Page 77 - 《广西植物》2024年第12期

１２ 期 许鹏等: 澳洲坚果果仁 ＭｉＭＹＢ４４Ｌ 基因克隆与结构功能分析 ２ ２ ３ ５

Ａ.‘桂热 １ 号’和‘Ａ４’果仁转录组 ＫＥＧＧ 分析ꎻ Ｂ. ｇｅｎｅ￣ＬＯＣ１２２０７７９３１ 表达分析ꎮ Ｂ 图中不同字母表示不同品种间有显著性差
异(Ｐ<０.０５)ꎮ
Ａ. Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ ＫＥＧＧ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｋｅｒｎｅｌ ｏｆ ‘Ｇｕｉｒｅ Ｎｏ. １’ ａｎｄ ‘Ａ４’ꎻ Ｂ. ｇｅｎｅ￣ＬＯＣ１２２０７７９３１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｉｎ Ｆｉｇ. Ｂ (Ｐ<０.０５).
图 １ ‘桂热 １ 号’和‘Ａ４’果仁转录组差异表达基因的 ＫＥＧＧ 富集分析和 ｇｅｎｅ￣ＬＯＣ１２２０７７９３１ 基因表达分析
Ｆｉｇ. １ ＫＥＧＧ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｋｅｒｎｅｌ ｏｆ ‘Ｇｕｉｒｅ Ｎｏ. １’
ａｎｄ ‘Ａ４’ ａｎｄ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｇｅｎｅ￣ＬＯＣ１２２０７７９３１

ＩＫＧＰＷＳＰＥＥＤＥＡＬＱＫＬＶＱＫＨＧＰＲＮＷＳＬＩＳＫＳＩＰＧＲＳ 为疏水性蛋白ꎬ不含有跨膜结构域和信号肽ꎬ主要
ＧＫＳＣＲＬＲＷＣＮＱＬꎻ３. ＱＦＦＳＡＥＦＬＡＶＭＱＥＭＩＲＫＥＶＲ 含有丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸化位点ꎮ
ＮＹＭＳＧＪＥＱＮꎻ４. ＮＰＳＳＰＳＧＳＤＶＳＤＳＳＬＰＶＭＳＳＳＨＶＹ 在蛋白保守结构域分析的基础上ꎬ进一步分
ＲＰＶＡＲＴＧＧＶＬＰＰＶＱＴＩＥꎻ５. ＣＬＱＡＥＧＩＲＮＡＶＶＫＲＩＧ 析 了 ＭｉＭＹＢ４４Ｌ 蛋 白 的 二 级 和 三 级 结 构ꎮ

ＩＳＫＩＥꎻ６. ＤＰＰＴＳＬＳＬＳＬＰＧＳＤＳꎻ７. ＨＳＱＱＰＬＫＲＳＡＳＡ ＭｉＭＹＢ４４Ｌ 蛋白二级结构具体如下:α 螺旋为 ８６
ＧＡＡＴＰＶＳＧꎻ８. ＭＡＳＴＲＫＤＶꎮ 这 说 明 其 结 构 与 植 个氨基酸ꎬ占比 ２５.９０％ꎻ延长链为 １９ 个氨基酸ꎬ占
物 ＭＹＢ４４ 家族蛋白序列一致ꎮ 比 ５.７２％ꎻβ 转角为 １０ 个氨基酸ꎬ占比 ３.０１％ꎻ随
经过对 蛋 白 保 守 结 构 域 分 析 发 现 ( 图 ４)ꎬ 机卷曲为 ２１７ 个氨基酸ꎬ占比 ６５.３６％ (图 ６)ꎮ
ＭｉＭＹＢ４４Ｌ 与其他植物的 ＭＹＢ 在功能域序列方面 分析‘桂热 １ 号’ ‘ Ａ３８’ ‘ ＪＷ’ 等 １０ 个品种澳
相似度高ꎬ均含有 ＳＡＮＴ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ 结构域ꎮ 其特 洲坚果果仁中的蛋白质含量表明ꎬ蛋白质含量间
征为在 ８ ~ １７３ 氨基酸序列中含有 ＭＤＲＩＫＧＰＷＳＰＥ 存在显著性差异ꎮ 进一步提取 １０ 个品种果仁的
ＥＤＤＳＬＱＫＬＶＱＫＨＧＰＲＮＷＳＬＩＳＫＳＩＰＧＲＳＧＫＳＣＲＬＲＷ ＲＮＡ 分析表明ꎬＭｉＭＹＢ４４Ｌ 在‘ ＪＷ’ ‘ ＳＨ’ 等高蛋
ＣＮＱＬＳＰＱＶＥＨＲＡＦＴＰＥＥＤＥＴＩＩＲＡＨＡＫＦＧＮＫＷＡＴＩＡ 白质含量品种中表达量最高ꎬ在‘ Ａ４’ ‘ Ｂ４’ 等品种
ＲＬＬＳＧＲＴＤＮＡＩＫＮＨＷＮＳＴＬＫＲＫＣＳＳＭｖｄｄａＳＤＤＡＱＡ 中表达量最低( 图 ７)ꎮ 蛋白质含量和表达量的相
ＨＱＰＬＫＲＳＮＳＡＧＡＡＶＡＰＶＳＳＬＹＦＮＳＰＳＳＰＳＧＳＤＶＳＤＳＳ 关系数为 ０.５４(Ｐ ＝ ０.００２)ꎬ达到极显著水平ꎮ
ＬＰＶＭＳＳＳＨＶＹ 序列ꎮ ＭＹＢ 超家族蛋白具有转录、
ＲＮＡ 加工和修饰、细胞分裂和染色体分割等作用ꎮ ３ 讨论
ＳＡＮＴ 结构域结合端粒 ＤＮＡ 串联重复序列的串联
拷贝是加帽复合体的一部分ꎮ 对于包含 Ｇ / Ｃ 丰富 研究转录因子调控澳洲坚果蛋白质含量的分
基序 [Ｃ２￣３ Ａ (ＣＡ)１－６]的重复序列ꎬ其结合是序 子机制和栽培技术的报道较少ꎬ但是国内外已经
列依赖性的ꎮ 该结构域也发现于与 ＤＮＡ 结合的 开展了相关的生理与分子生物学研究ꎮ 如 Ｙａｎｇ
调节性转录抑制物复合物中ꎬ在所有物种中极端 等(２０２３)在研究澳洲坚果早期花序的代谢物和内
保守ꎮ 蛋白特性结果(图 ５)显示ꎬＭｉＭＹＢ４４Ｌ 蛋白 源激素含量变化规律中发现ꎬ 随着果实的生长ꎬ包