Page 81 - 《广西植物》2026年第2期

２ 期 雍海英等: 中国奥氏衣属地衣三个新记录种 ２ ７ ５

１.３ 系统发育学研究 Ｍｏｎｉｒｉꎬ Ｇｒｏｍａｋｏｖａꎬ Ｌöｋöｓ ＆ Ｋｏｎｄｒａｔｙｕｋꎬ Ａｃｔａ
ＤＮＡ 提取及 ＰＣＲ 扩增和测序:使用 Ｅｚｕｐ 柱式 Ｂｏｔ. Ｈｕｎｇ. ５９(３ / ４): ３５８ (２０１７)
真菌基因组 ＤＮＡ 抽提试剂盒说明书进行 ＤＮＡ 的 ≡ Ａｓｐｉｃｉｌｉａ ｓｕｐｅｒｔｅｇｅｎｓ Ａｒｎｏｌｄꎬ Ｖｅｒｈ. Ｋａｉｓｅｒｌ.
提取ꎬ分子材料选取地衣共生真菌 ｒＤＮＡ ＩＴＳ 序列 ￣Ｋöｎｉｇｌ. Ｚｏｏｌ. ￣Ｂｏｔ. Ｇｅｓ. Ｗｉｅｎ ２７: ５６７ (１８７７)
(ＩＴＳ１￣５.８Ｓ￣ＩＴＳ２)ꎬ以 ＩＴＳ １Ｆ 和 ＩＴＳ ４ 为引物进行 ≡ Ｌｅｃａｎｏｒａ ｇｉｂｂｏｓａ ｖａｒ. ｓｕｐｅｒｔｅｇｅｎｓ ( Ａｒｎｏｌｄ)

ＰＣＲ 扩 增 ( Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９９０ꎻ Ｇａｒｄｅｓ ＆ Ｂｒｕｎｓꎬ Ｍｉｇ.ꎬ Ｆｌｏｒａ ｖｏｎ Ｄｅｕｔｓｃｈｌ.ꎬ Ａｂｔ. ＩＩ １２: ２６５ (１９２６)
１９９３)ꎮ ２５ μＬ ＰＣＲ 反应体系:引物各 １ μＬꎬ基因 地衣体壳状ꎬ深灰色至灰棕色略带紫色色调ꎬ

组 ２ μＬ ＤＮＡꎬ８.５ μＬ ｄｄＨ Ｏꎬ１２.５ μＬ ２×Ｔａｑ ＰＣＲ 不具粉霜或具轻微粉霜ꎻ龟裂片较为平坦且连续ꎬ
２
Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘꎮ ＰＣＲ 反应程序:９４ ℃ 预变性 ３ ｍｉｎꎻ９４ 龟裂片 之 间 深 裂ꎬ 形 状 不 规 则ꎬ 无 明 显 棱 角ꎬ 宽
℃ 变性 ３０ ｓꎬ５５ ℃ 退火 ３０ ｓꎬ７２ ℃ 延伸 １ ｍｉｎ( 共 ０.２５ ~ １.３５ ｍｍꎬ厚 ０.２０ ~ ０.７５ ｍｍꎬ前地衣体黑色ꎻ

