Page 33 - 《广西植物》2020年第3期
P. 33
３ 期 李蜜等: 海南西海岸真红树内生细菌多样性及其延缓衰老活性研究 ３ １ ３
表 １ 样品采集信息
Ｔａｂｌｅ １ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｓａｍｐｌｅｓ
样品编号 植物名称 植物组织
Ｓａｍｐｌｅ ｃｏｄｅ Ｐｌａｎｔ ｎａｍｅ Ｐｌａｎｔ ｔｉｓｓｕｅ
Ｈ１ 桐花树 茎、叶、胚轴
Ａｅｇｉｃｅｒａｓ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｍ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ２ 红海榄 花、茎、叶、胚轴、根
Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ ｓｔｙｌｏｓａ Ｂｌｏｓｓｏｍꎬ ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆꎬ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒｏｏｔ
Ｈ３ 榄李 茎、叶、胚轴
Ｌｕｍｎｉｔｚｅｒａ ｒａｃｅｍｏｓａ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ４ 白骨壤 花、茎、叶、胚轴
Ａｖｉｃｅｎｎｉａ ｍａｒｉｎａ Ｂｌｏｓｓｏｍꎬ ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ５ 桐花树 茎、叶、胚轴、根
Ａｅｇｉｃｅｒａｓ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｍ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆꎬ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒｏｏｔ
Ｈ６ 白骨壤 茎、叶、胚轴
Ａｖｉｃｅｎｎｉａ ｍａｒｉｎａ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ７ 红海榄 茎、叶、胚轴、根
Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ ｓｔｙｌｏｓａ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆꎬ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒｏｏｔ
Ｈ８ 白骨壤 茎、叶
Ａｖｉｃｅｎｎｉａ ｍａｒｉｎａ Ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ
Ｈ９ 木果楝 茎、叶、胚轴、根
Ｘｙｌｏｃａｒｐｕｓ ｇｒａｎａｔｕｍ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆꎬ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒｏｏｔ
Ｈ１０ 瓶花木 茎、胚轴
Ｓｃｙｐｈｉｐｈｏｒａ ｈｙｄｒｏｐｈｙｌｌａｃｅａ Ｓｔｅｍ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ１１ 桐花树 茎、叶、胚轴
Ａｅｇｉｃｅｒａｓ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｍ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ１２ 红树 茎、叶、胚轴、根
Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ ａｐｉｃｕｌａｔａ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆꎬ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒｏｏｔ
Ｈ１３ 木榄 茎、叶、胚轴
Ｂｒｕｇｕｉｅｒａ ｇｙｍｎｏｒｒｈｉｚａ Ｓｔｅｍꎬ ｌｅａｆ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
Ｈ１４ 卤蕨 茎、叶
Ａｃｒｏｓｔｉｃｈｕｍ ａｕｒｅｕｍ Ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ
秀丽隐杆线虫( Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ)、ＯＰ５０ 尿嘧 表 ２ 分离培养基信息
啶缺陷型大肠杆菌(Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ) 均由广西科学 Ｔａｂｌｅ ２ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｍｅｄｉａ
院汪斌博士提供ꎮ 培养基 培养基配方
１.２ 方法 Ｍｅｄｉｕｍ Ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
１.２.１ 分 离 培 养 基 分 离 培 养 基 参 考 李 飞 娜 等 ＡＧＧ 淀粉 １０ ｇꎬ葡萄糖 １ ｇꎬ甘油 ５ ｍＬ
Ｓｔａｒｃｈ ｓｏｌｕｂｌｅ １０ ｇꎬ ｇｌｕｃｏｓｅ ａｎｈｙｄｒｏｕｓ １ ｇꎬ ｇｌｙｃｅｒｏｌ ５ ｍＬ
(２０１７)设计如下 ９ 种ꎬＡＧＧ:改良的高氏培养基ꎻ
Ｍ４ Ｌ－天冬酰胺 １ ｇꎬ海藻糖 ５ ｇ
Ｍ４:海藻糖－天冬酰胺培养基ꎻＭ５:海藻糖－脯氨酸 Ｌ￣Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ １ ｇꎬ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ５ ｇ
培养基ꎻＭ７:改良 ＩＳＰ５ 培养基ꎻＭ９:精氨酸 －天冬 Ｍ５ 海藻糖 ５ ｇꎬ脯氨酸 １ ｇ
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ５ ｇꎬ ｐｒｏｌｉｎｅ １ ｇ
酰胺培养基ꎻＭ１０:改良 淀 粉 － 水 解 酪 素 培 养 基ꎻ Ｍ７ 酵母粉 ５ ｇꎬＬ－天冬酰胺 １ ｇꎬ甘油 １０ ｍＬ
Ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ ５ ｇꎬ Ｌ￣Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ １ ｇꎬ ｇｌｙｃｅｒｏｌ １０ ｍＬ
Ｐ７:酪氨酸 － 天 冬 酰 胺 培 养 基ꎻＰ３:燕 麦 培 养 基ꎻ
Ｍ９ 精氨酸 １ ｇꎬＬ－天冬酰胺 １ ｇꎬ甘油 １６ ｍＬ
Ｍ１１:棉籽糖－组氨酸培养基ꎮ 详细配方信息如表 Ａｒｇｉｎｉｎｅ １ ｇꎬ Ｌ￣Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ １ ｇꎬ ｇｌｙｃｅｒｏ １６ ｍＬ
２ 所示ꎬ每种培养基加入 １ Ｌ 海水、１０ ｍＬ 的复合盐 Ｍ１０ 葡萄糖 １０ ｇꎬ酸水解酪素 ０.５ ｇ
Ｇｌｕｃｏｓｅ ａｎｈｙｄｒｏｕｓ １０ ｇꎬ ｇａｓｅｉｎ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ０.５ ｇ
溶液和 ２０ ｇ 的琼脂ꎬ调节 ｐＨ７.２ꎬ均于 １２１ ℃ 下灭
Ｐ７ Ｌ－络氨酸 ０.５ ｇꎬＬ－天冬酰胺 １ ｇꎬ甘油 １５ ｍＬ
菌 ２０ ｍｉｎ( 复合盐溶液:ＫＮＯ １.０ ｇꎬＮａＣｌ ０.５ ｇꎬ Ｌ￣Ｔｙｒｏｓｉｎｅ ０.５ ｇꎬ Ｌ￣Ａｓｐａｒａｇｉｎｅ １ ｇꎬ ｇｌｙｃｅｒｏｌ １５ ｍＬ
３
Ｐ３ 燕麦粉琼脂 ２０ ｇ
ＭｇＳＯ ７Ｈ Ｏ ０.５ ｇꎬＫ ＨＰＯ ０.５ ｇꎬＮＨ ＮＯ ０.１ ｇꎬ
４ ２ ２ ４ ４ ３ Ｏａｔｅｍｅａｌ ａｇａｒ ２０ ｇ
ＦｅＳＯ ０.０１ ｇꎬＭｎＣｌ Ｈ Ｏ ０.００１ ｇꎬＺｎＳＯ ７Ｈ Ｏ Ｍ１１ 棉籽糖 ５ ｇꎬＬ－组氨酸 １ ｇ
４ ２ ２ ４ ２
０.００１ ｇ 和去离子水 １０ ｍＬ)ꎮ 待培养基温度降至 Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ｐｅｎｔａｈｙｄｒａｔｅ ５ ｇꎬ Ｌ￣Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ １ ｇ
