Page 73 - 《广西植物》2022年第9期
P. 73
ँ 期 李渔等᧥ 云南三种特色柑橘属果皮精油成分及活性研究 ϟ ጢ ԡ ँ
ϓॹԣ 方法 ጢ 软件计算半数抑制浓度ྉ᧧ऊ ɯᤥ 半数抑制浓度
ጢԡ
ϟϟ 精油提取জ 将所购曼赛龙柚ܦ绿皮冰糖橙和 ྉ᧧ऊ ɯ 是衡量药物抑制肿瘤增殖能力的标准之一
ጢԡ
青柠各取果皮 ϟ ԡԡԡ ੫ᖔ用水洗净ܦ晾干ᖔ分 次置 ྉ刘梦瑶等ᖔԡϟँɯᤥ
于圆底烧瓶中ᖔ加超纯水 ϟ ԡԡԡ ቝᓂᖔ连接挥发油测
定器和球形冷凝管ᖔ保持水沸腾稳定产生蒸汽ᖔ连 জ 结果与分析
续提取 ँၤᤥ 加热停止后ᖔ收集精油ᖔ以 ϟԡ ቝᓂ 乙
醚冲洗精油ᖔ并将提取液转移到分液漏斗中ᖔ充分 ԣॹϓ 三种云南特色柑橘属果皮精油产率对比
摇匀后静置分层ᖔ收集乙醚层ᖔ加入无水 શᑕ ୩ᨃ 干 德宏青柠的果皮精油出油率最高ᖔ为 ԡᎮᠮଫ
࿗
燥ᖔ低温回收乙醚得到淡黄色透明液态精油ᖔ用以 元江绿皮冰糖橙的次之ᖔ为 ԡጢँᠮଫ西双版纳曼赛
气相色谱ͱ质谱分析ᤥ 龙柚的最低ᖔ为 ԡጢϟᠮᤥ
ϟ ᥈ऊ᥋ᥘ୩ 联用仪分析জ 气相色谱工作条件᧥毛 ԣॹԣ 三种云南特色柑橘属果皮精油组分分析
细管柱 ᧕ା᥋ጢᥘ୩ ྉሕԡ ቝġԡጢ ቝቝġԡጢ ဂቝɯଫ进样口 根据气相色谱ͱ质谱联用分析仪ᖔ获得三种精
温度为 ጢԡ ቩଫ载气为高纯氦ྉ纯度ᤠँँँँँᠮɯᖔ流 油样品的总离子流色谱ྉ 图 ϟᖔ图 ᖔ图 ሕɯᖔ将其与
速为 ϟԡ ቝᓂኼቝᔽႿ ଫ进样方式为分流进样ᖔ进样量 计算机质谱库匹配ᖔ进行人工解析后确定精油样
᥋ϟ
为 ϟဂᓂᖔ分流比为 ሕԡ ᨒ ϟᤥ 程序升温条件᧥首先ᖔ初 品化学组分的名称ᖔ并采用峰面积归一法计算出
᥋ϟ
始温度 ጢԡ ቩᖔ保持 ጢቝᔽႿଫ然后ᖔ ቩ ኼቝᔽႿ 升至 ऐԡ 各组分含量ྉ赵文红等ᖔԡԡᎮɯྉ表 ϟᖔ表 ᖔ表 ሕɯᤥ
᥋ϟ ԣॹᇺ 西双版纳曼赛龙柚果皮精油抑瘤活性测定
ቩᖔሕ ቩ ኼቝᔽႿ 升至 ሕԡ ቩᖔ保持 ϟᤃ ቝᔽႿଫ最后ᖔϟ
᥋ϟ 不同浓度的西双版纳曼赛龙柚果皮精油对胃
ቩኼቝᔽႿ 升至 ጢԡ ቩᖔ保持 ԡ ቝᔽႿᤥ
质谱工作条件᧥电离方式为 ጶ᧧ ଫ离子化电压 癌细胞ྉᥘશ᥋࿗ጢɯܦ人乳腺癌细胞ྉᥘऊè᥋Ꭾɯ 和结直
շ
为 Ꭾԡ ᔀଫ扫描范围为 ሕጢ ጲ ࿗ጢԡ ᑕቝࣼଫ离子源温度为 肠癌细胞ྉ̀ऊఋ᥋ϟϟᤃɯ 的增殖有不同程度的抑制作
ሕԡ ቩ ଫ传输线温度为 ᤃԡ ቩ ଫ在 ۼ᧧ᓂጶɟܦશ᧧୩ఋԡऐ 用ᖔ并 呈 剂量依赖关系 ྉ 图 ࿗ɯᖔ 半数抑制浓度
᥋ϟ
谱库进行谱图检索ᤥ ྉ᧧ऊ ɯ分别为 ࿗࿗ϟ࿗ܦጢ࿗ ᤃँܦሕँ ϟԡ ဂ੫ኼቝᓂ ᤥ
