Page 42 - 《广西植物》2023年第11期
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２ ０ ０ ２ 广 西 植 物 ４３ 卷
待其冷却后备用ꎮ 最为丰富ꎮ Ｐ３ 培养基和 ２２１６Ｅ 培养基分离得到
参考叶景静等(２０１８) 的方法ꎮ 使用甲醇溶解 的菌株数目最少ꎬ分别得到 １１ 种和 １４ 种菌ꎬ隶属
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细菌粗提物ꎬ最终配制成 ２０ ｍｇｍＬ 溶液ꎬ取 １５ 于 １０ 个属和 １２ 个属ꎬ优势菌属为链霉菌属ꎮ 与
μＬ 分多次滴加到直径 ６ ｍｍ 的无菌滤纸片中ꎮ 等 ２２１６Ｅ 培养基相比ꎬ具有相同种类成分的 ２２１６Ｅ /
体积甲醇、ＤＭＳＯ、空白 ＡＭ３ 培养基、空白 ＡＭ６ 培 １０ 培养基分离得到的菌株种类更为多样ꎬ共获得
养基的滤纸片作阴性对照ꎮ 以分别加入 ３ μＬ 甲 ３５ 种 菌ꎬ 隶 属 于 ２０ 个 属ꎮ 此 外ꎬ 壤 霉 菌 属
氧苄啶和环丙沙星的滤纸片作为阳性对照ꎮ ３７ ℃ ( Ａｇｒｏｍｙｃｅｓ )、 芽 孢 杆 菌 属、 链 霉 菌 属 和
恒温培养箱培养 ２４ 小时ꎬ观察抑菌结果ꎮ Ｒｏｓｓｅｌｌｏｍｏｒｅａ 在 ６ 种分离培养基中均有生长ꎮ 不
同培养基菌株分离情况如图 ２ 所示ꎮ
２ 结果与分析 ２.３ 细菌发酵产物的抑菌实验结果
９ 种菌株对至少一种致病菌有抑菌活性ꎬ其中
２.１ 可培养细菌多样性分析 ７ 种 分 离 自 Ｐ７ 培 养 基ꎮ 菌 株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
使用 ６ 种分离培养基从 ７ 份红树植物根际土 ｈｙｄｅｒａｂａｄｅｎｓｉｓ ＧＸＩＭＤ３０７７、 Ａｇｒｏｍｙｃｅｓ ｋａｎｄｅｌｉａｅ
壤样品中分离到 ２６６ 株可培养细菌ꎮ 根据菌株的 ＧＸＩＭＤ３２４９、 Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｕｎｄａｒｂａｎｓｅｎｓｉｓ
形态特征和生长情况进行排重ꎬ通过 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基 ＧＸＩＭＤ３２４２、 Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｕｔｅｕｍ ＧＸＩＭＤ３６８４、
因序列测序比对ꎬ鉴定获得 １２０ 种细菌ꎬ包括放线 Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｒｉｆａｍｙｃｉｎｉｃａ ＧＸＩＭＤ３６９９ 对 ３ 种人
菌门、厚壁菌门和变形菌门ꎬ隶属于 ３５ 科 ４７ 属ꎬ 体 致 病 菌 均 具 有 抑 制 活 性ꎮ Ｇｏｒｄｏｎｉａ ｄｉｄｅｍｎｉ
分离情况如表 ２ 所示ꎮ 红树植物根际土壤中放线 ＧＸＩＭＤ３８６１、 Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ ａｌｇａｅ ＧＸＩＭＤ３２４１ 对
菌资源丰富ꎬ分离得到 ４９ 种放线菌占分离菌株总 ＭＲＳＡ 和铜绿假单胞菌具有抑制活性ꎮ Ｎｏｃａｒｄｉａ
数的 ４０.８％ꎮ 链霉菌属 (Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ) 分离获得最 ａｒｔｈｒｉｔｉｄｉｓ ＧＸＩＭＤ３０８８、ＧＸＩＭＤ３２９７ 对铜绿假单胞
