Page 16 - 《广西植物》2022年第5期
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Ꭾ ࿗ ԡ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
褐毛忍冬的花及花蕾放于安瓿瓶ᖔ加入适量的苏 片通常为 ࿗ 对ᤥ 不同生长时期叶形由针叶到椭圆
木精染液ᖔ放于 ࿗ԡ ቩ 温箱中 ࿗ ጲ ሕᤃ ၤᖔ冲净后用稀 变化ᖔ叶色由黄褐色逐渐变为绿色ᤥ 成熟叶长为
氨水ྉϟᠮ ጲ ᠮɯ 浸泡 ϟጢ ቝᔽႿᖔ洗净后依次用 ሕጢᠮܦ ࿗ԡ ጲ Ꭾԡ ዹቝᖔ宽为 ϟጢ ጲ ሕԡ ዹቝᖔ叶柄长为 ࿗ԡ ጲ Ꭾԡ
ጢጢᠮܦᎮጢᠮ和 ँጢᠮ 酒精 脱 水ᖔ在二甲苯浸泡 ࿗ጲᤃ ዹቝᖔ叶柄密布黄褐色腺毛ᖔ较硬ᖔ叶片为狭长椭圆
ቝᔽႿ 后石蜡包埋过夜ᤥ 用刀片将包埋好的样品进 形ᖔ叶片上下表面均被黄褐色腺毛ᖔ叶脉网状分
行修块ᖔ用酒精灯将其粘贴在小木块上ᖔ切片ᖔ明 布ᖔ中脉处腺毛明显可见ᤥ 茎顶端叶间距 ϟԡ ጲ ϟጢ
胶固定ᖔ吸水纸吸去一侧水ᖔ放于烘片机上烤干ᖔ ዹቝᖔ下部间距较宽ᖔ可达 ᤃԡ ዹቝᤥ 短总状花序着生
待其干后ᖔ用生物显微镜观察ᖔ放于 ࿗ԡ ቩ 恒温箱 于叶腋或幼枝顶部ᤥ 小苞片为长钻形ᖔ长为 ࿗ԡ ጲ
中烘烤 ϟԡ ʛ 以上ᖔ脱蜡ᖔँጢᠮ酒精配制的番红染液 Ꭾԡ ቝቝᖔ小苞片上密布硬而短的腺毛ᤥ 卵状椭圆
复染ᖔ洗脱后封片再观察ᤥ 形萼筒长 ϟԡ ጲ ሕԡ ቝቝᖔ萼筒上无毛ᖔ萼齿较萼筒
ϟሕ 薄层色谱鉴别জ 参照薄层色谱法ྉβ 中国药 长ᤥ 花朵前期白色ᖔ后期变为黄色ᤥ 开放的花朵
典ଭԡԡ 年版四部通则 ԡጢԡɯ试验方法ᖔ分别将黄 长 ሕԡ ጲ ጢԡ ዹቝᖔ花筒较唇瓣短ᖔ外被黄褐色短腺
褐毛忍冬花ܦ幼叶和幼茎粉碎ᖔ过 ࿗ԡ 目筛ᖔ各称取 毛ᖔ花丝和花柱较长ᖔ雄蕊和柱头外露ᖔ表面光滑
粉末 ϟԡ ੫ᖔ分别加入 ԡ ቝᓂ ጢԡᠮ乙醇溶液ᖔ水浴回 无毛ᖔ柱头为短椭圆形ᤥ 节间较短ᖔ节间花束常为
流加热 ሕԡ ቝᔽႿ 后ᖔ置冰水中冷却ᖔ抽滤后取滤液ᖔ ϟԡ ጲ 束ᖔ开花较整齐ᤥ 花期较短ᖔ仅 周左右ᤥ
滤液于蒸发皿上挥发至干燥ᖔ向残留物中加入 ࿗ 浆果球状黑色ᤥ
ቝᓂ 甲醇ᖔ将残留物溶于甲醇备用ᤥ 另以甲醇作为 ԣॹԣ 花横切面显微鉴别
᥋ϟ 黄褐毛忍冬花冠表皮细胞垂周壁链珠状增
溶剂ᖔ制备 ԡጢԡ ቝ੫ኼቝᓂ 的山柰酚对照品溶液ᤥ
将上述溶液点于同一硅胶 ᥈ 薄层板ᖔ采用酸乙酯 ᨒ 厚ᖔ外平周壁可见波浪状条纹ᤥ 花粉囊饱满ᖔ呈长
甲酸 ᨒ 水ྉऐ ᨒ ϟ ᨒ ϟɯ 作为展开剂ᖔ于 ጢ ቩ 和 ᤃጢᠮ 蚌状ᖔ左右对开ᖔ直径 ሕϟԡԡ ጲ ሕᎮԡԡ ဂቝᤥ 花瓣表皮
