Page 140 - 《广西植物》2023年第7期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｌ. ２０２３ꎬ ４３(７): １３０８－１３１６
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２２０７０４６
骈永茹ꎬ 李婧怡ꎬ 李勤奋ꎬ 等ꎬ ２０２３. 巨大侧耳原生质体制备条件的优化 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ４３(７): １３０８－１３１６.
ＰＩＡＮ ＹＲꎬ ＬＩ ＪＹꎬ ＬＩ ＱＦꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３. Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｇｉｇａｎｔｅｕｓ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ
４３(７): １３０８－１３１６.
巨大侧耳原生质体制备条件的优化
骈永茹 ꎬ 李婧怡 ꎬ 李勤奋 ꎬ 王 欢 ꎬ 李 玉 ꎬ 杨 阳 １ꎬ３∗
４
１ꎬ２
１ꎬ３
５
１ꎬ３
( １. 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/ 农业农村部热带农业绿色低碳重点实验室ꎬ 海口 ５７１１０１ꎻ ２. 华中农业大学
植物科学技术学院应用真菌研究所ꎬ 武汉 ４３００７０ꎻ ３. 国家农业环境儋州观测实验站ꎬ 海南 儋州 ５７１７００ꎻ
４. 长春中医药大学ꎬ 长春 １３０１１７ꎻ ５. 吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心ꎬ 长春 １３０１１８ )
摘 要: 为优化巨大侧耳原生质体的制备条件ꎬ该研究以两株不同温型的巨大侧耳菌株 ＰＧ４６ 和 ＰＧ７９ 为材
料ꎬ采用单因素和正交试验方法对原生质体制备的菌丝体菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶浓度、酶解温度和酶解
时间进行研究ꎮ 结果表明:(１)在单因素实验中ꎬ巨大侧耳原生质体制备的适宜条件为菌龄 ５ ｄꎬ溶壁酶浓度
２.５％ꎬ０.６ ｍｏｌＬ 甘露醇ꎬ３２ ℃ (ＰＧ４６)或 ２７~ ３５ ℃ (ＰＧ７９)酶解 ４ ｈꎮ (２) 正交试验验证并优化了单因素
￣１
实验结果ꎬ组合 ２(菌龄 ５ ｄꎬ溶壁酶浓度 ２.５％ꎬ０.６ ｍｏｌＬ 的甘露醇ꎬ３２ ℃ 酶解 ４ ｈ) 可同时作为 ＰＧ４６ 和
￣１
６ ￣１ ６ ￣１
ＰＧ７９ 原生质体制备的最适条件ꎬ原生质体产量分别为 １１.２２×１０ ＣＦＵｍＬ 和 ７.２８×１０ ＣＦＵｍＬ ꎮ (３)
Ｆ￣ｔｅｓｔ 检验中ꎬ各因素对原生质体制备的影响程度依次为菌龄>溶壁酶浓度>酶解温度>酶解时间(ＰＧ４６)ꎬ菌
龄>酶解时间>酶解温度>溶壁酶浓度(ＰＧ７９)ꎮ 综上所述ꎬ两株不同温型巨大侧耳菌株的原生质体制备条
件基本一致ꎬ菌龄对两菌株原生质体得率的影响程度最显著ꎮ 该研究结果可为后续巨大侧耳的杂交育种、
遗传转化、全基因组测序等工作奠定基础ꎬ进一步推动巨大侧耳分子遗传学的发展ꎮ
关键词: 巨大侧耳ꎬ 不同温型ꎬ 热区ꎬ 原生质体产量ꎬ 制备条件
中图分类号: Ｑ９４ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２３)０７￣１３０８￣０９
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
ｏｆ Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｇｉｇａｎｔｅｕｓ
１ꎬ２ １ꎬ３ １ꎬ３ ４ ５ １ꎬ３∗
ＰＩＡＮ Ｙｏｎｇｒｕ ꎬ ＬＩ Ｊｉｎｇｙｉ ꎬ ＬＩ Ｑｉｎｆｅｎ ꎬ ＷＡＮＧ Ｈｕａｎ ꎬ ＬＩ Ｙｕ ꎬ ＹＡＮＧ Ｙａｎｇ
( １. Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｌｏｗ Ｃａｒｂｏｎ Ｇｒｅｅｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｃｈｉｎａꎬ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒｕｒａｌ Ａｆｆａｉｒｓꎬ Ｐ. Ｒ. Ｃｈｉｎａꎬ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ
ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｈａｉｋｏｕ ５７１１０１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｙｃｏｌｏｇｙꎬ
Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｗｕｈａｎ ４３００７０ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３. Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
Ｓｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔꎬ Ｄａｎｚｈｏｕ ５７１７００ꎬ Ｈａｉｎａｎꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ４. Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ
Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３０１１７ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ５. Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｅｄｉｂｌｅ ａｎｄ
Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｆｕｎｇｉꎬ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３０１１８ꎬ Ｃｈｉｎａ )
收稿日期: ２０２２－１１－１０
基金项目: 海南省自然科学基金(３２２ＱＮ３６５)ꎻ 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(１６３００４２０２２００３ꎬ １６３００４２０２２０２０)ꎮ
第一作者: 骈永茹(１９９９－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为食用菌遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｐｉａｎｙｏｎｇｒｕ＠ １６３.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 杨阳ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ研究方向为食用菌种质资源评价和遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｙｙｊｏｂ１９９２＠ １６３.ｃｏｍꎮ