多ꎬ共 １７ 种ꎬ占细菌物种总数的 １４.２％ꎻ其次为芽 菌具有一定的抑制活性ꎮ 放线菌在抑菌活性研究
孢杆菌属( Ｂａｃｉｌｌｕｓ)ꎬ共获得 ９ 种ꎮ 分离得到 ５ 种 方面有较大潜力ꎬ通过筛选发现 ８ 种活性菌株为
潜在新菌ꎬ与有效发表菌株相比较最高相似度均 放线菌ꎬ２ 种来源于链霉菌属ꎬ其余 ６ 种菌株分别
低 于 ９７. ００％ꎬ 其 中 Ｍａｒｍｏｒｉｃｏｌａ ｓｉｌｖｅｓｔｒｉｓ 来自壤霉菌属、短杆菌属( Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ)、小单孢
ＧＸＩＭＤ２７９９、 Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｏｓｐｏｒａ ｃｈｉａｎｇｍａｉｅｎｓｉｓ 菌属(Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ)、戈登氏菌属( Ｇｏｒｄｏｎｉａ)、诺
ＧＸＩＭＤ３２９７、 Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ ｍａｎｇｒｏｖｉ ＧＸＩＭＤ２８０７、 卡 氏 菌 属 ( Ｎｏｃａｒｄｉａ ) 和 放 线 孢 菌 属
Ｆｕｌｖｉｍａｒｉｎａ ｍａｎｇａｎｏｘｙｄａｎｓ ＧＸＩＭＤ２７９４ 均来源于 (Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｏｓｐｏｒａ)ꎬ 其 中 ＧＸＩＭＤ３２９７ 为 潜 在 新
桐花树的根际土壤ꎬ详细物种信息如表 ３ 所示ꎮ 菌ꎬ对铜绿假单胞菌具有一定的抑菌活性ꎮ 同一
２.２ 不同样品和培养基的获得菌株种类分析 菌株不同发酵培养基其代谢产物抑菌活性检测结
经过富集培养处理后ꎬ不同样品获得可培养 果不同ꎬ部分菌株的抑菌活性只存在于其中一种
细菌多样性差异明显ꎬ样品 Ｂ( 黄槿根际土壤) 中 发 酵 培 养 基 的 代 谢 产 物ꎬ ９ 株 活 性 菌 株 中
分离得到的菌种数目最多(为 ４３ 种)ꎬ优势菌属为 ＧＸＩＭＤ３６９９ 和 ＧＸＩＭＤ３０６１ 在 ２ 种发酵培养基的
微杆菌属( Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ)ꎮ 其次是样品 Ｆ( 桐花 代谢产物均有抑菌活性ꎮ 抑菌活性实验结果如表
树根际土壤) 分离得到 ３５ 种细菌ꎬ链霉菌属最为 ４ 和图 ３ 所示ꎮ
丰富ꎮ 样品 Ｅ(桐花树根际土壤) 中分离得到的菌
种数 目 最 少ꎬ而 放 线 菌 占 比 最 高 ( ５７. ８９％)ꎮ 此 ３ 讨论
外ꎬ各样品中均能分离得到芽孢杆菌属和希瓦氏
菌属( Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ) 菌株ꎮ 不同样品菌株分离情况 茅尾海红树林海水盐度较低且红树植物种类
如图 １ 所示ꎮ 多样ꎬ 其 根 际 土 壤 微 生 物 群 落 复 杂ꎮ 据 ２０１５—
由于不同培养基存在营养成分差异ꎬ因此分 ２０２１ 年的文献报道ꎬ通过传统分离方法从茅尾海
离得到的细菌物种多样性差异显著ꎮ 就菌种多样 红树林土壤分离得到的潜在新菌( <９８.６５％) 比例
性而言ꎬＰ７ 培养基分离效果最好ꎬ获得 ６０ 种细菌ꎬ 为 ２.３４％ (张荣灿等ꎬ２０１５ꎻ吴家法等ꎬ２０１７ꎻ颜栋
隶属于 １８ 个属ꎬ其中 ５６.６７％为放线菌ꎬ链霉菌属 美等ꎬ２０１８ꎻ叶景静等ꎬ２０１８ꎻ石松标等ꎬ２０１８ꎻ郑红
