Page 87 - 《广西植物》2020年第10期
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１ ４ ７ ０ 广 西 植 物 ４０ 卷
表 ２ 不同处理对染色体分离效果的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ
项目 处理 染色体分离效果
Ｉｔｅｍ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ
取材时间 ８:３０—９:００ 良好 Ｇｏｏｄ
Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｔｉｍｅ ２０:００—２０:３０ 一般 Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ
根尖长度 ０.５ ｃｍ 一般 Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ
Ｒｏｏｔ ｔｉｐ ｌｅｎｇｔｈ １ ~ １.５ ｃｍ 良好 Ｇｏｏｄ
２ ~ ４ ｃｍ 差 Ｐｏｏｒ
预处理 ０.０５％秋水仙素溶液 ４ ｈ 差 Ｐｏｏｒ
Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ０.０５％ ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｒ ４ ｈ 一般 Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ
０ ℃ 冰水混合物 ２４ ｈ 良好 Ｇｏｏｄ
０ ℃ ｉｃｅ ｗａｔｅｒ ｍｉｘｔｕｒｅ ｆｏｒ ２４ ｈ
￣１
０.００２ ｍｏｌＬ ８￣羟基喹啉溶液 ５ ｈ
￣１
０.００２ ｍｏｌＬ ８￣ｈｙｄｒｏｘｙｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｒ ５ ｈ
解离时间 ２ ｍｉｎ 一般 Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ
Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ４ ｍｉｎ 良好 Ｇｏｏｄ
６ ｍｉｎ 差 Ｐｏｏｒ
数目一致ꎬ均为二倍体 ２ｎ ＝ ２ｘ ＝ ３６(表 ３)ꎮ 率较高ꎬ如橡胶草( Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｋｏｋ￣ｓａｇｈｙｚ) ( 杨玉双
２.３ 石山苣苔属和报春苣苔属染色体数目的演变 等ꎬ２０１７)、 白 刺 花 ( Ｓｏｐｈｏｒａ ｄａｖｉｄｉｉ) ( 雷 文 英 等ꎬ
根据石山苣苔属和报春苣苔属染色体数目的 ２０１７)、 黄 花 芥 蓝 [ ｙｅｌｌｏｗ￣ｆｌｏｗｅｒ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｋａｌｅ
祖先状态重建结果( 图 ５)ꎬ还不能确定石山苣苔 (Ｂｒａｓｓｉｃａ ａｌｂｏｇｌａｂｒａ)](夏雪等ꎬ２０１６) 等ꎮ 本研究
属祖先、报春苣苔属祖先和两属的最近共同祖先 中ꎬ石山苣苔属植物取材时间为 ８:３０—９:００ 时ꎬ
的染色体条数ꎮ 在石山苣苔属内部ꎬ出现一次染 中期分裂相较多ꎬ这与大多数植物常规取材时间
色体数目由 ２ｎ ＝ ３６ 到 ２ｎ ＝ ２０ 的演化ꎮ 在报春苣 一致ꎮ 此外ꎬ根尖长度对分裂相的多少也有明显
苔属的内部ꎬ虽然祖先状态重建未能直接确定唯 影响ꎮ 前人研究表明ꎬ北柴胡(Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｃｈｉｎｅｎｓｅ)
一在弄岗报春苣苔中出现的 ２ｎ ＝ ７２ 与其余所有 的根尖长度为 ０.５ ~ １ ｃｍ 时ꎬ中期分裂相较多( 何
２ｎ ＝ ３６ 之间的演化方向ꎬ但根据常理判断ꎬ前者显 倚 涟 等ꎬ ２０１８ )ꎻ 青 花 菜 ( Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒ.
然由后者经历基因组加倍形成ꎮ ｉｔａｌｉｃａ)的根尖长度为 １.３ ~ １.５ ｃｍ 时ꎬ中期分裂相
最多(张红梅等ꎬ２００９)ꎻ不结球白菜( Ｂ. ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ
３ 讨论与结论 ｓｓｐ. ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)的根尖长度为 １ ~ ２ ｃｍ 时ꎬ中期分裂
相数目较多(郑金双等ꎬ２０１１)ꎮ 本研究结果表明ꎬ
３.１ 石山苣苔属染色体标本制备条件的优化 石山苣苔属根尖长度为 １ ~ １.５ ｃｍ 时ꎬ中期分裂相
石山苣苔属植物为小型染色体ꎬ染色体较小 较多ꎮ
的植物根尖组织压片后染色体不易分散且难以观 预处理是染色体制片过程的关键环节ꎬ由于
察到清晰的染色体形态ꎬ 因此对其取样时间和根 植物自身存在的差异ꎬ在实验过程中预处理液及
尖长度、预处理方法及酸解时间进行了优化研究ꎮ 预处理时间也存在着差别( 刘丹等ꎬ２０１５)ꎮ 本研
染色体制片若要获得较多的分裂相ꎬ需保证 究对比不同预处理液的制片效果后认为ꎬ四种( 含
植物细胞处于旺盛的有丝分裂期ꎬ因此需要找到 一变种)石山苣苔属植物采用 ０.００２ ｍｏｌＬ ８￣羟
￣１
最佳的取材时间点ꎬ同时控制好根尖长度ꎮ 前人 基喹啉溶液作为预处理液制片效果最好ꎮ 这与李
研究表明ꎬ大多数植物在 ８:００—１１:００ 内的某个 懋学和张赞平( １９９６) 提出的多种小染色体植物
时间段内取材ꎬ中期分裂相较多ꎬ染色体制片成功 如大豆( Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ) 、水稻( Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ) 等宜用
