Page 69 - 《广西植物》2023年第7期

７ 期 周思旋等: 光枝勾儿茶内生真菌多样性及抑菌活性研究 １ ２ ３ ７

ｆｒａｇｍｅｎｔ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ. Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓꎬ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｅｄ
ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ. Ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒｏｔｈ. Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １９１ ｆｕｎｇａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄꎬ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｐｈｙｌａꎬ ５ ｃｌａｓｓｅｓꎬ １０
ｏｒｄｅｒｓꎬ １５ ｆａｍｉｌｉｅｓ ａｎｄ １９ ｇｅｎｅｒａ. Ａｍｏｎｇ ａｌｌ ｓｔｒａｉｎｓꎬ Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａꎬ Ｄｉａｐｏｒｔｈｅꎬ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ａｎｄ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｗｅｒｅ
ｔｈｅ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｇｅｎｅｒａ. (２) Ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ ｆｕｎｇａｌ Ｓｈａｎｎｏｎ￣Ｗｅｉｎｅｒ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ ｏｆ Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ ｖａｒ. ｌｅｉｏｃｌａｄａ
ｉｎ Ｑｉａｎｘｉ (Ｈ′ ＝ ２.１１２) ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ Ｇｕｉｙａｎｇ (Ｈ′ ＝ １.８０１)ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ Ｓｏｒｅｎｓｏｎ’ ｓ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
Ｑ Ｇ
(Ｃｓ ) ｗａｓ ０.９２３. Ｔｈｅ Ｓｈａｎｎｏｎ￣Ｗｅｉｎｅｒ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｓｔｅｍ (Ｈ′ ＝ ２.００４)> ｒｏｏｔ(Ｈ′ ＝ １.７６４)>
Ｇ－Ｑ Ｓ Ｒ
ｌｅａｆ(Ｈ′ ＝ １.６５４)>ｆｒｕｉｔ(Ｈ′ ＝ １.４７３). Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｉｎｄｅｘ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔꎬ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ Ｃｓ ＝
Ｌ Ｆ Ｓ－Ｌ
０.６６７. (３) ２１ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ’ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｈａｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉꎬ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ
ａｎｄ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ. Ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅ Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｓｐ. ＱＸ４Ｇ６ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｒｏｔｈ ｅｘｔｒａｃｔ ｈａｖｅ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｈｉｇｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ｅｆｆｅｃｔｓꎬ ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ａｇａｉｎｓｔ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉꎬ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ａｎｄ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ
￣１
ｅｎｔｅｒｉｃａ ｗｅｒｅ １２.５ꎬ ６.２５ ａｎｄ １２.５ ｍｇｍＬ ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｎｉｍｕｍ ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ １２.５ꎬ ６.２５ ａｎｄ １２.５
￣１
ｍｇｍＬ ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｒｅｖｅａｌ ｒｉｃｈ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｕｓ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ ｖａｒ. ｌｅｉｏｃｌａｄａ ａｎｄ
ｍｏｓｔ ｏｆ ｆｕｎｇｉ ｈａｖｅ ｇｏｏｄ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ｗｈｉｃｈ ｌａｙ ｔｈｅ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｓ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ
ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｒｕｇｓ ｏｒ ｄｒｕｇ ｓｏｕｒｃｅｓ ｆｏｒ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｆｒｏｍ Ｂ. ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ ｖａｒ. ｌｅｉｏｃｌａｄａ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ ｖａｒ. ｌｅｉｏｃｌａｄａꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｓｔｒａｉｎｓꎬ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ

植物内生真菌是指生活在植物细胞中或在其 抗腹泻、抗炎、镇痛、抑菌等活性ꎬ对治疗支气管
生活史某一时期生活在植物组织内ꎬ对植物组织 炎、痢疾、关节炎等具有良好的效果ꎬ作为民族药
没有引起明显病害的一类真菌( Ｐｅｔｒｉｎｉꎬ １９９１)ꎮ 物ꎬ可用于治疗人、畜肠炎及消化不良性腹泻( 梁
几乎所有植物都含内生真菌ꎬ分布于植物的根、 应林等ꎬ２０１３ꎻ唐远江等ꎬ２０１８)ꎮ 目前已从该属植
茎、叶、花、果实等各个部位ꎬ种类和数量繁多ꎬ每 物中分离到 １９ 个已知化合物和 ４ 个蒽醌－苯并异

