Page 97 - 《广西植物》2022年第9期
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ँ 期 梁勇等᧥ 民族药刺梨根茎化学成分及其抗炎活性研究 ϟ ጢ ሕ ሕ
刺梨应用提供科学根据ᖔ也为其后续刺梨活性成 化合物 ጇྉ࿗ԡ ቝ੫ɯଫ对 ᧕ 部分采用 ୩ᔀᡱၤᑕʛᔀ ᓂ̀᥋ԡ
分的进一步开发利用提供物质基础ᤥ 凝胶色谱柱甲醇洗脱和硅胶柱氯仿 ᨒ 甲醇 ᢉ ᤃᨒ
ϟጲ ࿗ ᨒ ϟ 洗脱ᖔ获得化合物 ྉԡԡ ቝ੫ɯܦ化合物 ᣤ
ϟজ 材料与方法 ྉጢ ቝ੫ɯ 和化合物 ᎒ ྉϟऐ ቝ੫ɯᤥ ऊ 部分依次用氯
仿 ᨒ 甲醇 ᢉ ሕԡ ᨒ ϟ ጲ ԡ ᨒ ϟ ጲ ϟԡ ᨒ ϟ 等度洗脱ᖔ得到
ϓॹϓ 材料 ऊϟܦऊܦऊሕ 三个亚流分ᤥऊϟ 部分用氯仿 ᨒ 甲醇 ᢉ
药材᧥采自贵州省贵阳市白云区ᖔ经贵州中医 ϟԡ ᨒ ϟ 洗脱和甲醇重结晶得到化合物 ϓྉᤃጢ ቝ੫ɯ 和
药大学孙庆文教授鉴定为蔷薇科植物刺梨ྉ ቴᅳᐹ ԣྉ࿗ ቝ੫ɯଫऊሕ 部分用氯仿 ᨒ 甲醇 ᢉ ሕԡ ᨒ ϟ ጲ ԡ ᨒ ϟ
ʗᅳଝᤇࣩʗ၊ᔠᔠ ɯ的根茎ᖔ凭证标本存于贵州省中国科学 梯度洗脱ᖔ重结晶得到化合物 ࣮ྉϟᤃ ቝ੫ɯᤥ ା 部分
院天然产物化学重点实验室功能中心ྉ 凭证标本 用氯仿 ᨒ 甲醇 ᢉ ԡ ᨒ ϟ ጲ ϟԡ ᨒ ϟ 梯度洗脱ᖔ重结晶
号᧥ऊᓂԡϟँԡϟɯᤥ 得到化合物 ᇺྉሕጢ ቝ੫ɯܦࣽྉᤃ ቝ੫ɯܦϓԔྉϟጢ ቝ੫ɯܦϓϓ
细胞株᧥小鼠单核巨噬细胞ྉ ዶۼ ᤃ࿗Ꭾɯᖔ购 ྉሕ ቝ੫ɯܦϓᇺྉϟጢ ቝ੫ɯᤥ ዶ 部分依次用石油醚 ᨒ 乙
买于中乔新舟生物科技公司ᖔ在贵州省中国科学 酸乙酯 ᢉ ࿗ԡ ᨒ ϟ ጲ ሕԡ ᨒ ϟ ጲ ԡ ᨒ ϟ 等度洗脱ᖔ得到化
院天然产物化学重点实验室功能中心冻存ᤥ 合物 ϓጇྉϟጢ ቝ੫ɯܦ化合物 ϓԣྉጢ ቝ੫ɯ 和化合物 ϓ
ϓॹԣ 仪器 ྉϟऐ ቝ੫ɯᤥ 其中ᖔ化合物 ϓͱϓ 的结构式见图 ϟᤥ
̀ᔀऔᔽᔀᡷᡷ ۪ᑕҴᑕʢʛϟϟԡ 质谱仪ྉ 美国惠普公司ɯᖔ ϟ࿗ 单体化合物对 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 细胞活力的影响
ାʢࣼҴᔀʢዶᥘ᥋ᤃԡԡᥘ̀झ 核磁共振测试仪ྉ 美国布鲁克 জ 采用 ᥘఋఋ 法ྉ周晗等ᖔԡԡɯ 检测单体化合物对
公司ɯᖔ倒置荧光显微镜ྉશᔽҴᆍႿ 公司ɯᖔ二氧化碳 小鼠巨噬细胞 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 活力的影响ᖔ取对数生
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培养箱ྉጶ୩ऊᨃ 公司ɯᖔͱऐԡ ቩ 超低温冰箱ྉఋၤᔀʢቝᆍ 长期细胞ᖔ调整细胞浓度为每毫升 ġϟԡ 个ᖔ接种
公司ɯᖔ多模式酶标仪ྉ۪ᔀʢҴᔽႿጶቝᔀʢ 公司ɯᤥ 于 ँᤃ 孔板中ᖔ每孔 ϟԡԡ ဂᓂᖔ在 ሕᎮ ቩ ܦጢᠮऊᨃ 培养
ϓॹᇺ 试剂 箱中培养至细胞贴壁ᖔ加入不同浓度药液作为给
柱色谱硅胶ྉᤃԡ ጲ ϟԡԡ 目ᖔԡԡ ጲ ሕԡԡ 目ᖔሕԡԡ ጲ 药组ᖔ继续培养 ࿗ ၤᖔ每孔加入 ԡ ဂᓂ 的 ᥘఋఋྉ ጢ
࿗ԡԡ 目ᖔ青岛海洋化工厂ɯᖔ୩ᔀᡱၤᑕʛᔀ ᓂ̀᥋ԡྉ 美国 ቝ੫ኼቝᓂ ɯᖔ࿗ ၤ 后吸取上清液ᖔ每孔加入 ϟጢԡ ဂᓂ
