Page 46 - 《广西植物》2021年第12期
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ϟ ँ ँ ԡ                                广জ 西জ 植জ 物                                         ࿗ϟ 卷
            藜属植物的研究提供分子细胞遗传学资料ᤥ                                ϓॹԣ 方法
                                                               ϟ঎԰঎ϟ 中期分裂相染色体制备জ 挑选成熟度好ܦ饱
            ϟজ 材料与方法                                           满ܦ籽粒大小一致的供试种子ᖔ用 Ꭾԡᠮ的酒精消毒
                                                               后ᖔ用蒸馏水漂洗 ሕ 次ᖔ分别放置于铺有两层滤纸
            ϓॹϓ 供试材料                                           的发芽盒ྉϟ԰ ዹቝ ġ ᤃዹቝɯ 中ᤥ 再用蒸馏水浸润后

                 供试藜麦栽培品种引自美国ᖔ编号为 ۪᧧ᤃϟ࿗ँሕ԰᥋                    放置于种子培养箱中ᤥ 种子培养箱参数条件设置
            ̀ᣮྉሕɯᖔ野生藜属植物于 ԰ԡϟᤃ 年 ϟԡ 月分别采自柴                     为 ԰ጢ ቩ ᖔ昼长 ϟᤃ ၤᖔ夜长 ऐၤᖔ湿度 ᤃጢᠮᤥ 待根尖
            达木盆地ܦ共和盆地及西宁周边荒地ᖔ每个物种分                             长至 ϟጲϟ঎ጢ ዹቝ 时ᖔ将整个发芽的种子放到 ࿗ቩ 左
            别采集 ԰ԡ 余个个体ᖔ由中国科学院西北高原生物研                          右的冰水混合物中预处理 ԰ԡ ጲ ԰࿗ ၤᤥ 取出发芽的
            究所 卢学峰 研究员鉴定ᖔ单独脱粒后种子保存在                            种子后用乙醇 ᨒ 冰醋酸ྉሕ ᨒ ϟɯ 固定至少 ሕԡ ቝᔽႿᤥ
            中国科学院高原生物适应与进化重点实验室中ᤥ                              从根尖上切取 ϟጲ԰ ቝቝ 的分生区ᖔ࿗ጢᠮ乙酸火焰干
            采集地点及种子性状详细信息见表 ϟᤥ                                 燥压片ᖔ在相差显微镜下镜检ᖔ 将一个视野下有多

                                        表 ϓই 野生藜属植物采集地点信息及种子性状
                           ఋᑕᤦ᤟ᔀ ϟজ ऊᆍ᤟᤟ᔀዹᡷᔀʛ ᔽႿ஦ᆍʢቝᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᡷᔀ༁ᡷᔀʛ ༁ᔀᔀʛ ዹၤᑕʢᑕዹᡷᔀʢ༁ ᆍ஦ ࣷ၊ᓣႥᅳᡓᅳʐᔠࣩቂ ༁ᡱᔀዹᔽᔀ༁
                                                 海拔            经纬度
               物种名称             采集地点                                       种子性状
