Page 154 - 《广西植物》2025年第1期
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１ ５ ０ 广 西 植 物 ４５ 卷
９４ ℃ 预变性 ５ ｍｉｎꎬ９４ ℃ 变性 ３０ ｓꎬ５３ ℃ 退火 ３０ 群落组成结构相似ꎬ相对丰度有一定差异ꎬ但并
ｓꎬ７２ ℃ 延伸 ３０ ｓꎬ共循环 ３１ 次ꎻ在 ７２ ℃ 下延伸 ８ 未呈现明显的海拔分布格局ꎮ 未分类或未识别
ｍｉｎꎬ最后 １２ ℃ 保持ꎮ 引物对应区域:真菌 ＩＴＳ 区 的微生物相对丰度占比较高ꎬ细菌群落组成在海
域的扩增引物为 ＩＴＳ３￣Ｆ(５′￣ＧＣＡＴＣＧＡＴＧＡＡＧＡＡＣ 拔间相 对 稳 定ꎬ 真 菌 群 落 组 成 随 海 拔 变 化 差 异
ＧＣＡＧＣ￣３′)和 ＩＴＳ４￣Ｒ(５′￣ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴ 较大ꎮ
ＧＣ￣３′)ꎻ细菌 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因的扩增引物为 ３３８Ｆ ２.２.１ 细菌群落组成差异分析 根据土壤基因组
( ５′￣ＡＣＴＣＣＴＡＣＧＧＧＡＧＧＣＡＧＣＡ￣３′) 和 ８０６Ｒ ( ５′￣ ＤＮＡ 序列分类学分析ꎬ元宝山冷杉根际细菌 ＯＴＵｓ
ＧＧＡＣＴＡＣＨＶＧＧＧＴＷＴＣＴＡＡＴ￣３′)ꎮ ＰＣＲ 扩 增 产 归类为 １３ 门 ３６ 纲 ９７ 目 １８２ 科 ２６９ 属 ３６０ 种ꎮ 结
物的定量测定、均一化、文库构建及上机测序等均 果 ( 图 １ꎬ 表 ４ ) 表 明ꎬ 在 门 水 平 上ꎬ 酸 杆 菌 门
由广东美格科技有限公司完成ꎮ (Ａｃｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａꎬ４６.１５％)、变形菌门( Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａꎬ
１.５ 统计分析 ２８.６９％) 以及放线菌门( Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａꎬ１０.５２％) 为
利用 Ｅｘｃｅｌ ２０１３ 软 件 进 行 数 据 计 算ꎬ 利 用 优势细菌门ꎬ但随着海拔的上升ꎬ优势门均无显著
ＳＰＳＳ ２０. ０ 软 件 进 行 单 因 素 方 差 分 析 ( ｏｎｅ￣ｗａｙ 变化ꎮ 在 属 水 平 上ꎬ 苔 藓 杆 菌 属 ( Ｂｒｙｏｂａｃｔｅｒꎬ ５.
ＡＮＯＶＡ)ꎬ使用 Ｏｒｉｇｉｎ ８.０ 软件进行绘图ꎬ使用广东 ４２％)、酸热菌属( Ａｃｉｄｏｔｈｅｒｍｕｓꎬ５.３４％)、独活假丝
美 格 科 技 有 限 公 司 的 Ｉｌｕｍｉｎａ ＮｏｖａＳｅｑ６０００ 酵母属( Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ＿Ｓｏｌｉｂａｃｔｅｒꎬ ４.８８％)、Ｒｏｓｅｉａｒｃｕｓ
(ＰＥ２５０) 平 台 进 行 微 生 物 分 析ꎮ α 多 样 性 使 用 (３.５３％)和酸杆菌属( Ａｃｉｄｉｂａｃｔｅｒꎬ２.１６％) 为优势
ＡＣＥ 指 数、Ｃｈａｏ１ 指 数、Ｓｈａｎｎｏｎ 指 数、 Ｓｉｍｐｓｏｎ 指 细菌属ꎮ 其中ꎬ酸热菌属、酸杆菌属在海拔梯度间
数 ４ 个指标表征ꎬβ 多样性选择 Ｂｒａｙ￣Ｃｕｒｔｉｓ 距离ꎬ 存在显著差异( Ｐ<０.０５)ꎬ其他属无显著变化ꎮ 由
采用主坐标分析方法( ＰＣｏＡ) 探究不同海拔下根 图 ２ 可 知ꎬ ＴＫ、 Ｃ ∶ Ｎ、 Ｎ ∶ Ｐ 与 慢 生 根 瘤 菌 属
