Page 54 - 《广西植物》2021年第12期
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ϟ ँ ँ ऐ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷
对照ᖔ研究三倍体丹参杂交种花粉的外壁纹饰ܦ萌 道轴ྉጶɯ宽度ᖔ按孢粉学研究方法计算 ۪᥍ጶܦ۪ ᣰ ጶ
发沟ܦ花粉粒形状等花粉的形态特征ᖔ为三倍体丹 值ᖔ其中 ۪᥍ጶ 代表花粉大小ᖔ۪ ᣰ ጶ 代表花粉形状
参种质的利用ܦ丹参杂交育种提供孢粉学依据ᤥ 类型ᤥ 花粉极轴长度 ϟԡ ጲ ԡ ဂቝ 属于小花粉ᖔጢ ጲ
ጢԡ ဂቝ 属于中等大小花粉ᖔጢԡ ጲ ϟԡԡ ဂቝ 属于大花
ϟজ 材料与方法 粉ྉ 王开发和王宪曾ᖔ ϟँऐሕɯᤥ 利用 ୩۪୩୩ 软件
ྉ᧧ାᥘ ୩۪୩୩ ୩ᡷᑕᡷᔽ༁ᡷᔽዹ༁ ጢ 版本ɯ分析花粉测量数据ᤥ
ϓॹϓ 材料
丹参为市场销售的普通丹参种苗ᖔ产地为河 জ 结果与分析
南伏牛山ᤥ 四倍体白花丹参ġ二倍体丹参杂交选
育的三倍体材料由南开大学生命科学学院陈力教 ԣॹϓ 丹参二倍体ܓ三倍体花粉形态对比
授惠赠ᖔ为三倍体组培苗ᖔ经炼苗后移栽至天津农 ϟϟ 萌发沟জ 丹参二倍体ܦ三倍体花粉外观相
学院实验室ᤥ 室温条件下盆栽种植ᖔ营养土 ᨒ 蛭 近ᖔ均为黄色ܦ单粒花粉ྉ图版ሙɯᤥ 二倍体花粉光
石 ᢉ ϟᨒ ϟᖔ高温灭菌冷却后埋根ᖔ每个长形塑料盆 学显微镜ྉ图版 ᧧᧥ዶɯ 和扫描电镜下ྉ 图版 ᧧᧥᧕ɯ 赤
中放 ጲሕ 个根茎ᖔ株距 ϟԡ ጲ ϟጢ ዹቝᤥ 于丹参盛花期 道面观都可观察到 ሕ 条等距离萌发沟ᖔ沟长近两
ྉԡϟँ 年 ࿗ 月ɯ选择丹参二倍体ܦ三倍体花序相同 极ᖔ沟深ᖔ不形成合沟ᤥ 花粉侧面观呈扁球形ᖔ沟
部位ܦ刚展开的新鲜花朵ᖔ用镊子剥取花药ᖔ分别 形态与赤道面观相同ྉ 图版 ᧧᧥ጶɯᤥ 极面观可见 ᤃ
置于干净的 ϟጢ ቝᓂ 的离心管内保存ᤥ 一部分花药 条萌发沟ྉ图版 ᧧᧥ାᖔऊᖔèᖔ᥈ɯ᧥在光镜下ᖔ二倍体花
用于光学显微镜ྉᔽ੫ၤᡷ ቝᔽዹʢᆍ༁ዹᆍᡱᔀᖔ ᓂᥘɯ观察ᖔ另一 粉极面随拍摄景深不同ᖔᤃ 条萌发沟呈米字形排列
部 分 花 药 用于扫描电镜 ྉ ༁ዹᑕႿႿᔽႿ੫ ᔀᔀዹᡷʢᆍႿ ྉ图版 ᧧᧥ାɯᖔ或在花粉边缘呈 ᤃ 个凹槽ྉ 图版 ᧧᧥
ቝᔽዹʢᆍ༁ዹᆍᡱᔀᖔ ୩ጶᥘɯ观察ᤥ ऊɯଫ 电镜下二倍体花粉极面观呈扁长的串珠形ᖔ
ϓॹԣ 方法 萌发沟凹陷ྉ图版 ᧧᧥èɯᖔ或呈椭圆形ᖔ萌发沟不凹
