Page 58 - 《广西植物》2024年第12期

２ ２ １ ６ 广 西 植 物 ４４ 卷

Ａ. 核苷酸序列和推导的氨基酸序列(∗表示终止密码子ꎬ下划线表示保守结构域 ＰＱ￣ｌｏｏｐ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ)ꎻ Ｂ. 跨膜结构域预测ꎻ
Ｃ. 蛋白亲水性 / 疏水性预测ꎮ
Ａ. Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｎｄ ｄｅｒｉｖｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ (∗ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｓｔｏｐ ｃｏｄｏｎꎬ ｕｎｄｅｒｌｉｎｅ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｄｏｍａｉｎｓ ＰＱ￣ｌｏｏｐ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ)ꎻ
Ｂ. Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｄｏｍａｉｎｓꎻ Ｃ. Ｐｒｏｔｅｉｎ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ/ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ.
图 １ ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 的核苷酸序列和蛋白质结构特性
Ｆｉｇ. １ Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｏｆ ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ

组质粒转化农杆菌感受态细胞 ＧＶ３１０１ꎬ并侵染烟 源的选择培养基 ＳＤ￣ｕｒａ 平板上ꎬ３０ ℃ ꎬ倒置培养
草叶片ꎬ在荧光共聚焦显微镜下观察其在烟草中 ３ ~ ５ ｄꎬ观察生长情况ꎮ 由图 ４ 可知ꎬ ｐＤＲ１９６ 和
的表达情况ꎬ结果显示 ３５Ｓ∷ＧＦＰ 在细胞膜和细胞 ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ￣ｐＤＲ１９６ 均能在 ２％麦芽糖为唯一碳

核 中 均 能 观 察 到 荧 光 信 号ꎬ 而 ３５Ｓ ∷ 源 的 ＳＤ￣ｕｒａ 平 板 上 生 长ꎻ 同 时ꎬ ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ￣
ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ￣ＧＦＰ 只在细胞膜上存在荧光信号ꎬ ｐＤＲ１９６ 也能在 ２％果糖为唯一碳源的 ＳＤ￣ｕｒａ 平板
推测 ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 定位于细胞膜(图 ３)ꎮ 上生长ꎬ推测 ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 主要转运果糖ꎮ
２.４ ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 的糖转运特性 ２.５ ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 在木薯不同器官不同发育时期
为 验 证 ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 的 糖 转 运 特 性ꎬ 将 的表达
ｐＤＲ１９６ 和 重 组 后 的 ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ￣ｐＤＲ１９６ 质 粒 分别取 ‘ ＫＵ５０’ 形 成 期、 膨 大 期 及 成 熟 期 叶
转化至以麦芽糖作为唯一碳源的己糖转运缺陷型 片、叶柄、茎杆和块根材料ꎬ提取总 ＲＮＡ 后ꎬ进行
酵 母 ＥＢＹ. ＶＷ４０００ 中ꎮ 将 含 有 ｐＤＲ１９６ 和 ＲＴ￣ｑＰＣＲ 分 析ꎮ 由 图 ５ 可 知:ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ 在 木
￣１ 薯叶片中的相对表达量较低ꎬ在成熟期时降到最
ＭｅＳＷＥＥＴ１７ｂ￣ｐＤＲ１９６ 的 转 化 酵 母 按 照 １、 １０ 、
１０ 、１０ 、１０ 稀 释ꎬ 分 别 点 涂 于 含 有 ２％ 麦 芽 糖 低ꎻ在叶柄中的相对表达量随着木薯的生长持续
￣２
￣３
￣４
(对照)、２％葡萄糖、２％果糖及 ２％蔗糖等不同碳 上升ꎬ在成熟期时达到最大ꎻ在膨大期和形成期时