Page 100 - 《广西植物》2022年第7期

ϟ ϟ Ꭾ ԰ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗԰ 卷
冬花蕾发育过程中部分特征代谢物呈现显著变 酸的 ጢሕᠮ甲醇水溶液代替实验样本ᖔ前处理过程
化ଫ̀ᔀ 等ྉ԰ԡ԰ԡɯ利用转录组和代谢组研究铁皮石 与实验样本相同ᤥ
斛花的发育机制ᖔ发现次生代谢和碳水化合物的 ϓॹᇺ 非靶向代谢组学཯ᒦࣷ᤬᤹୒ ᣑ ᤹୒ɤ检测
变化与花的发育有关ଫ徐红霞等ྉ԰ԡ԰ԡɯ 采用 ᥈ऊ᥋ 采用 ఋၤᔀʢቝᆍ ̀ᢃᡱᔀʢᔽ᤟ ᥈ᆍ᤟ʛ ዹᆍ᤟ࣼቝႿ 色谱柱
ᥘ୩ 技术检测枇杷花发育进程中的代谢物质ᖔ揭示 ྉऊϟऐɯᖔ柱温 ࿗ԡ ቩ ᖔ流速 ԡ঎԰ ቝᓂኼቝᔽႿ ᤥ 正离子
᥋ϟ
影响花发育进程的生理与代谢机制ᤥ 代谢组学对 模式᧥流动相 ዶ 为 ԡ঎ϟᠮ甲酸ᖔ流动相 ା 为甲醇ଫ负
植物花的发育代谢产物及代谢通路研究提供了 离子模式᧥流动相 ዶ 为 ጢቝቝᆍ᤟ 醋酸铵ྉᡱ̀ ँ঎ԡɯᖔ流
方法ᤥ 动相 ା 为甲醇ଫ梯度洗脱ྉԡ ጲ ϟ঎ጢ ቝᔽႿᖔँऐᠮዶᖔ԰ᠮ
本研究以贵州省毕节市大方县百里杜鹃风景 ାଫϟ঎ ጢ ጲ ϟ԰ ቝᔽႿᖔϟԡԡᠮ ାଫϟ԰ ጲ ϟ࿗ ቝᔽႿᖔϟԡԡᠮ ାଫ
区为研究区域ᖔ以马缨杜鹃花为研究对象ᤥ 选取 ϟ࿗ ጲ ϟ࿗঎ϟ ቝᔽႿᖔँऐᠮዶᖔ԰ᠮାଫϟ࿗঎ϟ ጲ ϟᎮ঎ԡ ቝᔽႿᖔँऐᠮ
花苞期ܦ开裂期ܦ传粉期ܦ盛开期ܦ衰老期和凋谢期 ዶᖔ ԰ᠮ ା ɯᤥ 进样量 为 ϟԡ ဂᓂᤥ 利用 ఋၤᔀʢቝᆍ
的花为材料ᖔ采用非靶向代谢组学ྉᓂऊ᥋ᥘ୩ ᣰ ᥘ୩ɯ 分 ჆ᑕႿीࣼᔽ༁ၤ В۪̀ᓂऊ 液相色谱 ఋၤᔀʢቝᆍ ͐ጶ 系列质谱分
析方法ᖔ研究马缨杜鹃花开花至凋谢进程中 ᤃ 个 别进行正ܦ负离子模式采集ᤥ 扫描范围选择 ቂᣑ ऊ
阶段的代谢产物及代谢通路ᖔ拟探讨以下问题᧥ Ꭾԡ ጲ ϟ ԡጢԡଫጶ୩᧧ 源的设置如下᧥୩ᡱʢᑕᢃ ׹ᆍ᤟ᡷᑕ੫ᔀ 为 ሕ঎԰
ྉϟɯ马缨杜鹃花开花至凋谢进程中不同阶段代谢 Ҵ჆ଫ୩ၤᔀᑕᡷၤ ੫ᑕ༁ ஦᤟ᆍऔ ʢᑕᡷᔀ 为 ሕጢ ᑕʢᤦଫዶࣼ଴ ੫ᑕ༁ ஦᤟ᆍऔ ʢᑕᡷᔀ
物如何变化ଫྉ԰ɯ分析马缨杜鹃花差异显著的代谢 为 ϟԡ ᑕʢᤦଫ ऊᑕᡱᔽ᤟᤟ᑕʢᢃ ᡷᔀቝᡱ 为 ሕ԰ԡ ቩ ᤥ ۪ᆍ᤟ᑕʢᔽᡷᢃ᧥
物和相关的代谢通路ଫྉሕɯ 筛选出与马缨杜鹃花发 ᡱᆍ༁ᔽᡷᔽ׹ᔀଫ Ⴟᔀ੫ᑕᡷᔽ׹ᔀଫ ᥘ୩ ᣰ ᥘ୩ 二级扫描为 ʛᑕᡷᑕ᥋
育相关的重要代谢物ᤥ 本研究结果为马缨杜鹃花 ʛᔀᡱᔀႿʛᔀႿᡷ ༁ዹᑕႿ༁ᤥ 每 ϟԡ 个分析样本进行一次 ͐ऊ

