Page 7 - 《广西植物》2023年第12期
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１２ 期                    张艳成等: 广西姑婆山及邻近地区大型真菌物种多样性                                         ２ １ ７ ３

            分析该区域大型真菌区系的组成和区系成分ꎬ并综                             法:采 用 试 剂 盒 法 ( 康 维 试 剂 盒ꎬ ＣＷ０５３１Ｍ￣２００
            合文献资料对食用菌、药用菌以及毒菌类群进行归                             ｐｅｒｐｓꎬ江苏)ꎬ选择 ＩＴＳ￣４ / ＩＴＳ￣５ 引物进行扩增ꎻ反
            类ꎬ以期为姑婆山及邻近地区大型真菌多样性评估                             应程序为 ９４ ℃ 预变性 ３ ~ ４ ｍｉｎꎬ９４ ℃ 变性 １ ｍｉｎ、

            和保护以及资源合理开发利用提供依据ꎮ                                 ５３ ℃ 退火 ４０ ｓ、７２ ℃ 延伸 １ ｍｉｎꎬ进行 ３５ 个循环ꎬ
                                                               ７２ ℃ 最终延伸 １０ ｍｉｎꎬ于 ４ ℃ 下保存ꎮ 将 ＰＣＲ 产
            １  材料与方法                                           物委托生工生物工程股份有限公司(上海) 进行测
                                                               序ꎬ在 ＧｅｎＢａｎｋ 数据库中进行 ＢＬＡＳＴ 比对ꎬ并结合
            １.１ 材料                                             比对结果及形态特征进行种类鉴定ꎮ 物种的学名
                 研究所用材料为在姑婆山及邻近地区( 玉石                          采 用 真 菌 物 种 数 据 库 Ｉｎｄｅｘ ｆｕｎｇｏｒｕｍ ( ｈｔｔｐ: / /
            林、隔江山) 采集的标本ꎬ标本保存于广西壮族自                            ｗｗｗ.ｉｎｄｅｘｆｕｎｇｏｒｕｍ.ｏｒｇ / )收录的最新名称ꎮ
            治区 中 国 科 学 院 广 西 植 物 研 究 所 植 物 标 本 馆               １.２.３ 区系成分与优势科、优势属的确定  参考真