                                                ዶ᤟ᡷᔽᡷࣼʛᔀ     ᓂᑕᡷᔽᡷࣼʛᔀ ᑕႿʛ
              ୩ᡱᔀዹᔽᔀ༁ Ⴟᑕቝᔀ    ऊᆍ᤟᤟ᔀዹᡷᔽᆍႿ ༁ᔽᡷᔀ                              ऊၤᑕʢᑕዹᡷᔀʢ ᆍ஦ ༁ᔀᔀʛ
                                                 ྉቝɯ          ᤟ᆍႿ੫ᔽᡷࣼʛᔀ
                灰绿藜           海西州都兰县            ሕ ԡ԰ᤃ঎ϟ    ँᎮ๼࿗ऐࣕ࿗ᤃ঎ ँ࿗࿗× ጶ  扁球形ᖔ种皮为暗褐色或红褐色ᖔ有光泽
               ࣷॹ ੖ᤀᐹࣩዞࣩቂ     ᧕ࣼ᤟ᑕႿ ऊᆍࣼႿᡷᢃᖔ                ሕᤃ๼԰ࣕϟँ঎ Ꭾሕ԰× શ  ᨃᤦ᤟ᑕᡷᔀᖔ ᡷᔀ༁ᡷᑕ ᔽ༁ ʛᑕʢҴ ᤦʢᆍऔႿ ᆍʢ ʢᔀʛʛᔽ༁ၤ ᤦʢᆍऔႿ
                              ̀ᑕᔽ଴ᔽ ۪ʢᔀ஦ᔀዹᡷࣼʢᔀ                             औᔽᡷၤ ੫᤟ᆍ༁༁ᢃ
                  藜           海西州都兰县            ԰ ँँԡ঎԰    ँᎮ๼࿗Ꭾࣕሕ԰঎ ԡԡँ× ጶ  环形ᖔ种皮为棕褐色或黑褐色ᖔ有光泽
                ࣷॹ ᐹᤇᤀࣩቂ      ᧕ࣼ᤟ᑕႿ ऊᆍࣼႿᡷᢃᖔ                ሕᤃ๼࿗ࣕԡϟ঎ ऐऐᤃ× શ  ኏ᔽႿ੫ᖔ ᡷᔀ༁ᡷᑕ ᔽ༁ ᡷᑕႿ ᤦʢᆍऔႿ ᆍʢ ʛᑕʢҴ ᤦʢᆍऔႿ औᔽᡷၤ ੫᤟ᆍ༁༁ᢃ
                              ̀ᑕᔽ଴ᔽ ۪ʢᔀ஦ᔀዹᡷࣼʢᔀ
               菊叶香藜           海南州共和县            ሕ ϟᤃऐ঎Ꭾ    ϟԡԡ๼࿗ࣕϟሕ঎ ࿗ँԡ× ጶ  半环形ᖔ种皮颜色为红褐色ܦ黑褐色
               ࣷॹ ஏᅳᓣᡙᔠʐࣩቂ    ᥈ᆍႿ੫ၤᔀ ऊᆍࣼႿᡷᢃᖔ               ሕᤃ๼԰࿗ࣕ԰ऐ঎ ᤃ࿗࿗× શ  ୩ᔀቝᔽዹᔽʢዹࣼ᤟ᑕʢ ʢᔽႿ੫ᖔ ᡷᔀ༁ᡷᑕ ᔽ༁ ʢᔀʛʛᔽ༁ၤ ᤦʢᆍऔႿ ᑕႿʛ
                             ̀ᑕᔽႿᑕႿ ۪ʢᔀ஦ᔀዹᡷࣼʢᔀ                             ᤦ᤟ᑕዹҴ ᤦʢᆍऔႿ
                杂配藜           西宁市城西区            ԰ ԰Ꭾऐ঎Ꭾ    ϟԡϟ๼Ꭾࣕጢϟ঎ ԡϟ× ጶ  药片形ᖔ种皮为黑色ܦ种皮厚ᖔ有光泽
               ࣷॹ ၊ᡥᤇʗᔠʐࣩቂ  ऊၤᔀႿ੫଴ᔽ ᧕ᔽ༁ᡷʢᔽዹᡷᖔ ᣮᔽႿᔽႿ੫ ऊᔽᡷᢃ  ሕᤃ๼ᤃࣕ԰ᤃ঎ ँ԰ሕ× શ  ఋᑕᤦ᤟ᔀᡷ ༁ၤᑕᡱᔀᖔ ᡷᔀ༁ᡷᑕ ᔽ༁ ᤦ᤟ᑕዹҴ ᑕႿʛ ᡷၤᔽዹҴ औᔽᡷၤ ੫᤟ᆍ༁༁ᢃ

            个清晰的中期染色体分裂相的片子放于ͱऐԡ ቩ 冰                           ϟ঎԰঎ጢ 图像处理及分析জ 图片用软件 ۪ၤᆍᡷᆍ༁ၤᆍᡱ ዹዹ
            箱中冷冻保存ᤥ                                            ԰ԡϟጢ 进行调整及优化并完成配对ᖔ用软件 ጶቝᑕ੫ᔀ Ȯܦ
            ϟ঎԰঎԰ 标记探针জ 探针为通用探针ᖔ购自上海生物                         软件 ጶ଴ዹᔀ᤟ ԰ԡϟँ 进行后期的图像处理及染色体长度ܦ