３０ 个循环)ꎻ最后 ７２ ℃ 延伸 １０ ｍｉｎꎬ扩增产物于 ４ 上皮层厚 ２０ ~ ３０ μｍꎻ光合共生物为绿藻ꎬ藻细胞
℃ 保存ꎮ 目的产物用 １％ 琼脂糖凝胶电泳检测ꎬ 直径为 ２８ ~ ５０ μｍꎻ髓层白色ꎮ
ＰＣＲ 扩增产物测序由生工生物工程(上海) 股份有 子囊盘埋生ꎬ茶渍型ꎬ盘面黑色略凹ꎬ具轻微
限公司完成ꎬ并获得双向测序数据ꎮ 粉霜或不具粉霜ꎬ盘缘不明显或与地衣体同色ꎻ每
根据公司返回的双向测序结果ꎬ利用 ＳｅｑＭａｎ 块龟裂片常 １ ~ ２ 盘ꎬ近圆形或不规则ꎬ宽 ０.１５ ~
(ＤＮＡＳＴＡＲ)软件对符合条件的序列原始数据进 ０.４５ ｍｍꎮ 子实上层橄榄棕色至橄榄绿色ꎬＫ ＋棕
行拼接与编辑ꎬ将处理好的数据提交到 ＧｅｎＢａｎｋ 色ꎻ子实层无色透明ꎬ厚 ８９.５ ~ １３５.０ μｍꎬＩ＋蓝色ꎻ
中ꎬ进行 ＢＬＡＳＴ 操作ꎬ获得该序物种的近源物种ꎬ 侧丝顶端念珠状ꎻ子实层和囊层基无色ꎬ厚 ２０.０ ~
并初步判断它们之间的亲缘关系ꎮ 选择粉瓣茶衣 ４８.５ μｍꎬＩ ＋ 蓝色ꎬ其下有连续的藻胞层ꎻ子囊棒
[Ｌｏｂｏｔｈａｌｌｉａ ａｌｐｈｏｐｌａｃａ (Ｗａｈｌｅｎｂ.) Ｈａｆｅｌｌｎｅｒ] 为外 状ꎬ含 ８ 孢子ꎬ子囊顶器平茶渍型ꎬＩ－ꎻ子囊孢子单
类群ꎬ用 ＭＥＧＡ １１ 软件中的 ＣｌｕｓｔａｌＷ 及 Ｍｕｓｃｌｅ 进 孢无 色ꎬ 椭 圆 形ꎬ 大 小 为 ( １６. ０ ~ ２５. ５ ) μｍ ×
行序列对齐ꎬ手工修改那些显而易见的对齐错误ꎬ (１２.０ ~ １６.５) μｍꎮ 子囊顶器平茶渍型ꎬＩ－ꎮ
构建系统进化树时ꎬ设置其置信度为 １ ０００ 次重 分生孢 子 器 黑 色ꎬ埋 生ꎬ分 生 孢 子 笔 直 或 弯
复ꎬ 对 串 联 基 因 利 用 最 大 似 然 法 ( ｍａｘｉｍｕｍ 曲ꎬ长 １５.５ ~ ２５.０ μｍꎮ
ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄꎬＭＬ) 构 建 系 统 发 育 进 化 树 ( Ｔａｍｕｒａ ｅｔ 化学反应: Ｋ－、ＫＣ－、Ｃ－ꎬＩ－ꎬＰ－ꎮ 未检测到地
ａｌ.ꎬ ２００４ꎬ ２０２１)ꎬ对进化树各分支进行 Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ 衣次生代谢产物(ＴＣＬ)ꎮ
检验ꎬ最后在 ＦｉｇＴｒｅｅ 软件中对所得系统发育树进 基物: 硅质岩石ꎮ
行调整和美化ꎮ 用最大似然法 ＭＬ 构建系统发生 凭证标本: 我国新疆乌鲁木齐市ꎬ达坂城冰
树ꎬ所用序列信息见表 １ꎮ 湖ꎬ２ ９３３ ｍꎬ８８°２３′５６″Ｅ、４３°４２′２５″Ｎꎬ岩石ꎬ２０２４
年 ７ 月 ４ 日ꎬ 金 斯 古 丽、 杜 来 提 罕、 雍 海 英ꎬ
２ 结果与分析 ２０２４０７０２５(ＸＪＵ)ꎬ２０２４０７０２６(ＸＪＵ)ꎮ
讨论: 该种主要特征是地衣体深灰色至灰棕
２.１ 系统发育分析 色略 带 紫 色 色 调ꎬ 具 黑 色 的 前 地 衣 体ꎻ 该 种 与

本研究共下载 ２８ 条近缘物种的参考序列ꎬ与 ３ Ｏｘｎｅｒｉａｒｉａ ｋｏｈｉｓｔａｎｉｅｎｓｉｓ 在 外 部 形 态 上 很 相 似
条自测序列进行系统发育分析ꎮ 系统进化树结果 (Ｚｕｌｆｉｑａｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３ａ)ꎬ但两者的子囊盘形态和大
(图 １)显示ꎬ自测序列能与已报道物种序列很好地 小相异ꎬ前者子囊盘网块状ꎬ茶渍型ꎬ直径 ０.１０ ~
聚在一枝上ꎬ超隐奥氏衣支持度 ＢＰ ＝ ９５％ꎬ列奥氏 ０.４５ ｍｍꎻ后者子囊盘孔状ꎬ平茶渍型ꎬ直径 ０.３０ ~
衣支持度 ＢＰ ＝ ９８％ꎬ疣奥氏衣支持度 ＢＰ ＝ １００％ꎬ并 ０.５０ ｍｍꎻ 两 者 的 子 囊 孢 子 大 小 也 不 同ꎬ 大 小 为
结合形态特征以及各化学反应等综合分析ꎬ可以确 (１６.０ ~ ２５. ５) μｍ × ( １２. ０ ~ １６. ５) μｍ [ 后 者 为

定本研究标本与对应已报道的物种为同一物种ꎮ (１５ ~ ２０) μｍ × (９ ~ １２) μｍ]ꎮ 在系统发育树上
２.２ 分类学 该种与疣奥氏衣较为近缘ꎬ但疣奥氏衣地衣体主
２.２.１ 超 隐 奥 氏 衣 ( 新 拟 ) ( 图 ２ ) Ｏｘｎｅｒｉａｒｉａ 要颜色为灰白色或蓝灰色ꎬ地衣体 Ｋ＋黄色ꎬ所含
ｓｕｐｅｒｔｅｇｅｎｓ (Ａｒｎｏｌｄ) Ｓ. Ｙ. Ｋｏｎｄｒ. ＆ Ｌöｋöｓꎬ ｉｎ Ｈａｊｉ￣ 地衣次生代谢产物为 ｓｔｉｃｔｉｃ ａｃｉｄ(Ｈａｊｉ￣Ｍｏｎｉｒｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