Page 25 - 《广西植物》2022年第9期
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ँ 期 梁森林等᧥ᡱ̀ 区带精制逆流色谱法分离制备越南槐中具有抑制 ሂͱ糖苷酶活性的生物碱 ϟ ࿗ ᤃ ϟ
物ܦ总生物碱及分离得到的两个生物碱的 ሂͱ葡萄 越南 槐 ྉ ᅳᡓ၊ᅳʗᐹ ᡙᅳႥҧᔠႥᓣႥᔠɯ 的 地 上部分于
糖苷酶抑制活性ᤥ ԡϟऐ 年 ϟϟ 月采自广西百色市那坡县ᖔ由广西大学
黄荣韶教授鉴定ᖔ标本ྉ编号᧥ԡϟऐϟϟԡሕɯ 保存于广
西植物功能物质与资源持续利用重点实验室ᤥ
জ 实验方法
ԣॹϓ 越南槐的地上部分总生物碱的制备
取越南槐的地上部分干燥的茎叶 ϟҴ੫ᖔ粉碎后
用 ँጢᠮ乙醇浸泡一周ᖔ将滤液浓缩旋干得浸膏ᖔ取
部分浸膏用 ̀ऊ 调 ᡱ̀ 至 ሕᖔ离心后将上清液减压
旋干后用适量水溶解过 ዶାͱऐ 大孔树脂柱ᖔ顺次加
入水ᖔԡᠮ氨水ᖔᎮԡᠮ甲醇ͱ水进行洗脱ᖔ收集 Ꭾԡᠮ
甲醇ͱ水洗脱馏分ᖔ旋干即得到总生物碱ᤥ
ԣॹԣ 样品溶剂系统及样品溶液的制备
图 ϟজ 苦参碱和氧化苦参碱的化学结构式
ϟ 样品溶剂系统的制备জ 选取二氯甲烷 ͱ甲
èᔽ੫ ϟজ ऊၤᔀቝᔽዹᑕ ༁ᡷʢࣼዹᡷࣼʢᔀ༁ ᆍ ቝᑕᡷʢᔽႿᔀ ᑕႿʛ ᆍᢃቝᑕᡷʢᔽႿᔀ
醇ͱ水ྉጢ ᨒ ሕ ᨒ ᖔႬᣑ Ⴌɯ 为溶剂系统进行试验ᖔ量取
ϟ ԡԡԡ ቝᓂ 二氯甲烷ܦᤃԡԡ ቝᓂ 甲醇ܦ࿗ԡԡ ቝᓂ 水置于
ϟজ 仪器与材料 分液漏斗中ᖔ剧烈震荡后静置半小时ᖔ取出下相和
᥋ϟ
上相ᖔ在上相中加入 ̀ऊ ྉ ϟԡ ቝቝᆍኼ ᓂ ɯ ԡ ሕ࿗࿗
ఋାጶ᥋ሕԡԡऊ 高速逆流色谱仪ྉ 上海同田生物技 ቝᓂ 作为固定相ᖔ在下相中加入 ఋጶዶ ྉϟԡ ቝቝᆍኼ
术股份有限公司ɯܦఋା۪ጢԡԡ ఋዶВఋᨃ 恒流泵ྉ 上海 ᓂ ɯ ԡ ࿗࿗࿗ ቝᓂ 作为流动 相ᖔ超声脱气 ሕԡ ቝᔽႿ 后
᥋ϟ
同田生物技术股份有限公司ɯܦВϟԡԡ 紫外检测器
备用ᤥ
ྉ赛谱锐思科技有限公司ɯܦ᥈ᔀႿᔀᑕዹ ቝᔽᑕዹ 真空离 样品溶液的制备জ 取 ϟ ੫ 总生物碱放于试
心浓缩仪ྉ英国 ᥈ᔀႿᔀᑕዹ 公司ɯܦఋऊͱϟԡጢԡ 恒温循 管中ᖔ加入 Ꭾጢ ቝᓂ 含有 ̀ऊ 的上相和 Ꭾጢ ቝᓂ 未添