ጢԡ
ϟሕ 抗瘤活性测定 ԣॹ 元江绿皮冰糖橙皮精油抑瘤活性测定
ϟሕϟ 细胞培养与培养基জ 人乳腺癌细胞ྉᥘऊè᥋ 不同浓度的元江绿皮冰糖橙皮精油对胃癌细
Ꭾɯܦ结直肠癌细胞ྉ̀ऊఋ᥋ϟϟᤃɯܦ胃癌细胞ྉᥘશ᥋࿗ጢɯ 胞ྉᥘશ᥋࿗ጢɯܦ人乳腺癌细胞ྉᥘऊè᥋Ꭾɯ 和结直肠癌
ሕ 株细胞购自中国科学院上海细胞库ᤥ ϟᤃ࿗ԡ 培养 细胞ྉ̀ऊఋ᥋ϟϟᤃɯ 的增殖有不同程度的抑制作用ᖔ
基ܦᥘዹऊᆍᢃጢዶ 培养基ܦ胰蛋白酶ܦ胎牛血清ྉèା୩ɯ 均 并呈剂量依赖关系ྉ图 ጢɯᖔ半数抑制浓度ྉ᧧ऊ ɯ 分
ጢԡ
购自 ᥈᧧ାऊᨃ 有限公司ᖔ噻唑蓝ྉᥘఋఋɯ 购自炎熙生 别为 ᎮᎮᤃܦᤃᎮ Ꭾԡܦᤃऐ ጢ ဂ੫ኼቝᓂ ᤥ
᥋ϟ
物ᖔ二甲基亚砜ྉ᧕ᥘ୩ᨃɯ购自索莱宝公司ᤥ ԣॹጇ 德宏青柠果皮精油抑瘤活性测定
ϟሕ 用 ᥘఋఋ 法检测三种精油抗肿瘤活性জ 取对 不同浓度的德宏青柠果皮精油对胃癌细胞
数生长期细胞用胰蛋白酶消化后ᖔ用细胞完全培养 ྉᥘશ᥋࿗ጢɯܦ人乳腺癌细胞ྉᥘऊè᥋Ꭾɯ 和结直肠癌细
液每 ϟቝᓂ 稀释至 ϟġϟԡ 个ᖔ接种于 ँᤃ 孔细胞培养 胞ྉ̀ऊఋ᥋ϟϟᤃɯ 的增殖有不同程度的抑制作用ᖔ并
ጢ
板上ᖔ每孔 ँԡ ဂᓂᤥ 在 ሕᎮ ቩܦጢᠮ ऊᨃ 培养箱中培养 呈剂量依赖关系ྉ图 ᤃɯᖔ半数抑制浓度ྉ᧧ऊ ɯ 分别
ጢԡ
࿗ ၤᖔ待细胞贴壁后ᖔ实验组按倍半稀释法设置 ጢ 个 为 ऐᎮँԡܦᤃँሕँܦᤃጢ Ꭾ࿗ ဂ੫ኼቝᓂ ᤥ
᥋ϟ
不同浓度精油ྉϟጢܦሕԡܦᤃԡܦϟԡܦԡԡ ဂ੫ኼቝᓂ ɯᖔ每孔
᥋ϟ
加入 ϟԡ ဂᓂ 的精油ᖔ同时设置阴性对照组和正常对 ሕজ 讨论与结论
照组ᖔ每组 ጢ 个复孔ᤥ 培养箱中继续培养 ࿗ऐ ၤᖔ每
᥋ϟ 从通过 ᥈ऊ᥋ᥘ୩ 开展定性定量成分分析可以看
孔加入 ᥘఋఋྉጢ ቝ੫ኼቝᓂ ɯ 溶液 ϟԡ ဂᓂᖔ继续培养 ࿗
ၤᖔ弃去上清液ᖔ每孔加入 ᧕ᥘ୩ᨃ ϟԡԡ ቝᓂ ᧕ᥘ୩ᨃ 使结 出ᖔ西双版纳曼赛龙柚果皮精油中含有 ࿗ 种含量
晶充分溶解ᖔ用酶标仪测定在 ጢᎮԡܦᤃሕԡ Ⴟቝ 双波长下 在 ԡԡϟᠮ以上的化学成分ᖔ其中化合物种类含量
各孔的吸光度ྉዛɯ 值ᖔ计算各药物浓度对肿瘤细胞 高低排序为酯ᢦ烯烃ᢦ醛ᢦྉ环ɯ 烷烃ᢦ醇ᢦ酚ܦ萘ଫ元
生长抑制率ᤥ 肿瘤细胞生长抑制率ྉᠮɯ ᢉ ྉϟͱ实验 江绿皮冰糖橙皮精油中有 ϟϟ 种ᖔ其中化合物种类
组 ዛ 值ᣑ 阴性对照组 ዛ 值ɯġϟԡԡᤥ 用 ੫ʢᑕᡱၤᡱᑕʛ ᡱʢᔽ༁ቝ 含量高低排序为烯烃ᢦྉ环ɯ烷烃ᢦ醇ଫ 德宏青柠果
