Page 85 - 《广西植物》2024年第11期

１１ 期 孙剑平等: 叶面施硒对水稻叶片亚细胞组分中硒分布和累积的影响 ２ ０ ６ ９

积的影响ꎻ(２)不同载体对水稻叶片中硒吸收和积 的叶片在中间固定位置施加 １０ μＬ 浓度为 １ ０００
累的影响ꎮ 以期为农业生产中提高硒肥吸收效 ｍｇＬ (以硒计) 亚硒酸钠、硒代蛋氨酸、纳米硒
￣１
率、节约硒肥资源提供借鉴ꎮ 或酵母硒溶液ꎬ７ ｈ 取出叶片(预实验证明 ７ ｈ 已对
叶施硒吸收完全)ꎬ用 ６ ｍＬ 水冲洗叶片施硒部位ꎬ
１ 材料与方法 冲洗水和 ＥＤＴＡ 溶液留下待用ꎬ整个过程在避光
条件下完成(ＥＤＴＡ 吸收韧皮部汁液须在黑暗处完
１.１ 实验材料 成(Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１９)ꎮ 所有处理设 ３ 个重复ꎮ

水稻品种:香妃ꎬ粳型常规水稻ꎬ生育期 １５６ ｄ １.３.２ 施硒浓度对硒叶片迁移积累的影响 为使
左右ꎬ株高 １００ ~ １０５ ｃｍꎬ根系发达ꎬ茎秆坚韧ꎬ高 溶液以液滴的形式ꎬ施加在叶片同一位置( 苗期叶
抗倒伏ꎬ不早衰ꎬ株型紧凑ꎬ分蘖力极强ꎬ抗病性 片叶宽较窄)ꎬ以提高施硒浓度ꎬ降低施硒体积ꎮ
强ꎬ高抗稻瘟病、稻曲病、纹枯病ꎬ千粒重 ２６.２ ｇꎬ米 预实验证明施加浓度体积较小时ꎬ较高浓度的硒

质入口香甜ꎬ口感极佳ꎮ 不会对叶片造成损伤( 图 １)ꎮ 因此ꎬ实验设计为
试剂:亚硒酸钠( Ｎａ ＳｅＯ ꎬ广州市华豫贸易有 在叶片固定位置施加 １０ μＬ 浓度分别为 ０、２００、
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限公司)、硒代蛋氨酸(Ｃ Ｈ ＮＯ Ｓｅꎬ源叶生物科技 ４００、６００、８００、１ ０００ ｍｇＬ 亚硒酸钠溶液ꎬ其他
￣１
５ １１ ２
有限公司)、纳米硒(Ｓｅꎬ西安瑞禧生物科技有限公 同 １.３.１ꎮ
司)、酵母硒( 博尔森生物科技有限公司)、环糊精
(Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ国药集团化学试剂有限公司)、鼠李糖
４２ ７０ ３５
脂(Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ西安瑞捷生物科技有限公司)、烷
５８ １０６ ２２
基糖 苷 ( Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ 源 叶 生 物 科 技 有 限 公 司)、
１６ ３２ ６
ＥＤＴＡ(Ｃ Ｈ Ｎ Ｏ ꎬＢＢＩ 生命科学有限公司)、二硫
１０ １６ ２ ８
苏糖醇( Ｃ Ｈ Ｏ Ｓ ꎬ上海麦克林生化科技有限公
４ １０ ２ ２
司)、Ｔｒｉｓ(Ｃ Ｈ ＮＯ ꎬ北京索莱宝科技有限公司)、
４ １１ ３
蔗糖(Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ广州市华豫贸易有限公司)ꎮ
１２ ２２ １１
１.２ 水稻培养
将水稻种子在 １０％Ｈ Ｏ 溶液中消毒 ３０ ｍｉｎꎬ
２ ２
用去离子水冲洗 ３ ~ ５ 次ꎬ放在 ２８ ℃ 植物培养箱中
催芽 ３ ~ ４ ｄ 后移栽至育苗盘中ꎬ２５ ℃ 培育 ２１ ｄꎬ育
苗盘中的土施加氮磷钾肥(尿素 ９１ ｍｇｋｇ 、过磷 图中圆圈为施硒部位ꎮ
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酸钙 ２００ ｍｇｋｇ 、氯化钾 ４０ ｍｇｋｇ ) 保证充足 Ｔｈｅ ｃｉｒｃｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｉｃｔｕｒｅ ｉｓ ｔｈｅ ｐｌａｃｅ ｗｈｅｒｅ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｓ ａｐｐｌｉｅｄ.
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￣１
的营养ꎮ 待水稻幼苗生长 ２１ ｄ 后ꎬ将充分展开的 图 １ 施加 １０ μＬ １ ０００ ｍｇＬ ￣１
第三叶从叶基部剪下ꎬ用于叶片亚细胞实验ꎮ 亚硒酸钠溶液 ７ ｈ 后的叶片
１.３ 实验设计 Ｆｉｇ. １ Ｌｅａｖｅｓ ａｆｔｅｒ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ １０ μＬ １ ０００ ｍｇＬ ￣１
水稻叶片离体实验可以将叶片作为一个独立 ｄｉｓｏｄｉｕｍ ｓｅｌｅｎｉｔｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｒ ７ ｈ
的整体ꎬ研究外源物质的叶片吸收和迁移出叶片
情况ꎮ 因此ꎬ本文采用水稻叶片离体实验ꎬ将叶片 １.３.３ 施硒叶片硒的迁移积累特征 为使实验数据
沿叶舌剪下ꎬ放入 ＥＤＴＡ 溶液中ꎬＥＤＴＡ 溶液承接 形成系统变化ꎬ采用呈指数形式增长的时间梯度ꎬ
韧皮部渗出汁液ꎬ反映了叶片吸收硒后向其他器 并且预实验中置于 ＥＤＴＡ 溶液中的叶片 ２８ ｈ 不会
官迁移的情况ꎮ 实验分别考虑施硒形态、浓度、时 失去生命体征ꎮ 因此ꎬ实验设计为在叶片固定位置
￣１
间及表面活性剂的影响ꎮ 施加 １０ μＬ １ ０００ ｍｇＬ 亚硒酸钠溶液ꎬ在 ０、１、２、
１.３.１ 施硒形态对硒叶片迁移积累的影响 选取 ３、５、７、９、１４、２８ ｈ 时取出叶片ꎬ其他同 １.３.１ꎮ
水稻叶位一致、长势相同的叶片( 第三叶)ꎬ将筛选 １.３.４ 表面活性剂浓度和性质对叶片硒迁移积累
￣１ 的影响 选择的表面活性剂为常用且环境友好
叶片的剪切部位下表面浸入 ２ ｍＬ ２５ ｍｍｏｌＬ
ＥＤＴＡ 溶液中ꎬ上表面暴露空气中ꎬ暴露于空气中 的环糊精、鼠李糖脂和烷基糖苷ꎮ 根据表面活性