Page 83 - 《广西植物》2026年第9期
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９ 期 刘玉婷等: 水华蓝藻———蒙氏浮丝藻的多相特征及分子系统研究 １ ５ １ ９
于多 相 分 类 方 法 将 浮 丝 藻 属 归 于 微 鞘 藻 科ꎬ 株转移到含有 １０ ｍＬ 无菌 ＣＴ 培养基的螺口管中
Ｓｔｒｕｎｅｃｋ 等(２０２３) 的新分类系统维持了这一分类 进行培养ꎬ每 １ ~ ２ 个月进行 １ 次藻种转接ꎮ
地位ꎮ
尽管国际上已逐步建立浮丝藻属的多相分类
体系ꎬ但是我国相关研究仍缺乏系统性ꎮ 我国浮
丝藻属研究始于陈宇炜等( ２００３) 对此属名的译
介ꎬ胡鸿钧和魏印心(２００６) 正式采用“ 浮丝藻属”
译名并记录 ３ 个物种ꎮ 截至目前ꎬ中国正式记录
的浮丝 藻 属 物 种 仅 有 ４ 种ꎬ 分 别 为 阿 氏 浮 丝 藻
( Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ ａｇａｒｄｈｉｉ )、 蒙 氏 浮 丝 藻 ( Ｐ.
ｍｏｕｇｅｏｔｉｉ)、假阿氏浮丝藻( Ｐ. ｐｓｅｕｄａｇａｒｄｈｉｉ) 和螺
旋浮丝藻(Ｐ. ｓｐｉｒｏｉｄｅｓ)ꎬ并且主要集中在富营养湖
泊(如太湖、滇池等) ( 林燊等ꎬ ２００８ꎻ Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ
２０１０ꎻＬｉｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３)ꎮ 然而ꎬ华南亚热带地区ꎬ
因其独特的气候条件( 高温、高湿、水体富营养化
比例较高)ꎬ可能成为浮丝藻属物种多样性的潜在
热点区域ꎬ但迄今尚未见系统调查ꎮ 图 １ 采样时蒙氏浮丝藻宏观群落
为揭示多相分类方法在厘清形态保守类群地 Ｆｉｇ. １ Ｍａｃｒｏ￣ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｏｆ Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ
理分布与系统发育关系中的关键作用ꎬ本研究以 ｍｏｕｇｅｏｔｉｉ ａｔ ｓａｍｐｌｉｎｇ
广西典型亚热带富营养化水体中分离的浮丝藻属
藻株 ＷＺＵ２３１４ 为 对 象ꎬ 整 合 形 态 学 观 察、 １６Ｓ １.２ 藻株的形态观察及藻类细胞特征测量
ｒＲＮＡ 基因系统发育分析及内转录间隔区( ｉｎｔｅｒｎａｌ 使用 ＬＥＩＣＡ ＤＭ２０００ ＬＥＤ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ 光学 显
ｔｒａｎｓｃｒｉｅｄ ｓｐａｃｅꎬＩＴＳ)二级结构解析ꎬ探讨以下科学 微镜(ＬＥＩＣＡꎬＧｅｒｍａｎｙ) 在 ４００ 倍下观察藻株的形
问题:(１)在传统形态鉴别特征高度重叠的浮丝藻 态特征ꎬ并利用 Ｌｅｉｃａ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｕｉｔｅ Ｘ ３.７.４ 拍
属内ꎬ如何通过构建“ 形态－系统发育－分子结构” 摄藻株 ＷＺＵ２３１４ 的形态学特征和测量藻株的细
三位一体的证据链ꎬ实现对藻株 ＷＺＵ２３１４ 种级分 胞大小(图 ２)ꎮ 随机选择 １００ 根藻丝测量营养细
类地位的准确界定ꎻ(２)该藻株被确认为蒙氏浮丝 胞的长与宽ꎮ 参考 Ｓｕｄａ 等(２００２) 的研究方法对
藻ꎬ其在广西亚热带富营养化水体中的出现ꎬ如何 本藻株进行形态学鉴定ꎮ
丰富我们对该物种地理分布范围的理解ꎮ １.３ 藻株基因组 ＤＮＡ 的提取和目的基因的克隆及
测序
１ 材料与方法 采 用 改 良 后 的 十 六 烷 基 三 甲 基 溴 化 铵
(ＣＴＡＢ) 法 提 取 纯 培 养 藻 株 ＤＮＡ ( Ｎｅｉｌａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ
１.１ 样品的采集、藻种分离及培养 １９９５)ꎮ 使用扩增引物 ＰＡ(５′￣ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧ
在广西南宁市区某富营养化河流ꎬ使用网孔 ＧＣＴＣＡＧ￣３′)和 Ｂ２３Ｓ(５′￣ＣＴＴＣＧＣＣＴＣＴＧＴＧＴＧＣＣＴ
６４ μｍ 浮游生物网以∞ 字形拖网法采集表层水体 ＡＧＧＴ￣３′)对 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因及 ＩＴＳ 基因进行扩增
(图 １)ꎬ收集的样品放置在 ４ ℃ 中密封并运送到 (Ｇｋｅｌｉｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)ꎮ ＰＣＲ 扩增反应采用 ５０ μＬ
实验室ꎮ 使用巴斯德毛细管在 ４０ 倍倒置显微镜 反应体系ꎬ包含 １ μＬ 藻株基因组 ＤＮＡ、正反两端
(徕卡 ＬＥＩＣＡ Ｍｏｄｅｌ ＤＭＩＬ ＬＥＤ ＦｌｕＯꎬ Ｇｅｒｍａｎｙ) 下 引物 各 １ μＬ、２２ μＬ 无 菌 水、２５ μＬ ２ × Ｔａｑ Ｐｌｕｓ
挑取单根藻丝ꎬ在无菌水中多次清洗后转移到含 Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ(含染料)(购自中国南京诺唯赞生物科
无菌 ＣＴ 培养基的 ２４ 孔板中培养ꎮ 将分离到的藻 技有限公司)ꎮ 扩增程序:９５ ℃ 预变性 ５ ｍｉｎꎻ９５
种置于温度 ２５ ℃ 、光照强度 ２６ μｍｏｌｍ ｓ 、光 ℃ 变性 ３０ ｓꎬ５５ ℃ 退火 ３０ ｓꎬ７２ ℃ 延伸 ２ ｍｉｎꎬ３１
￣１
￣２
个循环ꎻ７２ ℃ 最终延伸 １０ ｍｉｎꎮ 对 ＰＣＲ 扩增产物
暗周期 １２ ｈ ∶ １２ ｈ 的培养箱中培养ꎮ ２ ~ ３ 周后ꎬ
检查是否存在污染ꎮ 若无污染ꎬ则将孔中的纯藻 进行琼脂糖凝胶电泳检测ꎬ并用天根生化科技( 北
