Page 84 - 《广西植物》2024年第12期

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Ｇｕｉｈａｉａ Ｄｅｃ. ２０２４ꎬ ４４(１２): ２２４２－２２５４

ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２３０９００４
赵娜红ꎬ 曹瑞兰ꎬ 苏文娟ꎬ 等ꎬ ２０２４. 油茶两个响应干旱 ＮＡＣ 转录因子的克隆、亚细胞定位及自激活检测 [Ｊ]. 广西植
物ꎬ ４４(１２): ２２４２－２２５４.
ＺＨＡＯ ＮＨꎬ ＣＡＯ ＲＬꎬ ＳＵ ＷＪꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４. Ｃｌｏｎｉｎｇꎬ ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎꎬ ａｎｄ ｓｅｌｆ￣ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ＮＡＣ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｒｏｕｇｈｔ ｆｏｒ Ｃａｍｅｌｌｉａ ｏｌｅｉｆｅｒａ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ４４(１２): ２２４２－２２５４.

油茶两个响应干旱 ＮＡＣ 转录因子的克隆、

亚细胞定位及自激活检测

赵娜红 ꎬ 曹瑞兰 ꎬ 苏文娟 ꎬ 谢荟清 ꎬ 曾进 ꎬ 刘 娟 １∗
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( １. 江西农业大学 林学院ꎬ 南昌 ３３００４５ꎻ ２. 湖北科技学院 核技术与化学生物学院ꎬ 湖北 咸宁 ４３７１００ )
摘 要: 干旱胁迫是影响油茶生长发育、产量和品质的一类主要的非生物胁迫ꎮ ＮＡＣ 转录因子在植物响应干
旱、盐碱等非生物胁迫反应中具有重要的调控作用ꎮ 为探究 ＮＡＣ 转录因子在油茶响应干旱胁迫中的调控机
制ꎬ该文以两年生油茶苗为材料ꎬ通过 ＴＡ 克隆得到 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 的 ＣＤＳ 序列ꎬ对其进行生物信息学分
析、亚细胞定位及自激活分析ꎬ并采用 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 检测 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 基因表达的组织特异性及 ＰＥＧ 模拟
干旱和 ＡＢＡ 处理下的表达模式ꎮ 结果表明:(１) 基因结构分析显示ꎬＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 的 ＣＤＳ 长分别为
１ ０４４ ｂｐ 和 ９９０ ｂｐꎬ分别编码 ３４８ 个和 ３３０ 个氨基酸ꎬ理论等电点分别为 ８.８６ 和 ８.５７ꎬ蛋白的不稳定系数分别
为 ４１.３５ 和 ３７.４７ꎬ均无跨膜结构域ꎬ分别与柿子和荔枝的同源性最高ꎮ 亚细胞定位显示 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９
的均定位在细胞核上ꎮ (２)酵母自激活检测显示ꎬＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 的全长蛋白和 Ｎ 端结构域无自激活活
性ꎬ但 Ｃ 端结构域均具有自激活活性ꎮ (３)ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 表达具有明显的组织特异性ꎬ主要在根和种仁
中高表达ꎻＰＥＧ 模拟干旱和外源施加 ＡＢＡ 处理油茶苗发现ꎬＣｏＮＡＣ５ 和 ＣｏＮＡＣ７９ 表达量均显著高于对照ꎻ
ＣｏＮＡＣ７９ 的表达量在 ＡＢＡ 处理 ４８ ｈ 后下降ꎬ在 ＰＥＧ 处理下显著高于对照ꎮ 综上认为ꎬＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９
其 Ｎ 端可能存在抑制区域ꎬ从而阻碍了全长序列的转录ꎻ油茶两个 ＮＡＣ 基因可能通过 ＡＢＡ 合成途径间接参
与干旱胁迫响应过程ꎻ在胁迫持续发生时ꎬＣｏＮＡＣ７９ 还可能通过其他途径直接参与干旱胁迫响应过程ꎮ 该研

究结果为进一步探究 ＮＡＣ 转录因子在油茶响应干旱胁迫过程中的作用提供了科学依据ꎮ
关键词: 克隆ꎬ干旱胁迫ꎬ亚细胞定位ꎬ酵母自激活ꎬＡＢＡ 途径
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２４)１２￣２２４２￣１３

Ｃｌｏｎｉｎｇꎬ ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎꎬ ａｎｄ ｓｅｌｆ￣ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ

ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ＮＡＣ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ

ｔｏ ｄｒｏｕｇｈｔ ｆｏｒ Ｃａｍｅｌｌｉａ ｏｌｅｉｆｅｒａ

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ＺＨＡＯ Ｎａｈｏｎｇ ꎬ ＣＡＯ Ｒｕｉｌａｎ ꎬ ＳＵ Ｗｅｎｊｕａｎ ꎬ ＸＩＥ Ｈｕｉｑｉｎｇ ꎬ ＺＥＮＧ Ｊｉｎ ꎬ ＬＩＵ Ｊｕａｎ

收稿日期: ２０２３－１２－２２ 接受日期: ２０２４－０１－３１
基金项目: 江西省自然科学基金(２０２３２ＢＡＢ２０５０５４)ꎻ 江西省林业局油茶研究专项(ＹＣＹＪＺＸ [２０２３]１１４ 号)ꎻ 湖北科技学院科研
启动金(ＢＫ２０２３２８)ꎮ
第一作者: 赵娜红(１９９７—)ꎬ硕士ꎬ研究方向为油茶抗旱分子机制ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｚｈａｏｎａｈｏｎｇ２０２１＠ １６３.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 刘娟ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向为林木遗传改良、林木抗逆分子机制ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ) ｌｉｕ＿ｊｕａｎ１１２２＠ １６３.ｃｏｍꎮ