Page 7 - 《广西植物》2025年第7期

７ 期 王东霞等: 豌豆 ＥＭＳ 突变体库构建及优异突变体筛选 １ １ ９ ９

成分分析、相关性分析和隶属函数分析ꎬ筛选出优
异突变体ꎮ 本研究不仅可以创制更丰富的豌豆变 ２ 结果与分析
异材料ꎬ而且还可以获取优异变异豌豆种质ꎬ研究
结果可为豌豆相关功能基因挖掘和新品种选育奠 ２.１ 突变性状的统计及分析
定材料基础ꎮ 经 ＥＭＳ 诱变剂处理后(ＥＭＳ 浓度 １％ꎬ诱变时
间 ８ ｈ) 的豌豆种子单粒点播的方式播种于实验
１ 材料与方法 地ꎬ共有 ４ ６８２ 株成苗ꎬ成苗率 ４６.８２％ꎬ实验过程

中详细记录统计观察豌豆植株的各个时期农艺性
１.１ 材料及试剂 状ꎬ成熟期单株收获种子ꎮ
本研究所用材料‘青建 １ 号’ 豌豆由中国科学 将单株收获的豌豆种子进行单行播种ꎬ在整
院西北 高 原 生 物 研 究 所 提 供ꎮ 甲 基 磺 酸 乙 酯 个豌豆生育期ꎬ详细统计和记录各单株表型农艺

(ＥＭＳ)作为诱变剂ꎬ０.０１ ｍｏｌＬ 磷酸缓冲液作为 性状ꎬ发现豌豆突变株 ３４２ 株ꎬ以下是 Ｍ 突变豌豆
￣１
２
诱变缓冲液ꎮ 植株不同发育时期不同部位突变记录情况ꎮ
１.２ 试验方法 ２.１.１ 叶色 在 Ｍ 突变植株中ꎬ获得叶部性状突变
２
１.２.１ 豌豆突变体库的构建 本试验以 １０ ０００ 粒 植株 ７ 株ꎬ占总突变体数的 ２.０５％ꎬ主要表现为部
‘青建 １ 号’豌豆种子为材料ꎬ１％ ＥＭＳ 诱变 ８ ｈ 为 分叶色黄化突变ꎮ 通过比较野生型和突变体植株
￣１
诱变处理条件ꎬ以 ０.０１ ｍｏｌＬ 磷酸缓冲液处理 ８ 叶片表型ꎬ发现突变豌豆部分叶片呈现黄化现象ꎬ
ｈ 为对照ꎬ３ 次重复ꎮ 诱变处理后冲洗干净种子ꎬ 但叶片形态与野生型植株叶片形态差异不明显
用单粒点播的方式播种于青海省西宁市吧浪实验 (图 １)ꎮ
地(１２１°２９′２１.８０″ Ｅ、３１°２４′１８.９７″ Ｎ)ꎬ行长为 ２
ｍꎬ行距为 ０.２５ ｍꎬ株距为 ０.１ ｍꎬ并进行田间常规
管理ꎬ试验过程中详细记录和统计植株变异情况ꎮ
成熟后单株收获ꎬ次年在同一实验地进行相同模
式播种ꎬ获得 Ｍ 植株ꎮ 对 Ｍ 单株进行突变体及性
２ ２
状调查统计ꎮ
１.２.２ 农艺性状调查 参考高小丽等(２０１６) 的研
究结果ꎬ调查相关主要农艺性状ꎬ包括豌豆的 Ｍ 群
１
体和 Ｍ 群体的生育期、单荚籽粒数、单株总豆荚
２
数、单株籽粒干重等ꎬ豌豆成熟后按单株进行收
获ꎬ并记录数据ꎮ
图 １ 野生型与突变体叶色差异对比
１.３ 数据分析
Ｆｉｇ. １ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｌｅａｆ ｃｏｌｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ
用 Ｅｘｃｅｌ ２０１０ 软件、ＳＰＳＳ ２０.０ 软件及 Ｏｒｉｇｉｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｗｉｌｄ￣ｔｙｐｅ ａｎｄ ｍｕｔａｎｔ
软件分析各突变体豌豆性状指标的差异和变化ꎮ
采用隶属函数模糊评价法进行综合评价ꎮ 隶属函
２.１.２ 开花特性 在 Ｍ 突变植株中ꎬ获得开花特性
２
数分析公式如下:
突变的植株 ２１ 株ꎬ占总突变体数的 ６.１４％ꎮ 通过
隶属值 ＝ (Ｘ －Ｘ ｍｉｎ ) / (Ｘ ｍａｘ －Ｘ ｍｉｎ ) (１) 在田间对野生型和突变体植株进行开花特性观察
测
反隶属值 ＝ １－(Ｘ －Ｘ ｍｉｎ ) / (Ｘ ｍａｘ －Ｘ ｍｉｎ ) (２) 和统计ꎬ发现突变体豌豆与野生型豌豆的植株株
测
式中: Ｘ 为测定值ꎻＸ ｍｉｎ 为各处理指标最 小 型和株高基本一致ꎬ无明显差异ꎬ但突变植株开花
测
值ꎻＸ 为各处理指标最大值ꎮ
ｍａｘ 期晚于野生型植株ꎬ并且突变植株盛花期晚于野
若指标与主要性状正相关使用隶属值公式ꎬ 生型及整株开花数较少(图 ２)ꎮ
反之使用反隶属值公式ꎮ 按照突变体各指标隶属 ２.１.３ 籽粒 对野生型和能够开花结实的突变体
值平均值进行排序ꎮ 植株ꎬ 成熟后收获种子ꎬ比较野生型和突变体种子