            工程有限公司ᤥ                                            臂比等的计算ᤥ 核型分析及核型分类的依据分别采
            ϟ঎԰঎ሕ 荧光原位杂交জ 荧光原位杂交实验参考自                          用李懋学等ྉϟँऐጢɯ和 ୩ᡷᔀᤦᤦᔽႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ྉϟँᎮϟɯ的划分标
            本课题组喻凤等ྉ԰ԡϟᎮɯ 的方法ᤥ 将制备好的染色                         准ᖔ核型不对称系数参照 ዶʢᑕႿᆍ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ྉϟँᤃ԰ɯ的方法ᤥ
            体制片从ͱऐԡ ቩ 冰箱中拿出后迅速用刀片揭掉盖
            玻片ᖔ干燥后放置于 ԡ঎԰ ቝᆍ᤟ኼᓂ 溶于 Ꭾԡᠮ酒精的                      ԰জ 结果与分析
                                          ᥋ϟ
            氢氧化钠溶液中变性 ऐጲϟԡ ቝᔽႿଫ取出后直接放置
            于预冷的 Ꭾԡᠮ乙醇中做脱水处理约 ࿗ԡ ቝᔽႿଫ干燥                        ԣॹϓ ጇ 种藜属植物的核型分析
            后将配制好的杂交液 ϟԡ ဂᓂྉጢ ဂᓂ ጢԡᠮ甲酰胺ᖔ԰                          基于 ʢ᧕શዶ è᧧୩̀ 技术得到了 ጢ 种藜属植物中
            ဂᓂ ԰ԡġ୩୩ऊᖔϟ ဂᓂ 鱼精 ᧕શዶᖔ԰ ဂᓂ ϟԡᠮ 硫酸葡聚                期染色体 ጢ୩ ʢ᧕શዶ 和 ࿗ጢ୩ ʢ᧕શዶ è᧧୩̀ 制片ᖔ测定核
            糖ɯ中加入 ጢ୩ ʢ᧕શዶ 和 ࿗ጢ୩ ʢ᧕શዶ 各 ϟဂᓂᖔ混匀后                 型参数ᖔ并进行核型分析ྉ表 ԰ɯᤥ 藜麦和灰绿藜都
            滴至干燥的片子上ᖔ盖上较大的盖玻片ଫ将片子放                             是四倍体ᖔ染色体数目均为 ԰Ⴟ ᢉ ࿗଴ ᢉ ሕᤃᖔ藜ܦ菊叶香
            于潮湿密闭盒中ᖔ置于 ሕᎮ ቩ 下杂交 ऐၤᖔ过夜ᤥ                         藜及杂配藜都是二倍体ᖔ染色体数目均为 ԰Ⴟ ᢉ ԰଴ ᢉ
            ϟ঎԰঎࿗ 镜检জ 待时间到后用 ԰ġ୩୩ऊ 或 ʛʛ̀ ᨃ 冲洗                  ϟऐᖔ没有发现其他倍性或非整倍体存在的现象ᤥ 除
                                                   ԰
            几次ᖔ干燥后向制片上滴 ϟԡ ጲ ϟ԰ ဂᓂ 含有荧光猝灭                      了菊叶香藜全部由中部着丝粒染色体组成外ᖔ其余
            剂的 ᧕ዶ۪᧧ 染液ᖔ盖上较大的盖玻片ᤥ 用 ᓂᔀᔽዹᑕ 荧                     ࿗ 种藜属植物的染色体主要由中部着丝粒染色体
            光显微镜在低倍镜下找到染色体ᖔ在高倍镜下快                              ྉቝɯ和少数近中部着丝粒染色体ྉ༁ቝɯ 组成ᤥ 藜属
            速拍照ᖔ并标记后保存ᤥ                                        植物染色体绝对长度不足 ԰ဂቝᖔ属于小染色体ᤥ 不
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