ϟϟ 花粉形态观察জ 光学显微镜观察᧥ 将花粉抖 陷ྉ图版 ᧧᧥᥈ɯᤥ 二倍体花粉萌发沟数量和形状与
落在载玻片上ᖔ滴蒸馏水ᖔ盖上盖玻片ᤥ 用 ᓂጶ᧧ऊዶ 前人 ྉ 徐任生ᖔ ϟँँԡଫ 杨德奎 等ᖔ ԡԡሕଫ 李晓娟ᖔ
᧕ᥘ࿗ԡԡԡା 正置显微镜在ྉϟ ԡԡԡ ġɯ 的视野下选择 ԡϟሕɯ报道一致ᤥ
分散ܦ独立的花粉粒ᖔ先用 ᓂዶ᧧ऊዶ ᧕èऊ ࿗ጢԡ 数字相 三倍体花粉在光学显微镜和扫描电镜均观察
机拍照ᖔ再用 ᓂጶ᧧ऊዶ ᓂዶ୩ 软件计数及测量花粉的 到赤道面观萌发沟数量有变异ᖔ呈 ᤃ 条ྉ 图版֒᧥
长和宽ᤥ Ȯᖔᥘᖔશᖔ۪ɯ或 ऐ 条ྉ图版֒᧥ᖔᓂᖔᨃɯ 萌发沟两种类
扫描电镜观察᧥ 参照顾欣等ྉԡϟሕɯܦ张永芳 型ᤥ 与二倍体花粉萌发沟相比ᖔ同一个花粉上的
等ྉԡϟᤃɯ处理花粉的方法ᖔ先用签字笔做好标记ᖔ 萌发沟宽度和深度更不规则ᖔ或出现畸形萌发沟
用 ᡱ̀ ᢉ Ꭾԡ 的磷酸缓冲液漂洗ᖔ然后用 ሕᠮ戊二醛 ྉ图版֒᧥શɯᤥ 二倍体和三倍体花粉粒的萌发沟内
固定ᖔ置于 ࿗ቩ 冰箱过夜ᖔ固定后用 ᡱ̀ ᢉ Ꭾԡ 的磷 均匀密布疣状颗粒ᖔ二倍体萌发沟内的颗粒物分
酸缓冲液漂洗 ሕ 次ྉ 每次间隔 ϟጢ ቝᔽႿɯᖔ再进行乙 布密度较均匀ྉ 图版 ᧧᧥᥈ϟᖔ̀ϟᖔ̀ɯᖔ三倍体萌发
醇梯度脱水ྉሕԡᠮܦጢԡᠮܦᎮԡᠮܦऐԡᠮܦँԡᠮ各漂洗 ϟጢ 沟内的颗粒成簇分布ᖔ簇内颗粒紧密排列ᖔ簇间空
ቝᔽႿᖔ无水乙醇漂洗 ሕ 次ᖔ每次间隔 ϟԡ ቝᔽႿɯᖔ脱水 隙较二倍体的宽ྉ图版֒᧥۪ϟᖔ͐ϟᖔ͐ɯᤥ 三倍体萌
完毕后进行干燥ᖔ最后粘样品台ᖔ记录好台号对应 发沟数量有随倍性增加而增加的多倍化特征ଫ三
的花粉倍性ᖔ上机测试ᤥ 在 èጶ᧧ ͐ࣼᑕႿᡷᑕ ԡԡ 扫描电 倍体萌发沟畸形和沟内颗粒分布变化表明三倍体
镜下观察花粉粒赤道面和极面ᖔ加速电压 ϟጢ Ҵᖔ 花粉壁形成过程中某些代谢活动异常ᤥ
挑选饱满ܦ具有代表性ܦ完整的花粉粒观察萌发孔 ϟ 外壁纹饰জ 丹参二倍体ܦ三倍体花粉外壁均
类型和外壁纹饰以及进行拍照ᖔ 使用 ዶʛᆍᤦᔀ 为网状雕纹ᖔ网脊粗ܦ平滑ᖔ网脊呈多角形ᤥ 扫描
۪ၤᆍᡷᆍ༁ၤᆍᡱ ऊ୩ᤃ 软件制作图版ᤥ 电镜下二倍体花粉赤道面和侧面外壁雕纹网眼内
ϟ 数据分析জ 对照扫描电镜下花粉形态ᖔ将光 具多个大小不一的多边形穿孔ᖔ穿孔之间的次生
学显微镜下拍摄的花粉照片分类ᖔ用花粉赤道面 网脊薄ᖔ穿孔布满网眼ᖔ看上去较ᥥ 透亮ɼྉ 图版 ᧧᧥
观的长和宽测量值作为花粉粒极轴ྉ۪ɯ 长度和赤 ᧕ϟɯᤥ 三倍体花粉的赤道面外壁多数网眼内无穿
