Page 153 - 《广西植物》2025年第1期
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１ 期 王莹等: 元宝山冷杉冬季根际土壤微生物沿海拔梯度的变化特征 １ ４ ９
对外界恶劣环境变化的适应能力ꎮ 因此ꎬ为防止 期为 ２８８ ｄꎬ土壤类型主要为山地黄壤ꎬ地表腐殖
未来生境破坏导致元宝山冷杉物种灭绝ꎬ本研究 质较厚ꎬ林分简单ꎬ主要伴生树种为南方铁杉、南
于冬季采样ꎬ以不同海拔高度的元宝山冷杉根际 方红豆杉等ꎬ林下寒竹覆盖度大ꎬ地衣、苔藓分布
土壤为研究对象ꎬ依托 Ｉｌｌｕｍｉｎａ Ｍｉｓｅｑ 高通量测序 密集(黄仕训ꎬ１９９８ꎻ梁凌林和潘庆宝ꎬ２０１２)ꎮ
平台对细菌和真菌进行高通量测序ꎬ分析不同海 １.２ 样品采集与处理
拔梯度根际土壤微生物群落结构组成、多样性变 本实验于 ２０２２ 年 １２ 月冬季进行采样ꎬ根据元
化与环境因子的关系ꎬ探讨元宝山冷杉在高寒生 宝山冷杉的生长和分布情况ꎬ以 １００ ｍ 为 １ 个海拔
境下根际土壤微生物多样性的海拔分布格局及其 梯度ꎬ海拔分别为 １ ７５０ 、１ ８５０ 、１ ９５０ 、２ ０５０ ｍꎮ
驱动因子ꎬ了解其在全球气候变化下的植物适应 因为极小种群植物往往在野外数量过少ꎬ自然条
能力ꎮ 以期为元宝山冷杉这一濒危物种将来的迁 件的限制与物种的特殊性ꎬ所以只能在有限个体
地保护与野外回归的保护研究提供坚实的理论依 中进行采样ꎬ难以达到常规采样标准与要求ꎬ从而
据和技术支持ꎬ也为亚热带山地森林生态系统海 导致采样个体之间的树木生长性状存在差异( 胡
拔分布规律的研究提供宝贵的基础数据与背景 瑞等ꎬ２０２３)ꎮ 每个海拔样方内随机选取 ３ 株生长
资料ꎮ 旺盛且性状较为相似的元宝山冷杉采集其根际土
壤ꎬ采样信息如表 １ 所示ꎮ 在周围距离树干 ０.５ ｍ
１ 材料与方法 处除去表面凋落物和腐殖质层土壤后ꎬ挖开土壤
挑选新鲜植物细根ꎬ将附着在细根上的土抖落ꎬ再
１.１ 研究区概况 用无菌软毛刷轻轻刷下紧贴根部的土壤作为根际
本研究样品采集地为元宝山国家级自然保护 土壤ꎮ 将新鲜的土壤样品去除可见根和其他残留
区ꎬ位于广西柳州市融水苗族自治县( １０９°０７′— 物后ꎬ进一步分成 ３ 份子样ꎬ一份装入铝盒中用于
１０９°１３′ Ｅ、 ２５°２２′—２５°３２′ Ｎ)ꎬ气候类型为中亚 土壤含水量的测定ꎬ一份迅速置于密封保温箱( 带
热带季风气候ꎬ热量丰富ꎬ降水充沛ꎬ年平均温度 干冰)内保存用于微生物群落多样性测定ꎬ另一份
约为 １６.４ ℃ ꎬ年平均降水量约为 ２ ３７９ ｍｍꎬ无霜 风干后过 ２ ｍｍ 筛ꎬ用于测量土壤理化性质ꎮ
表 １ 元宝山冷杉的采样点基本信息
Ｔａｂｌｅ １ Ｂａｓｉｃ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｐｏｉｎｔｓ ｏｆ Ａｂｉｅｓ ｙｕａｎｂａｏｓｈａｎｅｎｓｉｓ
平均胸径
采样点 海拔 地理坐标 坡位 坡向
Ａｖｅｒａｇｅ ＤＢＨ
Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｓｉｔｅ Ａｌｔｉｔｕｄｅ(ｍ) Ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅ Ｓｌｏｐｅ ｐｏｓｉｔｉｏｎ Ｓｌｏｐｅ ａｓｐｅｃｔ
(ｃｍ)
白石坳 Ｂａｉｓｈｉａｏ １ ７５０ １０９°１０′４６.４６″ Ｅ、２５°２６′２０.３５″ Ｎ ４４.２ 上坡 Ｕｐ ｓｌｏｐｅ 东南 Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ
白石上 Ｂａｉｓｈｉｓｈａｎｇ １ ８５０ １０９°１０′４９.９５″ Ｅ、２５°２６′２０.１４″ Ｎ ２５.７ 上坡 Ｕｐ ｓｌｏｐｅ 东南 Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ
冷杉坪 Ｌｅｎｇｓｈａｎｐｉｎｇ １ ９５０ １０９°１０′４２.４８″ Ｅ、２５°２５′５３.２３″ Ｎ ３５.６ 中坡 Ｍｉｄ ｓｌｏｐｅ 东北 Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ
兰坪峰 Ｌａｎｐｉｎｇｆｅｎｇ ２ ０５０ １０９°１０′３７.８７″ Ｅ、２５°２５′４８.６８″ Ｎ ３９.７ 上坡 Ｕｐ ｓｌｏｐｅ 东北 Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ
１.３ 土壤理化性质测定 全磷(ｔｏｔａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓꎬＴＰ) 采用硫酸消煮－钼锑抗
土壤含水量( ｓｏｉｌ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔꎬＳＷＣ) 的测定 法ꎻ土壤全钾(ｔｏｔａｌ ｐｏｔａｓｓｉｕｍꎬＴＫ) 采样火焰分光光
采用烘 干 法ꎻ 土 壤 酸 碱 度 ( ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｈｙｄｒｏｇｅｎꎬ 度计法ꎮ
ｐＨ)的测定采用« 中华人民共和国国家环境保护 １.４ 土壤微生物总 ＤＮＡ 提取、ＰＣＲ 扩增及高通量
标准:土 壤 ｐＨ 值 的 测 定 电 位 法» ( ＨＪ ９６２ － 测序
２０１８)ꎻ土壤有机碳( ｓｏｉｌ ｏｒｇａｎｉｃ ｃａｒｂｏｎꎬＳＯＣ) 采用 根 据 ＡＬＦＡＳｏｉｌ ＤＮＡ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ 试 剂 盒
重铬 酸 钾 水 合 加 热 法ꎻ 土 壤 全 氮 ( ｔｏｔａｌ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬ (ＦＩＮＤＲＯＰꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ) 的操作说明ꎬ从 ０.２５ ｇ 冷
ＴＮ)采用浓硫酸消煮－水杨酸钠分光光度法ꎻ土壤 冻土壤样品中提取总 ＤＮＡꎮ ＰＣＲ 扩增程序如下:
