Page 29 - 《广西植物》2021年第9期
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ँ 期 何 敏 等 ᧥ 两株耐寒 ۪᥈۪ା 的分离及其对藏北当地牧草生长的影响 ϟ ࿗ Ꭾ
表 ϓই 土壤营养成分 离菌 菌悬液分别点接于含有不溶性 磷 酸 盐
ఋᑕᤦᔀ ϟজ ऊၤᑕʢᑕዹᡷᔀʢᔽ༁ᡷᔽዹ༁ ᆍ ༁ᆍᔽ ႿࣼᡷʢᔽᔀႿᡷ ዹᆍቝᡱᆍ༁ᔽᡷᔽᆍႿ
ऊᑕ ྉ۪ᨃ ɯ 的 ۪ᔽҴᆍ༁Ҵᑕᢃ 琼脂平板的中心ᖔ置于 ऐ
ሕ ࿗
项目 单位 值 ቩ 培养箱ྉ 冯瑞章等ᖔԡԡጢɯᤥ 通过观察菌落周围
᧧ᡷᔀቝ ВႿᔽᡷ ᑕࣼᔀ
有无透明圈和测量透明圈的大小ᖔ来分析分离菌
总碳 ఋᆍᡷᑕ ऊ ᠮ ϟँᤃōԡԡጢऐ 的溶解不溶性磷酸盐的能力ᖔ并判断它的有无及
᥋ϟ
总磷 ఋᆍᡷᑕ ۪ ੫ኼҴ੫ ԡጢᤃōԡԡԡऐ 强弱ᤥ 上述所有指标的测定均设置 ሕ 个重复ᤥ
᥋ϟ ϓॹ 盆栽试验
总氮 ఋᆍᡷᑕ શ ੫ኼҴ੫ ԡōԡԡᎮ
᥋ϟ
速效氮 ዶᑕᔽᑕᤦᔀ શ ቝ੫ኼҴ੫ ϟ࿗ँᎮऐō࿗ሕऐ 首先ᖔ 用 Ꭾጢᠮ 乙醇溶液浸泡 ϟቝᔽႿ 和 ጢᠮ
᥋ϟ શᑕऊᨃ 溶液浸泡 ጢቝᔽႿ 对早熟禾和老芒麦的种子
速效磷 ዶᑕᔽᑕᤦᔀ ۪ ቝ੫ኼҴ੫ Ꭾԡᤃōԡጢጢ
进行表面灭菌处理ᖔ经灭菌水清洗 ሕ 次后ᖔ灭菌种
᥋ϟ
速效钾 ዶᑕᔽᑕᤦᔀ ቝ੫ኼҴ੫ ँ࿗ᎮᎮōϟϟ࿗
子分别用 ϟԡ ቝᓂ 浓度为 ϟԡ ዹࣼኼቝᓂ 的菌悬液浸
᥋ϟ
ऐ
᥋ϟ
总盐 ఋᆍᡷᑕ ༁ᑕᡷ ੫ኼҴ੫ ԡ࿗ōԡԡ
泡 ၤᖔ对照处理用灭菌磷酸盐缓冲液ᤥ 然后ᖔ将
᥋ϟ
铁元素 ᧧ʢᆍႿ ᔀᔀቝᔀႿᡷ ੫ኼҴ੫ ōԡᤃᎮ
种子播种在装有 ϟऐԡ ੫ 灭菌砂的培养瓶中ᖔ加入 ጢ࿗
干湿比 ᧕ʢᢃ औᔀᡷ ʢᑕᡷᔽᆍ ᠮ ԡँँōԡԡԡԡ࿗
ቝᓂ 的 ԡጢ 倍改良霍格兰溶液ᖔ并在温室ྉጢ ቩ ɯ 中
培养ᤥ 根据西藏土壤矿物盐组 成 ྉ 表 ϟɯ 改良了
ྉጢࣕ᥋ዶऊ᥈᥈ఋዶऊऊఋఋ᥈ఋዶऊ᥈ዶऊఋఋ᥋ሕࣕɯ进行 ϟᤃ୩ ʢશዶ ᥋ϟ
̀ᆍᑕ੫ᑕႿʛ 营养液ᖔ 配方如下᧥ँ࿗ ጢ ੫ ኼ ᓂ ऊᑕ
基因序列 ۪ऊ 扩增ᖔ所得 ۪ऊ 扩增产物经验证后 ᥋ϟ ᥋ϟ
ྉશᨃ ɯ ኼ࿗̀ ᨃᖔ ጢԡᤃ ੫ኼᓂ શᨃ ᖔऐ ੫ኼᓂ શ̀ શᨃ ᖔ
ሕ ሕ ࿗ ሕ
送上海生工公司测 序ᤥ 将测序所得序列与
᥋ϟ
᥋ϟ
ԡԡԡ Ꭾᤃ ੫ኼᓂ ̀ ۪ᨃ ᖔ࿗ँሕ ੫ኼᓂ ᥘ੫୩ᨃ ኼᎮ̀ ᨃᖔ
࿗
࿗
ጶझାᔽᆍዹᆍࣼʛ 数据库中的 序列进行比对ᤥ 利用
᥋ϟ
᥋ϟ
ሕᎮሕ ੫ ኼᓂ ጶ᧕ఋዶ᥋શᑕᖔ Ꭾऐ ੫ ኼᓂ èᔀ୩ᨃ ኼᎮ̀ ᨃᖔ
࿗