一种植物都是内生真菌潜在的资源宝库( Ｚｈｏｕ ＆ 色满苯醌二聚体ꎬ部分化合物显示了较好的对乙
Ｈｙｄｅꎬ ２００１)ꎮ 随着内生真菌研究不断深入ꎬ不同 酰胆碱酯酶活性ꎬ体现了明显的研究价值( 景永帅
植物的内生真菌组成不同ꎬ寄主植物的种类、部 等ꎬ２０１１)ꎮ 然而ꎬ光枝勾 儿 茶 生 长 周 期 长ꎬ产 量
位、环境和地理区域均是决定内生真菌种群结构 低ꎬ易受环境地域等因素影响ꎬ传统植物开发应用
的重要因素ꎬ目前从植物中分离出来的内生真菌 受到了限制ꎬ其内生真菌作为植物的共生体和一
种类繁多ꎬ涉及子囊菌、担子菌、接合菌、无孢菌等 种潜在的新资源ꎬ在寄主植物提供的营养和保护
多种 类 群 ( 谯 利 军 等ꎬ ２０１８ꎻ Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ ｅｔ ａｌ.ꎬ 下ꎬ经长期共同进化ꎬ可增强寄主植物的竞争能力
２０１９ꎻ胡永志等ꎬ２０２１)ꎮ 内生真菌与宿主植物长 和对食草动物、病原体和各种非生物胁迫的抵抗
期协同进化ꎬ互惠共生ꎬ处于一种动态平衡的拮抗 力ꎬ这种复杂多变的生境使内生真菌在生物制药、
关系ꎬ有助于提高宿主对胁迫环境的适应性和抗 农业生产和工业发酵等方面表现出广阔的应用前
性ꎬ在植物生长发育和繁殖中起到了重要作用( 隋 景ꎬ是寻找结构新颖、活性独特物质和替代植物的
丽等ꎬ２０２１)ꎮ 有研究表明ꎬ从植物中分离到的内 重要来源(元超等ꎬ２０２１)ꎮ 同时ꎬ内生真菌的开发
生真菌能产生丰富的次级代谢产物ꎬ包括生物碱、 应用可能实现大规模、低成本和无污染的工业化
苯骈吡喃酮、黄酮、酚酸等多种类型化合物ꎬ对细 生产ꎬ为解决药用植物资源和环境保护提供了新
菌、真菌、病毒等具有不同程度的拮抗作用ꎬ在药 途径ꎮ 本研究基于光枝勾儿茶的药用价值及植物
物研发、病害防治等方面表现出显著的经济价值 应用瓶颈ꎬ解析其内生真菌组成情况ꎬ设想能够通
和应用前景ꎬ是天然活性物质的重要来源( 郭顺 过筛选植物内生真菌抑菌活性ꎬ得到具有与植物
星ꎬ２０１８ꎻＨａｎａｎｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２)ꎮ 内生真菌的存在 产生功能相同或相似的次级代谢产物的微生物资
及其发挥出来的优越性为寻找结构新颖、活性独 源ꎬ从而部分替代植物来源生产临床天然药物ꎮ
特、替代药用植物的新药研发指明了方向ꎮ 以贵州贵阳、黔西多年生光枝勾儿茶为研究对象ꎬ
光 枝 勾 儿 茶 ( Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ ｖａｒ. 系统分离并鉴定根、茎、叶和果实等多个部位的内
ｌｅｉｏｃｌａｄａ)为鼠李科勾儿茶属植物ꎬ是贵州苗族习 生真菌ꎬ在获得可培养真菌资源的基础上ꎬ采用分
用药材ꎬ味苦、平ꎬ含苷类、醌类、木脂素类、萜类以 子生物学鉴定真菌类群ꎬ并通过统计学方法对其
及黄酮类等多种化学成分ꎬ具有抗氧化、抗肿瘤、 进行多样性评价分析ꎬ以大肠杆菌、金黄色葡萄球