            (ＩＢＫ)中ꎮ                                            菌区系划分的有关文献以及第 １０ 版 Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ
            １.２ 方法                                             ｔｈｅ Ｆｕｎｇｉ 提供的分布信息ꎬ确定相关分类单元的
            １.２.１ 野外调查和标本采集  采用随机踏查法( 饶                        区系地理成分(Ｋｉｒｋ ｅｔ ａｌ.ꎬ２００８ꎻ周丽伟和戴玉成ꎬ
            俊 和 李 玉ꎬ ２０１２ꎻ Ｌｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８ꎻ Ｐｒａｙｕｄｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ    ２０１３ꎻ张明旭等ꎬ２０１９ꎻ杨滢等ꎬ２０２２)ꎮ 将科内含
            ２０１９)ꎬ于 ２０１９—２０２１ 年的 ７、８、９ 三个月份在姑                  １０ 种及以上的科定为优势科ꎬ将属内含 ５ 种及以
            婆山及邻近地区的玉石林、隔江山集中采集标本ꎬ                             上的属定为优势属(图力古尔和李玉ꎬ２０００)ꎬ并根
            于子实体生长较少的其他月份进行补充采集ꎬ以                              据文献资料对食用菌、药用菌和毒菌进行划分( 戴
            达到调查的全面性ꎮ                                          玉成和杨祝良ꎬ２００８ꎻ戴 玉 成 等ꎬ２０１０ꎻ图 力 古 尔
                 在大型真菌采集过程中ꎬ记录子实体的形态、                          等ꎬ２０１４ꎻ李玉和包海鹰ꎬ２０１９)ꎮ
            附属结构及其特点、颜色、质地、气味、大小等ꎬ以                            １.２.４ 区系相似性系数与 Ｒ / Ｔ 值的计算  利用相
            及生长环境、生长基物、生长季节等ꎬ并使用数码                             似性计 算 公 式 ( 王 荷 生ꎬ １９９２): Ｓ ＝ ２ａ / ( ｂ ＋ ｃ) ×
            相机从多角度对子实体进行拍摄ꎮ 在采集腐生大                             １００％ꎬ对姑婆山与其他相近地区进行属的相似性
            型真菌时ꎬ用枝剪将子实体连同少部分生长基物                              比较ꎮ 式中:Ｓ 代表相似性系数ꎻａ 为对比两地的
            取下ꎻ在采集生长于地上的大型真菌时ꎬ直接从子                             共有属数ꎻｂ、ｃ 为对比两地各有属数ꎻ均不包括世
            实体基部挖取完整子实体ꎬ并用锡纸进行塑形、包                             界广布属ꎬ两地共有属数越多ꎬ其相似性越大ꎬ关
            裹ꎬ避免标本被压坏ꎻ回到室内后ꎬ将采集的子实                             系越亲近ꎬ否则反之ꎮ
            体连同相应的采集标签用报纸包裹ꎬ放入 ４５ ~ ５０                             采用热带性属( Ｒ) 与温带性属( Ｔ) 的比值即
            ℃ 的烘箱内烘干ꎬ制成干标本ꎬ用于后期的显微观                            Ｒ / Ｔ 的值来反映姑婆山及其他相近地区的区系性
            察及 ＤＮＡ 提取ꎮ                                         质ꎮ 其中ꎬＲ / Ｔ 值大于 １.３ 时ꎬ区系组成表现为明
            １.２.２ 大型真菌标本鉴定  采用形态学与分子生                          显的热带性ꎻＲ / Ｔ 值小于 ０.８ 时ꎬ区系组成表现为
            物学相结合的方法对大型真菌标本进行鉴定ꎮ 形                             较强的温带性ꎻＲ / Ｔ 值介于 ０.８ 与 １.３ 之间时ꎬ区
            态学方法包括宏观形态特征和显微结构特征的观                              系组成表现为热带成分与温带成分相交汇( 赵万
            察ꎮ 其中ꎬ宏观形态特征观察包括子实体大小、颜                            义ꎬ２０１７)ꎮ
            色、菌盖及菌柄表面特征、菌肉颜色变化ꎬ菌褶着
            生方式及颜色、菌环位置及形态等ꎻ显微结构特征                             ２  结果与分析
            观察包括孢子大小、形状、颜色、纹饰、显色反应
            (如用 Ｍｅｌｚｅｒ 试剂测试拟糊精质反应或淀粉质反                         ２.１ 大型真菌的种类组成

            应、棉蓝试剂测试嗜蓝反应)、囊状体有无及形状、                                经对所采集的标本进行鉴定和统计ꎬ姑婆山
            菌髓 类 型 等 ( 袁 明 生 和 孙 佩 琼ꎬ ２０１３ꎻ 李 玉 等ꎬ             及邻近地区共计 ３４８ 种大型真菌( 姑婆山 ３０９ 种、
            ２０１５ꎻ郭林等ꎬ２０１９ꎻ庄文颖等ꎬ２０２０)ꎮ                          玉石林 ２１ 种、隔江山 １８ 种)ꎬ隶属于 ２ 门 ６ 纲 １７
                 部分疑难类群需结合分子生物学方法进行辅                           目 ６９ 科 １７５ 属ꎮ 其中ꎬ子囊菌门 ２９ 种( 隶属于 ３
            助鉴定( Ｓｃｈｏｃｈ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１２)ꎮ 总 ＤＮＡ 的提取方               纲 ５ 目 １２ 科 １７ 属)ꎬ担子菌门 ３１９ 种( 隶属于 ３
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