ᥘጶ᥈ዶ ᤃԡᤃ 中的邻位连接法ᖔ构建系统发育树ᤥ
᥋ϟ
᥋ϟ
ԡऐሕ ቝ੫ኼᓂ ᧧ᖔ ሕ ቝ੫ኼᓂ ᥘႿ୩ᨃ ᖔԡጢ ቝ੫ኼᓂ ᥋ϟ
ϓॹᇺ ۗᤩۗଧ 植物促生属性分析 ࿗
᥋ϟ ᥋ϟ
શᑕ ᥘᆍᨃ ᖔԡԡጢ ቝ੫ኼᓂ ऊᆍऊ ᖔᤃ ቝ੫ኼᓂ ̀ାᨃ ᖔ
对分离菌株的促生特性进行了评价ᤥ 根据 ࿗ ሕ
᥋ϟ ᥋ϟ
᥈ᔽዹҴቝᑕႿႿ ᪲ ᧕ᔀ༁༁ᑕࣼ ྉϟँँጢɯ 描述的方法ᖔ对分离 ऐᤃ ቝ੫ኼᓂ ԻႿ୩ᨃ 和 ԡԡጢ ቝ੫ኼᓂ ऊࣼ୩ᨃ ྉᡱ̀ ᤃԡɯᤥ
࿗
࿗
最后ᖔ种子萌发后ᖔ将幼苗移至低温ྉϟԡ ቩ ɯܦ光照
菌株的产 ᧧ዶዶ 能力进行检测ᤥ 将菌株接种在含 ᓂ᥋
强度为 ϟԡ ԡԡԡ ྉ光暗 ᢉ ϟ࿗ ၤ ᣰ ϟԡ ၤɯ的条件下培养
色氨酸的 ዶ 培养基中ᖔ孵育 Ꭾ ၤ 后ᖔ离心收集
无菌上清液ᖔ用比色微板法测定培养基上清液中 ྉ本试验采用的栽培条件是依据青藏高原 ᤃ 月份
的平均温度ܦ日照强度和日照时数而确定ɯᤥ 每个
᧧ዶዶ 在 ᨃ᧕ Ⴟቝ 波长处的吸光值ᖔ并绘制 ᧧ዶዶ 的
ጢሕԡ
处理设置 ጢ 个重复ᤥ
标准曲线以定量分析ᤥ
培养 ሕԡ ʛ 后ᖔ收获植株ᤥ 测量植株的株高ܦ根
按照 ۪ᔀႿʢᆍ༁ᔀ ᪲ ᥈ᔽዹҴ ྉԡԡɯ提出的方法进行
ዶऊऊ 脱氨酶活性的定量测定ᤥ 将细菌菌体在不含 长ܦ地上鲜重ܦ地下鲜重ܦ地上干重和地下干重ᤥ
硫酸铵的 ᧕è 培养基中培养 ऐၤᖔ离心收集沉积的 ϓॹጇ 数据分析
采用 ᧧ାᥘ ୩۪୩୩ ୩ᡷᑕᡷᔽ༁ᡷᔽዹ༁ ԡ 统计软件进行统
细菌 细 胞ଫ 将收集的细胞重新悬浮在 添 加 ሕ ԡ
ቝቝᆍኼᓂ ዶऊऊ 的 ᧕è 培养基中ᖔ孵育 ࿗ ၤ 后ᖔ用 计分析ᖔ对记录的数据进行单因素方差分析和双
᥋ϟ
因素方差分析ᖔ以 ۗ 值的大小评价其显著性ᤥ 所
比色法测定酶活性ᤥ
根据 ऊၤᔀʢᔽ᥋୩ᔽᔽႿᔽ ᔀᡷ ᑕ ྉԡϟᤃɯ 描述的方法定 有图示均由 ᨃʢᔽ੫ᔽႿ 软件ྉԡϟऐ 版ɯ绘制ᤥ
量测定 ୩᧧᧕ 的产量ᤥ 在 ᔽႿ੫ᆥ ା 培养基中培养 Ꭾ
জ 结果与分析
ၤ 后ᖔ离心收集 ጢԡԡ ဂᓂ 上清液ᖔ与 ጢԡԡ ဂᓂ 铬天青 ୩
测定混合溶液ᤥ 在 ᤃሕԡ Ⴟቝ 波长处测定混合物的
௴ͱᓣ ԣॹϓ 耐低温细菌的分离鉴定
吸光值ᤥ୩᧧᧕ 的百分比按以下公式计算᧥ ġ
௴ 从西藏土壤中ᖔ最终成功分 离 得 到 ఋ୩ 和
ϟԡԡᠮᤥ 式中ᖔ௴ 是深蓝的 ऊዶ୩ 溶液的吸光值ྉ对 ఋ୩Ꭾ 两株细菌ᤥ 将所测得的分离 菌 株 的 ϟᤃ୩
照ɯᖔᓣ 是从蓝色变为橙色的样品的溶液吸光值ᤥ ʢશዶ 基因序列与 ጶझାᔽᆍዹᆍࣼʛ 数据库中的序列进行
为检测菌株溶解不溶性磷酸盐的能力ᖔ将分 比对ᖔ确定菌株的分类学地位ᖔ 构建系统发育进化
