Page 39 - 《广西植物》2024年第10期

１０ 期 张泽宇等: 李氏禾内生细菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 吸附 Ｃｒ 的研究 １ ８ ４ １
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１９９５)ꎮ 植物内生菌在与宿主植物长期共存或互存 乙醇(天津市富宇精细化工有限公司)ꎻ二苯碳酰二
过程中逐渐形成了自身的独特之处ꎬ在宿主植物的 肼[百赛勤化学技术(上海)有限公司]ꎮ
生长和抵抗环境胁迫中起着重要作用(Ｒｈｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ １.１.２ 菌株 蜡样芽孢杆菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１:分
２０１８)ꎮ 从超富集植物中分离获得可吸附相应重金 离自铬超富集植物李氏禾茎部的内生细菌菌株ꎬ
属的内生菌已有报道ꎬ如 Ａｓ 超富集植物蜈蚣草(董 现保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微

睿智ꎬ２０１２)、Ｚｎ 超富集植物东南景天( 龙新宪等ꎬ 生物中心ꎬ编号为 ＣＧＭＣＣ １４２６７ꎮ
２０１３)、Ｃｄ 超积累植物龙葵( 曹喆等ꎬ２００９)、Ｍｎ 超 １.１.３ 培养基 ＬＢ 固体培养基:胰蛋白胨 １０.０ ｇ
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积累植物商陆( 卢文显ꎬ２０１５) 等ꎮ 李氏禾( Ｌｅｅｒｓｉａ Ｌ ꎬ氯化钠 １０.０ ｇＬ ꎬ酵母浸粉 ５.０ ｇＬ ꎬ琼脂
ｈｅｘａｎｄｒａ)是张学洪等(２００６) 在中国桂林境内首次 １５.０ ｇＬ ꎬ蒸馏水 １ ０００ ｍＬꎮ ｐＨ 调整至 ７ꎬ１２１
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发现的铬超积累植物ꎬ在铬污染的环境中生长非常 ℃ 下灭菌 ２０ ｍｉｎꎮ
迅速且繁殖能力强(张学洪等ꎬ２００８)ꎬ其对 Ｃｒ 和 ＬＢ 液体培养基:胰蛋白胨 １０.０ ｇＬ ꎬ氯化钠
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Ｃｒ(Ⅵ)都有较强的富集能力(陈俊等ꎬ２００８ꎻ 卢媛媛 １０.０ ｇＬ ꎬ酵母 浸 粉 ５. ０ ｇ Ｌ ꎬ蒸 馏 水 １ ０００
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等ꎬ２０１３)ꎮ 本课题组前期从李氏禾叶和根中分别 ｍＬꎮ ｐＨ 调整至 ７ꎬ１２１ ℃ 下灭菌 ２０ ｍｉｎꎮ
分离筛选出内生芽孢杆菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ. Ｙ０４ 和阴沟肠 １.１.４ 主要仪器设备 ＺＸＲＤ￣Ｂ５１１０ 型鼓风干燥箱
杆菌 Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ Ｇ０４ꎬ并将其应用于 Ｃｒ(Ⅵ) (上海智城分析仪器制造有限公司)ꎻ冰箱( 博西华
的还原(袁治豪ꎬ２０１８ꎻ韩文等ꎬ２０１９)ꎮ 家用电器有限公司)ꎻＳＷ￣ＣＪ￣ＩＦ 型超净工作台( 苏
蜡样芽孢杆菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 是本课题组 州安泰空气技术有限公司)ꎻＰＢ￣１０ 型 ｐＨ 计、ＳＱＰ
首次从李氏禾茎部组织中分离获得的 １ 株内生细 型电子天平( 北京赛多利斯科学仪器有限公司)ꎻ
菌ꎬ前期对该菌株去除 Ｃｒ( Ⅵ) 的性能进行了研究 立式压力蒸汽灭菌器( 上海博迅实业有限公司医
(李海云等ꎬ２０２２)ꎬ研究过程中发现其对 Ｃｒ( Ⅵ) 疗设备厂)ꎻＬＲＨ￣２５０￣Ｚ 型振荡培养箱( 韶关市泰
的去除机理可能与三价铬的吸附有关ꎮ 针对现有 宏医疗器械有限公司)ꎻＢＸＨＷ 型电热套( 巩义市
的 Ｃｒ 微生物吸附剂种类偏少、吸附效率不高等问 英峪予华仪器厂)ꎻＵＶ７６０ＣＲＴ 型紫外分光光度计
