Page 182 - 《广西植物》2025年第12期
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２ ３ ２ ４ 广 西 植 物 ４５ 卷
１.２.３ 繁育系统
１ 材料与方法 １.２.３.１ 花粉胚珠比( Ｐ / Ｏ) 的估算 参照 Ｃｒｕｄｅｎ
(１９７７)的方法测定花粉胚珠比(Ｐ / Ｏ)ꎮ 选取即将
１.１ 试验地概况和试验材料 开放但花药尚未开裂的 １０ 朵花ꎬ放入 ＦＡＡ 溶液中
湖北黄精开花生物学特征的观察记录及繁育 保存ꎮ 用 １ ｍｏＬＬ ＨＣｌ 在 ６０ ℃ 条件下水解摘取
￣１
系统的检测试验ꎬ于湖北省五峰土家族自治县白 的所有花药 ２０ ｍｉｎꎬ振荡 ２ ｍｉｎꎬ去除解离的花药
鹿庄村(１１０°４３′ Ｅ、３０°１９′ Ｎ) 开展ꎬ样地 １０ ｍ × 壁ꎬ制成 ３ ｍＬ 花粉粒悬浮液ꎬ吸取 ３ μＬ 置于载玻
１５ ｍꎬ行距 ２０ ~ ３０ ｃｍꎬ株距 １５ ~ ２０ ｃｍꎬ试验材料 片上ꎬ在显微镜下统计花粉量ꎬ重复 ５ 次ꎮ
为种植了 ５ 至 ６ 年且生长状况良好的湖北黄精ꎮ 花粉量 ＝ (单次镜检花粉量÷３×３ ０００) ÷１０
该地属于中亚热带湿润季风气候ꎬ四季分明ꎬ冬冷 (２)
夏热ꎬ雨量充沛ꎬ暴雨甚多ꎮ 年平均气温 ２２ ℃ ꎬ极 以被摘除花药的 １０ 朵花为材料ꎬ在体式显微
端最 高 温 ３８ ℃ ꎬ 极 端 最 低 温 － ９ ℃ ꎬ 年 降 水 量 镜下解剖子房并统计胚珠数量ꎬ取其平均值作为
１ ０５９.８ ｍｍꎮ 单花胚珠数ꎮ
１.２ 试验方法 花粉胚珠比(Ｐ / Ｏ)＝ 平均每朵花的花粉数÷平
１.２.１ 花形态特征及开花动态观察 选择 ９ 株生长 均每朵花的胚珠数 (３)
状态良好的单株进行花器官特性的测定ꎮ 每个单 Ｐ / Ｏ 值可以指示植物的繁育系统(表 １)ꎬＰ / Ｏ
株摘取盛花期的花 ３ 朵ꎬ用游标卡尺测量花梗长、 值越低ꎬ花粉传递越有效ꎬ植物越倾向于自交ꎮ
花冠直径、花高、花冠筒、裂片、雄蕊及雌蕊等花部
表型性状ꎮ 标记即将开放期的单花 ６０ 朵ꎬ每隔 ２ 表 １ 花粉胚珠比(Ｐ / Ｏ)评判繁育系统类型对照表
ｈ 观察单花状态ꎬ记录单朵花的开放和闭合时间ꎬ Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ
裂片开始绽放的时间为单花开放时间ꎬ所有裂片 ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｔｙｐｅｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ
ｐｏｌｌｅｎ￣ｏｖｕｌｅ ｒａｔｉｏ (Ｐ / Ｏ)
收拢的时间为单花闭合时间ꎮ
１.２.２ 花粉活力及柱头可授性测定 选取 ５ 株生长 花粉胚珠比 繁育系统类型
Ｐ / Ｏ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｔｙｐｅ
状态良好的植株ꎬ每个植株摘取即将开放期和盛
开期的花各 ６ 朵进行花粉活力测定及相应雌蕊柱 ２.７ ~ ５.４ 闭花受精 Ｃｌｅｉｓｔｏｇａｍｙ
头可授性试验ꎮ １８.１ ~ ３９.０ 专性自交 Ｏｂｌｉｇａｔｅ ａｕｔｏｇａｍｙ
利用醋酸洋红法测定湖 北 黄 精 的 花 粉 活 力 ３１.９ ~ ３９６.０ 兼性自交 Ｆａｃｕｌｔａｔｉｖｅ ａｕｔｏｇａｍｙ
(刘成琴等ꎬ２０２１)ꎮ 用镊子摘取成熟开放花的花
２４４.７ ~ ２ ５８８.０ 兼性异交 Ｆａｃｕｌｔａｔｉｖｅ ｘｅｎｏｇａｍｙ
药于 ２００ μＬ 离心管中ꎬ加入 ２００ μＬ 染色液ꎬ涡旋
２ １０８.０~ １９５ ５２５.０ 专性异交 Ｏｂｌｉｇａｔｅ ｘｅｎｏｇａｍｙ
振荡 １ ｈꎬ释放出花粉粒ꎬ２８ ℃ 恒温箱暗培养 １ ｈ
后ꎬ在显微镜( Ｌｅｉｃａ ＤＭｉ８) 下随机选择 １０ 个视野
进行镜检ꎮ 根据花粉染色情况判定花粉活力ꎬ有 １.２.３.２ 杂交指数( ｏｕｔｃｒｏｓｓｉｎｇ ｉｎｄｅｘꎬ ＯＣＩ) 的估算
活力的花粉呈深色ꎬ无活力的花粉颜色浅或无色ꎬ 按照 Ｄａｆｎｉ(１９９２) 的标准ꎬ以单花直径、雌雄蕊
计算花粉活力ꎮ (即柱头和花药)成熟时间及其相对空间距离 ３ 个
花粉活力(％) ＝ 深色花粉粒数量 ÷视野总花 指标进行判断ꎬ３ 个参数之和即为 ＯＣＩ 值ꎬ由 ＯＣＩ
粉粒数量×１００ (１) 值评判繁育系统类型(表 ２)ꎮ
利用联苯胺－过氧化氢法测定湖北黄精的柱 (１)单花直径:(０ꎬ１) ｍｍ 记为 ０ꎻ[１ꎬ２) ｍｍ
头可授性(Ｍａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２)ꎮ 取开放花的雌蕊ꎬ将 记为 １ꎻ[２ꎬ６) ｍｍ 记为 ２ꎻ[６ꎬ＋∞ ) ｍｍ 记为 ３ꎮ
其柱头置于凹面载玻片上ꎬ滴加联苯胺－过氧化氢 (２)花药开裂散出花粉与柱头成熟进入可授
反应液淹没柱头ꎬ１５ ｍｉｎ 后在显微镜下观察ꎬ若柱 期之间的时间间隔:雌雄蕊同时成熟或雌蕊先熟
头周围呈现蓝色且产生气泡ꎬ说明其具有可授性ꎬ 记为 ０ꎻ雄蕊先熟记为 １ꎮ
产生气泡的速度越快、数量越多说明柱头可授性 (３)柱头与花药的空间位置:同一高度记为 ０ꎻ
越强ꎮ 空间分离记为 １ꎮ