温湿度条件下展开ᖔ喷 ϟԡᠮ的硫酸乙醇ᖔ干燥后置 细胞狭长ᖔ排列紧密ᖔ细胞壁呈长条状增厚ᤥ 垂周
ሕᤃጢ Ⴟቝ 的紫外灯下检视ᤥ 壁中有多数草酸钙簇晶ᖔ棱角较为尖锐ᤥ 花瓣薄
ϟ࿗ 分子鉴别জ 参照蒋向辉等ྉԡϟԡɯ 采用改良 壁细胞近圆形ᖔ直径 ࿗ԡ ጲ ϟԡ ဂቝᤥ 花粉粒微黄
ऊఋዶା 法分别提取黄褐毛忍冬幼叶ܦ老叶和花的总 色ᖔ呈长三角形或长卵圆形ᖔ直径为 ጢԡ ጲ ϟጢԡ ဂቝᤥ
᧕શዶ 提取并设计引物ᖔ 引物序列 ᧧ఋ୩ ጲ è᧥ 花粉粒可见有较明显的萌发孔沟ᤥ 油室呈短椭圆
᥈᥈ዶዶ᥈᥈ఋዶዶዶዶ᥈ఋऊዶዶ᥈᥈ଫ᧧ఋ୩ጲ ᧥ఋऊऊఋऊऊ᥈ऊఋఋ 形ᖔ切面分泌细胞较多ᖔ附近可见有黄棕色分泌物
ዶఋఋ᥈ዶఋዶఋ᥈ऊᤥ 参照蒋向辉等ྉ ԡϟԡɯ 的 ۪ऊ 扩 和单细胞非腺毛ᤥ 具体见图 ϟᤥ
增程序进行 ۪ऊ 扩增ᖔ᧕શዶ 片段回收并克隆 到 ԣॹᇺ 花粉末显微特征
ᡱᥘ᧕ ϟऐ᥋ఋ 载体ᖔ挑选 ᤃ 个阳性克隆提取质粒测序ᖔ 花粉粉碎后呈黄色ᖔ单细胞球形ᖔ偶见有淡黄
同时 对 ۪ऊ 产物直接测序ᤥ 从 શऊା᧧ ྉ શᑕᡷᔽᆍႿᑕ 绿色ྉ 图 ɯᤥ 中柱鞘纤维呈短棱形ᖔ 细胞直径
ऊᔀႿᡷᔀʢ ᆍʢ ାᔽᆍᡷᔀዹၤႿᆍᆍ੫ᢃ ᧧ႿᆍʢቝᑕᡷᔽᆍႿ ɯ数据库下载包 ϟँԡ ጲ ࿗Ꭾԡ ဂቝᖔ细胞壁较薄ᖔ厚度仅为 ԡ ጲ Ꭾ ԡ
含完整的 ᧧ఋ୩ϟ ྉ ᔽႿᡷᔀʢႿᑕ ᡷʢᑕႿ༁ዹʢᔽᤦᔀʛ ༁ᡱᑕዹᔀʢ ϟ ɯ 和 ဂቝᤥ 木栓 细胞棱角明显ᖔ呈浅黄色ᖔ 数目较多ᤥ
᧧ఋ୩ྉ ᔽႿᡷᔀʢႿᑕ ᡷʢᑕႿ༁ዹʢᔽᤦᔀʛ ༁ᡱᑕዹᔀʢ ɯ 的忍冬属物种 木纤维呈粗短的棱形ᖔ偶见有弯曲ᖔ成束或散在分
᧧ఋ୩ 序列ᖔ采用 ᥘጶ᥈ዶ ᣮ 软件对测得序列与 શऊା᧧ 布ᖔ细胞直径 ጢԡ ጲ ጢԡ ဂቝᖔ细胞壁厚 ԡ ጲ ϟ࿗ԡ
上登录的忍冬属物种 ᧧ఋ୩ 序列采用非加权组平均 ဂቝᖔ细胞壁纹孔明显ᖔ呈斜裂状ᤥ 木化薄壁细胞
法 ྉ ࣼႿऔᔀᔽ੫ၤᡷᔀʛ ᡱᑕᔽʢ᥋੫ʢᆍࣼᡱ ቝᔀᡷၤᆍʛ औᔽᡷၤ ᑕʢᔽᡷၤቝᔀᡷᔽዹ 淀粉粒复粒较多ᤥ 具缘纹孔及网纹导管较多ᖔ直
ቝᔀᑕႿ༁ᖔ В۪᥈ᥘዶɯ构建系统进化树ᤥ 径约 ጢԡ ጲ ጢԡԡ ဂቝᤥ 含晶细胞壁木质化增厚较为
明显ᖔ细胞腔内草酸钙方晶较多ᤥ 树脂道散布有
জ 结果与分析 黄棕色分泌物ᖔ半透明状ᤥ
ԣॹ 薄层色谱鉴别
ԣॹϓ 性状鉴别 将黄褐毛忍冬ܦ华南忍冬ܦ金银花和灰毡毛忍
黄褐毛忍冬为多年生攀援植物ᖔ茎和分枝上 冬的花提取物与三柰酚点于同一薄层 ᥈ 板上ᖔ置
有黄褐色柔毛ᖔ幼枝上偶见有橘红色腺毛ᖔ幼芽鳞 ሕᤃጢ Ⴟቝ 紫外灯下检视ᤥ 由图 ሕ 可知ᖔ 三柰酚与忍