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᥈ጶ 公司ɯᖔ二甲基亚砜ྉ᧕ᥘ୩ᨃ 天津市致远化学试 ᧕ᥘ୩ᨃᖔ避光振荡 ϟԡ ቝᔽႿᖔ在 ጢᎮԡ Ⴟቝ 下检测其吸光
剂有限公司ɯᖔ۪ା୩ ᡱ̀ Ꭾ࿗ 缓冲液ܦèା୩ 胎牛血清ܦ 度值ᤥ
᧕ᥘጶᥘ 培养基ྉ默克公司ɯᖔ胰蛋白酶 ጶ᧕ఋዶྉ 生物 ϟ࿗ሕ ᥈ʢᔽᔀ༁༁ 法检测 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 细胞 શᨃ 释放জ 采
工 业以色列 拜特海姆有限公司 ɯᖔ 脂多糖 用 ᓂ۪୩ 诱导的小鼠巨噬细胞 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 炎症模型
ྉᔽᡱᆍᡱᆍᢃ༁ᑕዹዹၤᑕʢᔽʛᔀᖔᓂ۪୩ɯܦ噻唑蓝ྉ ቝᔀᡷၤᢃ ᡷၤᔽᑕझᆍᢃ 评价单体化合物抗炎活性ᖔ利用 ᥈ʢᔽᔀ༁༁ 试剂显色法
ᡷᔀᡷʢᑕझᆍᔽࣼቝᖔ ᥘఋఋ ɯ ྉ 默克公司 ɯᖔ 地塞米松 检测 શᨃ 释放量ྉ 杨晓露等ᖔԡϟሕɯᤥ 取对数生长
ྉʛᔀᑕቝᔀᡷၤᑕ༁ᆍႿᔀɯྉ默克公司ɯᖔશᨃ 检测试剂盒ྉ 碧 期细胞ᖔ调整细胞浓度为每毫升 ϟġϟԡ 个ᖔ接种于
ጢ
云天生物技术公司ɯᤥ ँᤃ 孔板中ᖔ待细胞贴壁后ᖔ每孔加入不同浓度待测
ϓॹ 实验方法 样品ᖔᓂ۪୩ 的终浓度为 ϟဂ੫ኼቝᓂ ᖔ每个浓度设置
᥋ϟ
ϟ࿗ϟ 提取与分离জ 新鲜刺梨根茎ྉ࿗ԡ Ҵ੫ɯ洗净ܦ切 ሕ 个复孔ᖔ继续培养 ࿗ ၤᖔ取培养液上清ᖔ按 શᨃ 试
碎后ᖔ先用 ऐԡᠮ乙醇浸泡 ሕʛᖔ再用 ऐԡᠮ的乙醇热 剂盒说明书操作ᖔ测定 શᨃ 的释放量ᤥ 用酶标仪在
回流提取 ሕ 次ᖔ每次 ၤᖔ趁热过滤ᖔ合并提取液ᖔ ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 下测定吸光度值ᖔ 实验 数 据 由 ᥈ʢᑕᡱၤ۪ᑕʛ
减压浓缩至无醇味ᖔ转移到水浴锅ྉᤃԡ ቩ ɯ 浓缩为 ۪ʢᔽ༁ቝ Ꭾ 生物统计学软件计算药物对小鼠巨噬细胞
浸膏ᖔ浸膏 ԡᤃጢ Ҵ੫ᤥ ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 炎症因子 શᨃ 释放的 ᧧ऊ 值ᤥ
ጢԡ
对浸膏进行硅胶柱层析分离ᖔ选用氯仿 ᨒ 甲
醇 ᢉ ྉϟԡ ᨒ ϟܦጢ ᨒ ϟܦϟ ᨒ ϟܦԡ ᨒ ϟɯ 作洗脱剂ᖔ得到四 জ 结果与分析
个部分ᖔ分别为 ዶ 部分 ϟϟ ੫ܦା 部分 ँᎮ ੫ܦऊ 部分
ԣॹϓ 结构鉴定
ᤃँ ੫ 和 ᧕ 部分 ᤃሕ ੫ᤥ ᧕ 部分采用氯仿甲醇 ᢉ ᤃᨒ ϟ
洗脱ᖔ得到 ᧕ϟ 和 ᧕ 两个亚流分ᤥ᧕ϟ 部分使用氯 化合 物 ϓ জ 白色粉末ᤥ ጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥ᤃᎮሕ ሕ
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仿 ᨒ 甲醇 ᢉ ऐᨒ ϟ 洗脱ᖔ减压浓缩甲醇重结晶得到 Џᥘշશᑕ ᖔ 分子式为 ऊ ̀ ᨃ ᤥ ̀ શᥘ ྉᤃԡԡ ᥘ̀झᖔ
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