环器ྉ 上海同田生物技术股份有限公司ɯܦऊାᥘ ͱ 加 ఋጶዶ 的下相ᖔ超声震荡使其充分溶解ᖔ准备用于
ԡዶ 系统控制器ྉ 日本岛津公司ɯܦ᧕᥈Вͱԡዶጢ 脱 ᡱ̀ 区带逆流色谱分离ᤥ
气机ྉ日本岛津公司ɯܦᓂऊͱԡዶఋ 高效液相色谱仪 ԣॹᇺ 分离及鉴定
ྉ日本岛津公司ɯܦାʢࣼዹҴᔀʢ ዶᑕႿዹᔀ ቹ ̀᧕᥋ጢԡԡ ᥘ̀झ ሕϟ ᡱ̀ 区带逆流色谱分离过程জ 将超声脱气过
᥋ϟ
超导核磁共振波谱仪ྉ 瑞士ᖔାʢࣼዹҴᔀʢ 公司ɯܦ୩۪᧕᥋ 的上相以 ԡ ቝᓂኼቝᔽႿ 的速度泵入高速逆流主机
ᥘԡዶ 光电二极管阵列检测器ྉ 日本岛津公司ɯܦ 中作为固定相使用ᖔϟጢ ቝᔽႿ 后观察到出口有液体
ᣮ୩ԡጢ ᧕ࣼᑕᑕႿ੫ᔀྉ 瑞士苏黎世的梅特勒 ͱ托利多 流出ᖔ说明固定相已完全充满螺旋管ᤥ 样品溶液
集团ɯ 分析天平ܦ ାВጶ ̀ऊఋ 电喷雾质谱 ྉ 美 用等量的已加入酸的上相和未加入碱的下相溶
国ᖔ布鲁克道尔顿公司ɯ 和 ᥘዶఋ ँጢᣮ۪ 高分辨质谱 解ᖔ在 ᆍᑕʛ 模式中将样品溶液注入进样环ᖔ旋转进
ྉ美国ᖔఋၤᔀʢቝᆍɯܦዶ᧕۪࿗࿗ԡ շ 旋光计ྉ 德国ᖔ优莱博 样口旋钮至 ᔽႿᢼᔀዹᡷ 档位ᖔ将主机旋转方向调为顺时
有限公司ɯܦᨃ୩ା ͱ ϟԡԡ 油浴锅ྉ 上海爱朗仪器有 针后ᖔ慢慢调节主机转速至 ऐጢԡ ʢኼቝᔽႿ ᖔ待转速稳
᥋ϟ
限公司ɯܦ୩۪ ͱᥘዶᣮሕጢԡԡèᓂ 多功能荧光酶标仪ྉ 上 定后ᖔ以 ቝᓂኼቝᔽႿ 的速度泵入流动相ᖔ同时开启
᥋ϟ
海闪谱生物科技有限公司ɯᤥ 紫外检测器及记录仪ᖔ设置紫外检测波长为 ϟԡ
阿卡波糖ܦሂͱ葡萄糖苷酶ܦ对硝基苯酚ͱሂͱ᧕ͱ Ⴟቝᖔ通过观察色谱图的出峰情况手动收集馏分ᖔ分
吡喃葡萄糖苷均购自上海源叶生物科技有限公司ଫ 离完成后ᖔ将主机内液体用压缩空气吹出ᖔ使用
ԡġ۪ା୩ྉ北京索莱宝科技有限公司ɯଫ无水碳酸钠ܦ ጢԡԡ ቝᓂ 量筒收集并计算固定相保留率ᤥ
乙腈ܦ二氯甲烷ܦ甲醇ྉ西陇化工股份有限公司ᖔ分 ሕ ۪̀ᓂऊ 分析জ 用 ۪̀ᓂऊ 分析越南槐地上部分
析纯ɯଫ۪̀ᓂऊ 分析用水为实验室自制超纯水ᤥ 生物碱粗提物和分离后的各组分ᤥ 液相色谱柱为