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题ꎬ本研 究 以 李 氏 禾 内 生 蜡 样 芽 孢 杆 菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ (上海傲谱分析仪器有限公司)ꎻＫＱ￣４００ＫＤＥ 型高
ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 失活菌体为吸附材料ꎬ考察其对 Ｃｒ 的 功率数控超声波清洗器( 昆山市超声仪器有限公
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吸附性能ꎮ 采用单因素实验方法考察温度、ｐＨ、 司)ꎻＤＬ￣５￣Ｂ 型离心机(上海安亭科学仪器厂)ꎮ
Ｃｒ 初始 浓 度、 吸 附 剂 用 量、 吸 附 时 间 等 因 素 对 １.２ 实验方法
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Ｃｒ 平衡吸附量和吸附率的影响ꎬ建立较优的吸附 １.２.１ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 菌体吸附剂的制备 斜面
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工艺条件ꎬ并探讨其等温吸附过程、动力学过程、 保存的 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 接种至 ＬＢ 固体培养基平
热力学过程及吸附机理ꎬ以期为该菌株在生物除 板活化ꎬ于 ３７ ℃ 恒温培养箱中培养 ２４ ｈ 后ꎬ挑取
铬领域的应用奠定基础ꎬ也为 Ｃｒ 的微生物吸附提 ２ 环菌体接种在含 １００ ｍＬ 液体培养基的 ２５０ ｍＬ
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供一种新的途径ꎬ同时为李氏禾铬积累机制中微 三角瓶内ꎬ在 ３７ ℃ 恒温水平摇床中以 １２０ ｒｍｉｎ ￣１
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生物作用研究提供参考ꎮ 的转速振荡培养 ２４ ｈ( 为 １０ ~ １０ ＣＦＵｍＬ )ꎮ
共培养 ２０ 批次ꎬ每批次 １０ 瓶ꎮ 培养完毕后ꎬ１２１
１ 材料与方法 ℃ 高温下灭菌 ２０ ｍｉｎꎬ１０ ０００ ｒｍｉｎ 下离心 １０
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ｍｉｎ 去除上清液ꎬ收集且合并菌体ꎬ冷冻干燥后即
１.１ 材料 得蜡样芽孢杆菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 失活菌体吸附
１.１.１ 主要试剂 盐酸、硫酸(衡阳市凯信化工试剂 剂ꎬ密封贮存于 ４ ℃ 冰箱中备用ꎮ
有限公司)ꎻ氯化铬、尿素、氨水、丙酮、氢氧化钠、氯 １.２.２ 吸附实验 在 １００ ｍＬ 具塞锥形瓶中加入一
化钠(西陇化工股份有限公司)ꎻ高锰酸钾(汕头市 定浓度 Ｃｒ 溶液 ５０ ｍＬꎬ加入一定量的蜡样芽孢杆
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光华化学厂)ꎻ亚硝酸钠、琼脂粉(成都市新都区木 菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ Ｊ０１ 失活菌体ꎬ用 ０.１ ｍｏｌＬ 盐
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兰镇工业开发区)ꎻ氯化铬(天津市光复精细化工研 酸或氢氧化钠调节至所需 ｐＨ 值ꎬ控制一定温度ꎬ
究所)ꎻ磷酸(长沙市分路口塑料化工厂)ꎻ胰蛋白 以 １２０ ｒｍｉｎ 振荡吸附一定时间后ꎬ取适量反应
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胨、酵母浸粉(北京陆桥技术有限责任公司)ꎻ 无水 液于１０ ０００ ｒｍｉｎ 下离心 １０ ｍｉｎꎬ收集上清液ꎬ
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