花期调控提供理论基础和科学依据ᤥ 样本ᖔ评价整个实验过程中仪器状态的稳定性和
检测数据结果的准确性ᤥ
ϟজ 材料与方法 ϓॹ྽ 数据分析

将采集到的原始数据导入 ऊᆍቝᡱᆍࣼႿʛ᧕ᔽ༁ዹᆍ׹ᔀʢᔀʢ
ϓॹϓ 实验材料 ሕ঎ϟྉऊ᧕ɯ软件中ᖔ通过保留时间ܦ质荷比对数据进
实验材料为贵州省毕节市大方县百里杜鹃风 行过滤ᖔ然后根据保留时间偏差 ԡ঎԰ ቝᔽႿ 和质量偏
᥋ϟ
景区马缨杜鹃ᤥ 差 ጢဂ੫ኼቝᓂ 进行峰对齐ᖔ随后根据质量偏差 ጢ
԰ԡ԰ԡ 年选取长势基本一致马缨杜鹃ᖔ分别在 ဂ੫ኼቝᓂ ܦ信号强度偏差 ሕԡᠮྉ᧕ᑕᔽ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟᎮɯ等
᥋ϟ
花苞期ྉሕ 月 ԰ԡ 日ɯܦ开裂期ྉሕ 月 ԰࿗ 日ɯܦ传粉期 信息进行峰提取ᖔ同时对峰面积进行定量ᖔ再整合
ྉሕ 月 ሕԡ 日ɯܦ盛开期ྉ࿗ 月 ሕ 日ɯܦ衰老期ྉ࿗ 月 ϟԡ 目标离子ᖔ然后通过分子离子峰和碎片离子进行
日ɯܦ凋谢期ྉ࿗ 月 ϟጢ 日ɯᖔ从 ᤃ 株树上采集适量马 分子式的预测并与 ቝझऊ᤟ᆍࣼʛܦቝझ჆ᑕࣼ᤟ᡷ 和 ᥘᑕ༁༁ᓂᔽ༁ᡷ 数
缨杜鹃花样本ᖔ经液氮冷冻后运回实验室进行代 据库进行比对ᖔ用 ᤦ᤟ᑕႿҴ 样本去除背景离子ᖔ并对
谢组学检测ᖔ每个时期取 ᤃ 个生物学重复样本ᤥ 定量结果进行归一化ᖔ最后得到数据的鉴定和定
ϓॹԣ 马缨杜鹃花代谢物提取 量结果ᤥ
基于液质联用ྉᓂऊ᥋ᥘ୩ ᣰ ᥘ୩ɯ 技术ྉ ۼᑕʢऔᔽዹҴ ᔀᡷ 使用 ᥘᔀᡷᑕᣮྉۼᔀႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟᎮɯ 软件对数据进
ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟϟଫۼᑕႿᡷ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟԡɯ进行非靶向代谢组学 行对数转换处理ᖔ将所有实验样本和 ͐ऊ 样本导入
研究ᤥ 取 ϟԡԡ ቝ੫ 液氮研磨的马缨杜鹃花样本ᖔ置 ୩᧧ᥘऊዶϟ࿗঎ϟ 软件进行多元统计 分 析 ྉ 阿基业ᖔ
于 ጶ۪ 管中ᖔ加入 ጢԡԡ ဂᓂ 含 ԡ঎ϟᠮ甲酸的 ऐԡᠮ甲醇 ԰ԡϟԡɯᖔ采用主成分分析ྉ۪ऊዶɯ 观察各样本的整个
水溶液ᖔ 涡旋震荡ᖔ 冰浴静置 ጢ ቝᔽႿᖔϟጢ ԡԡԡ ʢ ኼ 过程的稳定性ᖔ然后进一步使用有监督的正交偏
ቝᔽႿ ܦ࿗ ቩ 离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ取 ϟԡԡ ဂᓂ 的上清加超纯去 最小二乘判别分析ྉᨃ۪ᓂ୩᥋᧕ዶɯ 来区分各组间代谢
᥋ϟ
离子水稀释至甲醇含量为 ጢሕᠮᖔ并置于离心管中 物的差异性ᤥ 根据多变量 ᨃ۪ᓂ୩᥋᧕ዶ 模型分析中变
ϟጢ ԡԡԡ ੖ܦ࿗ ቩ 离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ收集上清液ᖔ进样 ᓂऊ᥋ 量权重ྉ Ⴌᧇۗᢦϟɯܦ结合 ᡙ 检验的 ۗ 值ྉ ۗጐԡ঎ԡጢɯ 和
ᥘ୩ ᣰ ᥘ୩ 进行检测分析ᤥ 单变量分析差异倍数 ྉ ஦ᆍ᤟ʛ᥋ዹၤᑕႿ੫ᔀᖔÞዞ ᢦ԰ 或 Þዞ ጐ
从每个实验样本中取等 体积样本混匀作为 ԡ঎ጢɯ筛选差异代谢物ᤥ 维恩图由 ఋା ᡷᆍᆍ᤟༁ ԡ঎ᤃ 软件
ྉीࣼᑕ᤟ᔽᡷᢃ ዹᆍႿᡷʢᆍ᤟ɯ ͐ऊ 样本ᤥ 空白样本为含 ԡ঎ϟᠮ甲 完成ᖔ代谢通路富集分析基于 ᣽ጶ᥈᥈ 数据库ᤥ