Page 106 - 《广西植物》2020年第3期
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３ ８ ６ 广 西 植 物 ４０ 卷
磨成匀浆ꎬ再加 ５ ｍＬ 乙醇过滤ꎬ滤液用 ８０％的丙
１ 材料与方法 酮定容到 ２５ ｍＬꎬ采用分光光度计( 苏正淑和张宪
政ꎬ１９８９)ꎬ分别在 ６４５ ｎｍ 和 ６６３ ｎｍ 的波长处测
１.１ 研究地概况 定吸光度ꎬ记录并计算叶片的叶绿素 ａ、叶绿素 ｂ、
本研究所在的一个研究地点位于海南省三沙 总叶绿素含量以及叶绿素 ａ / ｂ 的值ꎮ
市的一个热带珊瑚岛ꎬ海拔约 ５ ｍꎬ属于热带海洋 １.３.２.２ 丙二醛(ＭＤＡ)含量测定 称取 ０.５ ｇ 样品
季风性气候ꎬ年均气温约为 ２８ ℃ ꎬ日照强烈ꎬ年均 叶片ꎬ采用硫代巴比妥酸法( 林植芳等ꎬ１９８４) 测定
降雨量约为２ ８００ ｍｍꎬ降雨量充沛ꎬ８０％集中在雨 ＭＤＡ 的含量ꎬ加入 ５％硫代巴比妥酸 ５ ｍＬꎬ研磨后
季ꎬ雨季、旱季明显ꎬ且有季节性干旱ꎬ干旱时间为 的匀浆离心ꎬ取上清液ꎬ在分光光度计分别读取
４ ~ ５ 个月ꎮ 岛上土壤基质主要为珊瑚砂ꎬ生境条 ５３２ ｎｍ 和 ６００ ｎｍ 波长的吸光值ꎬ利用两个吸光值
件极端恶劣ꎬ植物极难存活或定居ꎮ 另一个研究 的差值计算 ＭＤＡ 的含量ꎮ
地点在海南省文昌市近郊的一个苗圃(１１０°４５′ Ｅꎬ １.３.２.３ 抗氧化酶活性测定 称取 ０.５ ｇ 样品叶片ꎬ
１９°３１′ Ｎ)ꎬ海拔约为 １０ ｍꎬ地势低平ꎬ为滨海沉积 采用氮蓝四唑法( 李合生等ꎬ２０００) 测定超氧化物
物沙壤土ꎬ属于热带海洋季风性气候ꎬ年均气温约 歧化酶(ＳＯＤ) 活性ꎬ利用黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶
为 ２４ ℃ ꎬ年均降水量为１ ８００ ｍｍ( 李婕等ꎬ２０１６ꎻ 反应系统产生超氧阴离子来还原氮蓝四唑生成蓝
林忆雪等ꎬ２０１７)ꎮ 色甲臜ꎬ读取分光光度计在 ５６０ ｎｍ 处的吸光值ꎬ
１.２ 材料 以抑 制 百 分 率 为 ５０％ 时 定 义 １ 个 酶 还 原 单
２０１６ 年 ７ 月 ６ 日ꎬ在海南省文昌市苗圃选取 位(Ｕｇ 鲜重)ꎮ
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生长发育良好的长春花植株ꎬ采集健康成熟叶片ꎬ 称取 ０.５ ｇ 样品叶片ꎬ采用紫外吸收法( 李合
放入封口袋ꎬ通过冰盒带回实验室进行形态学和 生等ꎬ２０００) 测定过氧化氢酶( ＣＡＴ) 活性ꎬＨ Ｏ 在
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生理学指标的测定ꎮ ２０１７ 年 ３ 月 １５ 日( 移植 ８ 个 ２４０ ｎｍ 下有特征吸收峰ꎬＨ Ｏ 被 ＣＡＴ 分解ꎬ使反
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月后)ꎬ在珊瑚岛上选取生长发育良好的长春花植 应溶液在 ２４０ ｎｍ 下的吸光度随反应时间而下降ꎬ
