得深入和全 提取罐中ꎬ然后加入 ３.６５×１０ ｇｍＬ 的盐酸溶液
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面ꎬ涉及其生物碱成分(闵知大和钟守明ꎬ１９８０ꎻ成 ３０ Ｌꎬ搅拌 ６ ｈꎬ转速 ２０ ｒｍｉｎ ꎬ放出提取液ꎬ最后
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桂仁等ꎬ１９８１ꎻ黄秋洁等ꎬ２０１８)ꎬ内生真菌( 卿朕 再向提取罐中加入 ３.６５×１０ ｇｍＬ 的盐酸溶液 ２０
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等ꎬ２０１６ꎻ周秋艳等ꎬ２０１６ꎻ刘晓莹等ꎬ２０１７ꎻ汤夏安 Ｌꎬ搅拌 ３ ｈꎬ转速 ２０ ｒｍｉｎ ꎬ放出提取液ꎮ 合并 ２
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等ꎬ２０１９)和种子资源( 覃艳ꎬ２００６) 等ꎮ 大花地不 次提取液ꎬ首先用氢氧化钠水溶液调节提取液的 ｐＨ
容的基础研究非常薄弱ꎬ仅 ２０ 世纪 ９０ 年代有一篇 至 ９ 左右ꎬ然后用 ３０ Ｌ 二氯甲烷萃取碱性提取液 ２
关于生物碱成分的研究报道( 陈嬿等ꎬ１９９４)ꎮ 为 次ꎬ合并 ２ 次二氯甲烷萃取液ꎬ接着用 ２０ Ｌ 蒸馏水
了进一步详细研究该植物块根的化学成分及活 洗涤二氯甲烷萃取液ꎬ最后 ５０ ℃减压浓缩二氯甲烷
性ꎬ我们对大花地不容块根的生物碱成分及主要 后得到大花地不容块根的总生物碱 ９５ ｇꎮ
成分的生物活性进行了研究ꎬ共得到了 １１ 个化合 ２.２ 总生物碱的分离纯化
物ꎬ分别为青藤碱(１)、青风藤碱(２)、斯帝酚灵碱 ２.２.１ 总生物碱的硅胶柱层析分离 称取 ２００ 目

(３)、瑞枯灵(４)、异紫堇定(５)、紫堇单酚碱(６)、 层析硅胶 ８００ ｇꎬ以二氯甲烷湿法装柱ꎮ 称取总生物
巴婆碱(７)、ｓｕｋｈｏｄｉａｎｉｎｅ(８)、荷包牡丹碱(９)、７￣ 碱 ８０ ｇꎬ拌样上样ꎮ 以不同比例的二氯甲烷 ∶ 甲醇
氧代克班宁(１０) 和巴马汀(１１)ꎬ化合物 １ － １１ 的 (５０ ∶ １→５ ∶ １)为洗脱液ꎬ收集洗脱液ꎬ经薄层层析
结构见图 １ꎮ 其中ꎬ化合物 ２、３、４、７、８、９、１０ 系首 点板检测后ꎬ分成了 ８ 个部分ꎮ

次从大花地不容中分离得到ꎮ ２.２.２ 生物碱的制备液相分离纯化 将上述经过
硅胶柱层析分段得到的 ８ 个部分的生物碱ꎬ通过
１ 仪器与材料 制备液相色谱分离纯化ꎮ 制备方法:将样品用酸
水溶 解 后 吸 入 制 备 柱ꎬ 然 后 以 乙 腈 ( ２０％) － 水
旋转蒸发仪 ＲＥ２１２ＢＷ￣Ｂ(日本雅玛拓)ꎻ冷却 (８０％)梯度洗脱ꎬ逐渐增加乙腈的比例ꎬ直至乙腈
水循环装置 ＣＦ８１０Ｃ( 日本雅玛拓)ꎻ隔膜真空泵 比例为 ８０％ꎮ 检测波长:２５４ ｎｍꎮ 制备柱:Ｃ ꎬ５０
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ＬＶＳ３０２Ｚ(美国威尔奇)ꎻ制备液相色谱 ＳＡＣＩＤ １００ ｍｍ × ４５０ ｍｍꎬ５ μｍꎮ
ｍｍ (成都格莱精密仪器有限公司)ꎻＶａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ 按照峰收集洗脱液ꎬ 各洗脱液首先用氨水调