Page 20 - 《广西植物》2022年第9期
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ϟ ࿗ ጢ ᤃ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
Ꭾԡᠮ乙醇中ᖔ用 Ꭾԡ ቩ 水浴溶解 ᖔ混匀后冷却至室 差分析ᖔ两两组间差异采用 ୩શ᥋ी 检验分析ᖔۗ ጐ
温ᖔ待用ᤥ ԡԡጢ 表示差异具有统计学意义ᤥ
ϓॹᇺ 细胞培养
小鼠巨噬细胞 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 购自上海生命科学 জ 结果与分析
研究院细胞资源中心ᖔ细胞接种于含 ϟԡᠮ胎牛血
清的 ᧕ᥘጶᥘྉ 购自 ᥈ᔽᤦዹᆍ 公司ɯ 完全培养基中ᖔ置 ԣॹϓ ᒦۗ 和 ۗዛ 诱导小鼠巨噬细胞 ቴዛ۩ ԣᣤॹ᎒ 后
于 ሕᎮ ቩ ܦጢᠮ ऊᨃ 的饱和湿度培养箱中培养ᤥ 细胞内炎症因子 ௴ટÞሂ ቂቴટዛ 表达水平的变化
ϓॹ फቴ௴ۗࣷቴ 检测加药后细胞内炎症因子 ௴ટÞሂ 本研究的实验部分可以分为 ࿗ 个组ᖔ即未处理
ቂቴટዛ 表达水平的变化 组ྉશऊɯܦ۪ዶ 单独诱导组ܦᓂ۪୩ 单独诱导组以及 ۪ዶ
收集各组加药后 ࿗ ၤ 生长状态良好的 ዶۼ 和 ᓂ۪୩ 联合诱导组ᤥ 经上述处理后ᖔ分别于 ԡܦϟܦ
ᤃ࿗Ꭾ 细胞ᖔ采用 ఋʢᔽझᆍ 法提取细胞中总 શዶᖔ用反 ሕܦᤃܦϟܦ࿗ ၤ 六个不同时间点收集细胞ᖔ并采用
转录 试 剂 盒 合 成 ዹ᧕શዶᖔ 以 ዹ᧕શዶ 为模板ᖔ 采用 ीఋ᥋۪ऊ 检测细胞内炎症因子 ఋશè᥋ም ቝશዶ 表达
୩ɟା ᥈ʢᔀᔀႿ ᥈ᔀႿᔀ ጶᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ዶ༁༁ᑕᢃ 试剂盒分别检测 水平的变化ᤥ 由图 ϟ 可知ᖔϟ Ⴟ੫ኼဂᓂ 的 ᓂ۪୩ 诱导
᥋ϟ
转染后各组细胞中 ఋશè᥋ም 和内参 ᥈ዶ۪᧕̀ ቝશዶ 的 产生的细胞内炎症因子 ఋશè᥋ም ቝશዶ 表达水平在
表达ᤥ 本研究采用 ࿗ԡ 个循环ᖔ扩增程序᧥ँ࿗ ቩ 预变 ϟܦሕܦᤃܦϟ ၤ 时间点均显著高于未处理组ྉશऊɯ 的ᖔ
性 ጢቝᔽႿᖔँ࿗ቩ变性 ሕԡ ༁ᖔᤃԡ ቩ退火 ϟԡ ༁ᖔᎮ ቩ 延伸 差异具有统计学意义ྉ ۗጐԡԡጢɯଫϟԡԡ ဂቝᆍኼᓂ 的
᥋ϟ
ሕԡ ༁ ᤥ 扩增结束后统计各组 ऊఋ 值ᖔ采用相对定量 ۪ዶ 诱导产生的炎症因子 ఋશè᥋ም ቝશዶ 表达水平
ͱσσऊఋ 在 ϟܦሕܦᤃܦϟܦ࿗ ၤ 时间点均与未处理组ྉશऊɯ无显
计算各组 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 细胞内炎症因子 ఋશè᥋ም
ቝશዶ 相对表达水平ᤥఋશè᥋ም 引物序列为 è᧥ ጢࣕ᥋ 著差异ྉۗᢦԡԡጢɯଫ经 ᓂ۪୩ 和 ۪ዶ 联合诱导后的细
ऊఋఋ ऊዶ᥈ ᥈᥈ዶ ఋዶఋ ᥈ఋ᥈ ዶఋ᥈ ᥈ዶऊ ఋऊ᥋ሕࣕᖔ᧥ ጢࣕ᥋᥈᥈ዶ 胞内炎症因子 ఋશè᥋ም ቝશዶ 表达水平在 ϟܦᤃܦ࿗ ၤ
᥈ዶऊ ऊఋऊ ఋ᥈᥈ ᥈᥈ዶ ᥈ዶఋ ᥈ఋ᥋ሕࣕଫ᥈ዶ۪᧕̀ 的引物序列 时间点均显著高于 ᓂ۪୩ܦ۪ዶ 的单独诱导组ᖔ差异具
为 è᧥ ጢࣕ᥋᥈᥈ఋ᥈ऊఋ᥈ዶ᥈ఋዶఋ᥈ఋऊ᥈ఋ᥈᥋ሕࣕᖔ᧥ ጢࣕ᥋ఋఋऊዶ᥈ऊ 有统计学意义ྉۗጐԡԡጢɯᖔ且在 ࿗ ၤ 时间点差异最
᥋ϟ ᥋ϟ
ఋऊఋ᥈᥈᥈ዶఋ᥈ዶऊऊ᥋ሕࣕᤥ 显著ᖔ这说明 ϟႿ੫ኼဂᓂ 的 ᓂ۪୩ 和 ϟԡԡ ဂቝᆍኼᓂ
ϓॹጇ 统计学分析 的 ۪ዶ 联合诱导 ዶۼ ᤃ࿗Ꭾ 细胞在 ࿗ ၤ 时间点产
实验数据用 ଝ ō 表示ᖔ利用 ୩۪୩୩ ϟԡ 软件 生的协同作用最佳ᤥ 因此ᖔ我们将 ࿗ ၤ 作为 ᓂ۪୩
进行数据处理和分析ᖔ多组间差异采用单因素方 和 ۪ዶ 联合处理的最佳诱导时间ᤥ
图 ϟজ ᓂ۪୩ 和 ۪ዶ 诱导小鼠巨噬细胞后各组细胞中炎症因子 ఋશè᥋ም ቝશዶ 表达水平随时间的变化情况
èᔽ੫ ϟজ ऊၤᑕႿ੫ᔀ༁ ᆍ ᔽႿᑕቝቝᑕᡷᆍʢᢃ ᑕዹᡷᆍʢ ఋશè᥋ም ቝશዶ ᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᔀᔀ༁ औᔽᡷၤ ᡷᔽቝᔀ
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