株ꎬ采集健康成熟叶片ꎬ放入封口袋ꎬ并将其放入 通过吸光度的变化率可以计算出 ＣＡＴ 活性ꎬ以每
船载冰箱中保存ꎬ上岸后通过冰盒带回实验室进 克每分钟催化 １ ｎｍｏｌ Ｈ Ｏ 降解定义为一个酶活力
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行形态学、生理学和营养元素等指标的测定ꎮ 同 单位(Ｕｇ 鲜重)ꎮ
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时ꎬ用 ５ 点取样法采集热带珊瑚岛长春花种群的 称取 ０.５ ｇ 样品叶片ꎬ采用愈创木酚显色法
根际土壤(０ ~ ２０ ｃｍ)ꎬ过 ２ ｍｍ 筛ꎬ去除细根和石 (李合生等ꎬ２０００)测定过氧化物酶(ＰＯＤ)活性ꎬ在
块ꎬ置于阴凉干燥通风处自然风干ꎬ进行土样理化 ＰＯＤ 的催化下ꎬＨ Ｏ 与愈创木酚氧化反应生成的
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性质的测定ꎮ 产物在 ４７０ ｎｍ 处有最大吸收值ꎮ 以每分钟内 Ａ
４７０
１.３ 方法 值变化 ０.５ 为一个酶活力单位(Ｕｇ 鲜重)ꎮ
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１.３.１ 形态解剖学 长春花的叶面积(ＬＡ) 采用 ＬＩ￣ １.３.２.４ 总抗氧化能力( Ｔ￣ＡＯＣ) 测定 称取 ０.５ ｇ
３０００ 叶面积仪(ＬＩ￣ＣＯＲꎬ美国) 进行测量ꎬ利用电子 样品叶片ꎬ采用 ＦＲＡＰ 法(方敏等ꎬ２００８) 测定总抗
天平称其鲜重(ＦＷ)ꎬ将其放置在 ６５ ℃ 烘箱中ꎬ烘 氧化能力( Ｔ￣ＡＯＣ)ꎬ在酸性条件下ꎬＦｅ 与三吡啶
３＋
３＋
２＋
干至恒重后称其干重(ＤＷ)ꎬ通过 ＬＡ/ ＤＷ、ＤＷ/ ＦＷ 三吖 嗪 ( Ｆｅ ￣ＴＰＴＺ) 可 以 被 还 原 成 蓝 色 的 Ｆｅ ￣
分别计算比叶面积(ＳＬＡ)、叶片干物质含量(ＬＤＭＣ)ꎮ ＴＰＴＺꎬ且在 ５９３ ｎｍ 处有最大光吸收ꎬ检测蓝色生
采用传统的徒手切片法( 董建芳等ꎬ２００９) 制 成物的量即可反映 Ｔ￣ＡＯＣ 能力ꎮ
作叶片切片ꎬ在光学显微镜下观察并记录叶片厚 １.３.３ 植物营养元素及土壤理化性质测定 将从
度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、栅栏组织宽度 热带珊瑚岛上带回来的叶片样品烘干后进行磨
和上表皮厚度ꎬ计算栅栏海绵厚度比( ＰＳＴ) ＝ 栅栏 碎、过筛ꎬ叶片的有机碳含量( ＴＯＣ) 采用重铬酸
组织厚度 / 海绵组织厚度ꎮ 钾－硫酸氧化法测定ꎬ即利用浓硫酸和重铬酸钾水
１.３.２ 生理学特征 溶液将植物的有机碳氧化成 ＣＯ ꎬ重铬酸离子被还
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１.３.２.１ 叶绿素含量测定 称取 ０.５ ｇ 新鲜长春花 原成三价铬离子ꎮ 剩余的重铬酸钾用二价铁的标
叶片ꎬ剪碎ꎬ在研钵内先加入 １０ ｍＬ ８０％的丙酮研 准液滴定ꎬ 用有机碳被氧化前后重铬酸根离子数
