Page 24 - 《广西植物》2022年第5期

Ꭾ ࿗ ऐ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗԰ 卷
表 ϓই ቴ௴᤬फۗࣷቴ 引物 ྉ԰ጢԡ ቝቝ ġ ࿗঎ᤃԡ ቝቝɯᤥ 流动相为乙腈ͱԡ঎԰ᠮ甲酸
ఋᑕᤦ᤟ᔀ ϟজ ኏ఋ᥋ी۪ऊ኏ ᡱʢᔽቝᔀʢ 水溶液ྉᤃጢᠮ ᨒ ሕጢᠮɯᖔ等度洗脱ᖔ流速 ԡ঎ ऐ ဂ੫ኼ
᥋ϟ
ቝᔽႿ ᖔ柱温 ሕԡ ቩ ᖔ检测波长 ሕϟԡ Ⴟቝᖔ进样体积 ϟԡ
基因名称 实时定量 ۪ऊ኏ 引物 ྉጢࣕ᥋ሕࣕɯ
ဂᓂᤥ 运行时间 ϟጢ ቝᔽႿᖔ色谱图见图 ࿗ᤥ 线性关系考
᥈ᔀႿᔀ Ⴟᑕቝᔀ ኏ఋ᥋ी۪ऊ኏ ᡱʢᔽቝᔀʢ ྉጢࣕ᥋ሕࣕɯ
̵᤹ᤩቴ è᧥ ఋ᥈ఋऊఋऊఋ᥈ዶఋ᥈ఋऊ᥈᥈ऊऊዶఋዶ 察᧥按照色谱条件ᖔ精密吸取不同浓度广藿香酮标
኏᧥ ఋऊዶዶఋ᥈᥈ऊ᥈᥈ዶఋऊఋऊఋऊఋऊఋ 准品溶液 ϟԡ ဂᓂᖔ注入 ۪̀ᓂऊ 色谱仪ᖔ检测峰面积ᖔ
᤹ᦵᦵ è᧥ ᥈ዶ᥈ఋऊऊዶऊऊఋऊऊዶ᥈ዶዶዶऊऊዶ 以进样浓度为横坐标ᖔ峰面积为纵坐标ᖔ进行线性
԰
኏᧥ ᥈᥈᥈ఋఋ᥈ዶఋ᥈ዶ᥈ఋ᥈ዶऊऊ᥈ዶऊఋ 回归ྉ图 ጢɯᖔ回归方程为 ɔ ᢉ ϟऐ঎ሕጢᣏ ͱ ࿗Ꭾ঎ϟँᖔቴ ᢉ
᤹ᣞ è᧥ ዶఋ᥈ዶ᥈᥈ఋऊ᥈ऊఋఋऊऊዶఋऊዶఋऊ ԡ঎ँँँ ँᖔ线性范围为 ᤃ঎԰ጢ ጲ ԰ԡԡ ဂ੫ኼቝᓂ ᤥ 稳定性
᥋ϟ
኏᧥ ఋఋఋऊ᥈ዶఋఋ᥈ఋዶ᥈ऊዶఋ᥈᥈ऊఋ᥈ 试验᧥取配制好的供试品溶液任一种ᖔ制备后在不
同时间对样品按色谱条件进样分析ᖔ共分析 ᤃ 次
瑞芬思生物科技有限公司ɯଫ广藿香醇对照品ྉ 批 ྉ制备后 ԰ܦ࿗ܦᤃܦऐܦϟ԰ܦ԰࿗ ၤɯᖔ测定广藿香酮峰面
号᧥ା᥋ԡሕᎮ᥋ϟऐԡϟ԰԰ᖔ 成都瑞芬思生物科技 有 限 公 积ᖔ 结 果 表 明相对标准偏差 ྉ ʢᔀ᤟ᑕᡷᔽ׹ᔀ ༁ᡷᑕႿʛᑕʢʛ
司ɯଫ正十八烷ྉ୩᧧᥈ᥘዶ 公司ɯଫ乙腈色谱纯ྉ 德国 ʛᔀ׹ᔽᑕᡷᔽᆍႿᖔ኏୩᧕ɯ为 ϟ঎ԡጢᠮᖔ表明供试品溶液在 ԰࿗ ၤ
默克公司ɯଫ甲酸ྉ 德国默克公司ɯଫ无水乙醇ܦ乙 内是稳定的ᤥ 精密度实验᧥取 ጢԡ ဂ੫ኼቝᓂ 对照品
᥋ϟ
醚ܦ甲醇ܦ无水硫酸钠等试剂均为分析纯ᤥ 溶液ᖔ按色谱条件测定ᖔ连续进样 ᤃ 次ᖔ测定峰面
ϓॹ྽ 仪器设备 积ᖔ广藿香酮峰面积的 ኏୩᧕ 为 ԡ঎ᤃሕᠮᖔ表明高效液
ዶ੫ᔽ᤟ᔀႿ੫ϟ԰ԡԡ 高效液相色谱仪ྉ 包括四元梯度 相色谱这套仪器的精密度良好ᖔ实验数据可信ᤥ
泵ܦ自动进样器ܦ۪᧕ዶ 检测器ܦ在线脱气机ᖔ美国安 重复性试验᧥取同一批广藿香油 ᤃ 份ᖔ每份 ԡ঎ϟጢ ੫ᖔ
捷伦公司ɯଫዶ੫ᔽ᤟ᔀႿᡷᎮऐँ԰ዶ ᣰ ጢँᎮጢऊ 型气相色谱 ͱ质 精密称定ᖔ按照步骤 ԰ 方法配制后ᖔ按色谱条件测
谱联用仪ྉ美国安捷伦公司ɯଫ色谱柱为 ۪̀᥋ጢ 石英 定ᤥ 结果ᖔ 样品中广藿香酮峰面积的 ኏୩᧕ 为
毛细管柱ྉԡ঎԰ጢ ဂቝ ġ ሕԡ঎ԡ ቝ ġ ԰ጢԡ ဂቝɯଫାఋ ϟ԰ጢ᧕ ԡ঎ऐᤃᠮᖔ表明该方法的重复性良好ᤥ 数据分析方
十万分之一分析天平ྉ 德国赛多利斯ɯଫ超纯水为 法᧥挥发油含量分析均使用 ᓂ୩᧕ 法进行多重比较ଫ
ቝᔽ᤟᤟ᔽ᥋͐ 超纯水机制备ྉ 美国 ᥘᔽ᤟᤟ᔽᡱᆍʢᔀ 公司ɯଫ挥发 ኏ሕ঎ᤃ 软件以及 ᑕ੫ʢᔽዹᆍ᤟ᑕᔀ 包进行统计分析ᤥ
油提取器ଫ水分测定仪ᤥ
ϓॹጇ 广藿香化学成分的分析 ԰জ 结果与分析
ϟ঎ጢ঎ϟ 挥发油的提取জ 采集石牌广藿香与高要广
藿香成熟茎ܦ老茎ܦ成熟叶ܦ老叶ྉ 石牌广藿香与高 ԣॹϓ 酮型广藿香萜类代谢 ᤹Ⴌዛ 途径中 ̵ᤩ᤹ቴܓ
要广藿香的嫩茎及嫩叶挥发油含量太低ᖔ无法提 ᤹ᣞܓ᤹ᦵᦵ 基因在茎叶不同时期的表达
取ᖔ本研究不进行这两个时期的数据测定ɯᤥ 样品 为了比较石牌广藿香和高要广藿香次生代谢

放至通风处室温阴干ᖔ切成 ϟጲ԰ ዹቝ 的小段ᖔ备用ᤥ 相关基因的时空表达模式ᖔ本研究对 ᥘ჆ዶ 途径中
取干燥的广藿香药材 ԰ԡԡ ੫ᖔ置于 ጢԡԡԡ ቝᓂ 圆底烧 三个关键酶基因ྉ̵ᤩ᤹ቴܦ᤹ᣞܦ᤹ᦵᦵɯ在叶片和茎中
瓶中ᖔ加 ሕ ԡԡԡ ቝᓂ 蒸馏水浸泡 ϟၤ 后开始提取ᤥ 的表达量进行了检测ྉ 图 ᤃɯᤥ 结果表明᧥在石牌
提取方法见β中国药典ଭྉ 国家药典委员会ᖔ԰ԡ԰ԡɯ 广藿香叶片生长发育过程中ᖔ ̵ᤩ᤹ቴܦ᤹ᦵᦵܦ᤹ᣞ 表
通则 ԰԰ԡ࿗ 项规定方法ྉ甲法ɯᤥ 达下降ᖔ但当叶片衰老后ᖔ表达则又增高ଫ茎发育
ϟ঎ጢ঎԰ 广藿香醇含量测定জ 对照品溶液及供试品溶 过程中ᖔ̵᤹ᤩቴܦ᤹ᦵᦵܦ᤹ᣞ 表达均呈增高趋势ᖔ在
液的制备᧥均按文献ྉ陈瑜珍等ᖔ԰ԡ԰ԡɯ的方法进行ᤥ 老茎中表达最高ᤥ 在高要广藿香中ᖔ发现了相似
气相色谱条件᧥初始温度 ϟऐԡ ቩᖔ停留 ԰ቝᔽႿᖔ以每 的基因表达模式ଫ唯有 ̵ᤩ᤹ቴ 在叶中表达趋势与
ጢቩ的速率升温至 ԰ሕԡ ቩଫ进样口温度 ԰ऐԡ ቩᖔ辅助 石牌广藿香不同ᖔ其在成熟叶片中高表达ᖔ幼叶次
温度 ԰ऐԡ ቩᖔ分流进样ᖔ分流比为 ϟԡ ᨒ ϟᤥ 离子源温度 之ᖔ老叶最低ྉ图 ᤃɯᤥ
为 ԰ሕԡ ቩᖔ四级杆温度 ϟጢԡ ቩᖔ全扫描方式ᖔશ᧧୩ఋϟ࿗঎ϟ ԣॹԣ 广藿香醇和广藿香酮的含量与相关基因表达
质谱库挥发油中广藿香醇 ᥈ऊ᥋ᥘ୩ 分析ྉ图 ሕɯᤥ 的关系
ϟ঎ጢ঎ሕ 广藿香酮含量测定জ 对照品溶液ܦ供试品溶 为了进一步确定广藿香在药材商品中最佳的
液制备᧥均按文献ྉ 陈瑜珍等ᖔ԰ԡ԰ԡɯ 的方法进行ᤥ 药用部位ᖔ本研究测定了酮型广藿香在成熟茎ܦ老
色谱条件জ 色谱柱᧥۪ၤᔀႿᆍቝᔀႿᔀ଴ᖔ᥈ᔀቝᔽႿᔽ ጢ ဂ ऊϟऐ 茎ܦ成熟叶ܦ 老叶四个部位的广藿香醇和广藿香酮