际土壤细菌及真菌群落的差异ꎮ 利用冗余分析 (Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ)呈显著相关( Ｐ < ０.０５)ꎻＴＰ 与酸
(ｒｅｄｕｎｄａｎｃｙ ａｎａｌｙｓｉｓꎬＲＤＡ) 揭示根际土壤环境因 热菌属呈显著负相关(Ｐ<０.０５)ꎻＣ ∶ Ｐ、Ｎ ∶ Ｐ 与酸
子和根际土壤微生物组成的相关性ꎬ利用 Ｍａｎｔｅｌ 热菌属呈显著正相关( Ｐ<０.０５)ꎻＳＷＣ 与酸热菌属
Ｔｅｓｔ 探究根际土壤环境因子与细菌和真菌群落多 呈极显著正相关(Ｐ<０.０１)ꎬ与苔藓杆菌属、独活假
样性之间的相关性ꎮ 丝酵 母 属 呈 显 著 负 相 关 ( Ｐ < ０. ０５ )ꎻ ｐＨ 与
Ｒｏｓｅｉａｒｃｕｓ 呈显著正相关( Ｐ<０.０５)ꎮ 其中酸杆菌
２ 结果与分析 属、慢生根 瘤 菌 属 与 海 拔 存 在 显 著 相 关 性 ( Ｐ <
０.０５)ꎬ说明海拔对细菌群落组成有一定的影响ꎮ
２.１ 海拔对根际土壤理化性质的影响 ２.２.２ 真菌群落组成差异分析 根据土壤基因组
元宝山冷杉根际土壤理化性质与化学计量比 ＤＮＡ 序列分类学分析ꎬ元宝山冷杉根际真菌 ＯＴＵｓ
随海拔变化的测定结果见表 ２ 和表 ３ꎮ 数据表明ꎬ 归类为 ２７ 门 ６６ 纲 １２２ 目 １６８ 科 ２３１ 属 ７６ 种ꎮ 结
元宝山冷杉根际土壤养分含量较高ꎬ土壤理化性 果( 图 １ꎬ 表 ４ ) 表 明ꎬ 在 门 水 平 上ꎬ 子 囊 菌 门
质与化学计量随海拔变化均有显著差异ꎬ其中有 (Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａꎬ４４.３９％)和担子菌门( Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａꎬ
机碳和 Ｃ ∶ Ｐ、Ｎ ∶ Ｐ 在 ４ 个海拔梯度间均有显著 ４０.００％)为优势真菌门ꎬ其中担子菌门在海拔之间
差异ꎬ说明海拔对土壤理化性质和土壤化学计量 存在显著差异( Ｐ<０.０５)ꎮ 在属水平上ꎬ大团囊菌
有显著影响(Ｐ<０.０５)ꎮ 属( Ｅｌａｐｈｏｍｙｃｅｓꎬ １１. ５９％)、 蜡 壳 耳 属 ( Ｓｅｂａｃｉｎａꎬ
２.２ 不同海拔梯度元宝山冷杉根际土壤微生物群 ５. ４７％)、 红 菇 属 ( Ｒｕｓｓｕｌａꎬ ４. ９７％) 和 丝 膜 菌 属
落组成的变化 (Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓꎬ４.９７％)为优势真菌属ꎮ 其中ꎬ红茹属
通过 Ｉｌｌｕｍｉｎａ Ｍｉｓｅｑ 测序平台对 ４ 个海拔的 随海拔的上升呈显著下降的趋势( Ｐ<０.０５)ꎬ其他
土壤样 本 的 原 始 测 序 数 据 进 行 处 理ꎬ 分 别 得 到 真 菌 属 无 显 著 变 化ꎮ 此 外ꎬ 本 研 究 还 发 现
４０２ ７２９条土壤细菌序列和 ３１４ ３７１ 条真菌序列ꎬ Ｐｓｅｕｄｏｈｙｄｎｕｍ 和 Ｌｅｕｃｏｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ 为 海 拔 １ ７５０ ｍ
进行 ＯＴＵｓ 注 释 后 得 到 １３ ４８９ 个 细 菌 ＯＴＵｓ 和 特有真菌属ꎮ 由图 ２ 可知ꎬＴＫ、ＴＰ、Ｃ ∶ Ｎ 与暗金钱
８ １０３个真菌 ＯＴＵｓꎬ细菌数量多于真菌ꎮ 由图 １ 菌属(Ｐｈａｅｏｃｏｌｌｙｂｉａ)呈负显著相关(Ｐ<０.０５)ꎬ ＴＫ、
可知ꎬ不同海拔之间元宝山冷杉根际土壤微生物 ＴＰ 与 Ｃｅｎｏｃｏｃｃｕｍ 呈正显著相关(Ｐ<０.０５)ꎻＮ ∶ Ｐ、
