Page 90 - 《广西植物》2024年第12期

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图 ２ ＣｏＮＡＣ５ 和 ＣｏＮＡＣ７９ 系统发育进化树和保守基序分析
Ｆｉｇ. ２ Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｔｒｅｅ ａｎｄ ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｍｏｔｉｆｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣｏＮＡＣ５ ａｎｄ ＣｏＮＡＣ７９

是对照的 ７６ 倍ꎬ４８ ｈ 时依然呈现高表达ꎬ为对照 分别与柿子和荔枝的同源性最高且 Ｎ 端均具有
的 １２ 倍ꎮ ＰＥＧ 处理 ３６ ｈꎬＣｏＮＡＣ７９ 的表达量是对 ＮＡＣ 转录因子特有的 ＮＡＭ 结构域ꎮ 亚细胞定位
照的 １８０ 倍ꎬ４８ ｈ 时为对照的 ６.８ 倍( 图 ８)ꎮ 在 结果表明 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 蛋白均定位在细胞
ＡＢＡ 处理下ꎬＣｏＮＡＣ５ 和 ＣｏＮＡＣ７９ 的表达在 ２４ ｈ 核上ꎬ属于核蛋白ꎬ表明 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 作为
出现显 著 上 调ꎬ分 别 为 对 照 的 １. ４ 倍 和 １. ７ 倍ꎮ 转录因子可能调控细胞核中靶基因的转录过程ꎬ
ＡＢＡ 处理 ３６ ｈ 时ꎬ两者的表达量均呈现高表达ꎬ 符合转录因子的特征ꎮ
分别为对照的 １１ 倍和 １２ 倍ꎮ ４８ ｈ 时ꎬ与对照相 研究发现 ＮＡＣ 蛋白常通过与其他蛋白互作的
比ꎬＣｏＮＡＣ５ 的表达量增长幅度下降ꎬ为对照的 ３.３ 形式来参与非生物胁迫( Ｈａｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１１)ꎮ 确定
倍ꎬ而 ＣｏＮＡＣ７９ 的表达量出现下调趋势ꎬ只有对照 不同蛋白间相互作用常采用酵母双杂技术ꎬ其中
的 ８５％ꎬ但两者没有显著差异ꎮ 为降低酵母双杂筛选时的假阳性概率ꎬ首先要确
定诱饵蛋白本身是否具有转录激活功能ꎮ 若诱饵
３ 讨论 蛋白具有转录活性ꎬ就能单独激活下游启动子调
节的 报 告 基 因ꎬ 从 而 造 成 假 阳 性ꎮ 本 研 究 发 现
ＮＡＣ 转录因子是植物中特有的转录因子ꎬ也 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 两 个 蛋 白 没 有 转 录 激 活 能

是植物中数量最大的转录因子家族之一( Ｃｈｅｎ ｅｔ 力ꎬ进一步比较 Ｃ 端和 Ｎ 端结构域ꎬ发现这两个蛋
ａｌ.ꎬ ２０２２)ꎮ ＮＡＣ 转录因子不仅参与调控植物生 白的 Ｃ 端都含有转录激活区域ꎬ而 Ｎ 端没有激活
长发育过程ꎬ而且在响应逆境胁迫中扮演着重要 活性ꎮ 这可能是由于 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ 蛋白的
角色(Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎮ 本研究克隆油茶 ＮＡＣ 转 Ｎ 端存在转录激活的抑制区域ꎬ从而干扰了 Ｃ 端
录因子 ＣｏＮＡＣ５ 与 ＣｏＮＡＣ７９ꎬ属于 ＡＴＮＡＣ３ 亚组ꎬ 激活域及其全长蛋白的转录效应ꎮ Ｈａｏ 等(２０１０)