Page 98 - 《广西植物》2020年第3期
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３ ７ ８ 广 西 植 物 ４０ 卷
叶片结构采用常规徒手切片法ꎬ在光学显微 定设 ３ 个重复ꎮ
镜下观察并测量叶片、海绵和栅栏组织的厚度、上 １.２.２.４ 抗氧化酶活性和植物总酚的测定 以下测
表皮厚度、气孔保卫细胞的大小和气孔密度ꎮ 根 定均设 ３ 个重复ꎮ 植物总抗氧化能力( Ｔ￣ＡＯＣ) 采
据气孔密度和气孔长度计算气孔面积指数( ＳＰＩ)ꎬ 用铁离子还原抗氧化能力分析法( ＦＲＡＰ) 测定( 蔡
３＋
２ 庆生ꎬ２０１３)ꎮ 在酸性条件下ꎬＦｅ ￣三吡啶三吖嗪
气孔面积指数 ＝ 气孔密度×气孔长 ꎮ
利用 Ｌｅｉｃａ ＲＭ２２３５ 切片机获取枝条横切面上 (ＴＰＴＺ)被还原为 Ｆｅ ￣ＴＰＴＺꎬ呈蓝色ꎬ在 ５９３ ｎｍ 处
２＋
２０ μｍ 厚的完整薄片ꎬ放在 Ｌｅｉｃａ ＤＭ４０００Ｂ 显微镜 有最大吸收值ꎮ 超氧化物歧化酶( ＳＯＤ) 活性采用
获取导管直径照片ꎮ 采用 Ｉｍａｇｅ Ｊ 软件分析出导 氮蓝四唑法测定ꎬ以在反应体系中抑制百分率为
￣１
管直径和导管密度ꎬ木质部密度 ＝ 干质量 / 鲜体积ꎬ ５０％时为一个酶 活 性 单 位 ( Ｕ ｇ 鲜 重) ( 邹 琦ꎬ
５ 个枝条的木质部密度平均值即为银毛树的平均 ２０００)ꎮ 过氧化氢酶( ＣＡＴ) 活性采用紫外吸收法
木质部密度(李荣等ꎬ２０１６)ꎮ 测定ꎬ以每克组织 １ ｍｉｎ 内催化 １ ｎｍｏｌ 过氧化氢降
￣１
枝条潜在最大导水率测定:采用冲洗法ꎬ取 ２０ 解为一个酶活性单位(Ｕｇ 鲜重)(邹琦ꎬ２０００)ꎮ
ｃｍ 枝条放入装满水的烧杯中ꎬ套上黑色塑料袋ꎬ 总酚含量采用福林酚比色法测定( Ｌａｍｕｅｌａ￣
待枝条水分充分饱和后ꎬ即用 ５０ ｃｍ 高的龙头冲洗 Ｒａｖｅｎｔóｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ１９９９)ꎬ在碱性条件下ꎬ酚类物质将
后测定最大导水率ꎬ其稳定的最大导水率能够在 钨钼酸还原ꎬ产生蓝色化合物ꎬ在 ７６０ ｎｍ 峰值吸
一定程度上反映枝条木质部潜在导水率( Ｒｅｎ ｅｔ 收最大ꎮ
ａｌ.ꎬ １９９７)ꎮ 枝条最大导水率公式为 Ｋ ＝ Ｗ / ＡΔｔꎮ １.２.３ 叶片元素及同位素测定 在野外采取新鲜叶
ｍａｘ
式中: Ｋ 为 反 复 冲 洗 后 枝 条 最 大 导 水 率 ( ｇ 片ꎬ带回实验室用烘箱 ６０ ℃ 烘干ꎮ 叶片全氮含量
ｍａｘ
ｃｍ ｓ ＭＰａ )ꎻＷ 为枝条在一定时段内的导水 (ＴＮ)采用凯氏定氮法测定ꎬ叶片全磷含量(Ｐ)采用
￣２
￣１
￣１
量( ｇ)ꎻ ｔ 为 导 水 历 时 ( ｓ)ꎻ Ａ 为 枝 条 横 截 面 积 钼锑抗比色法测定ꎬ叶片总有机碳含量(ＴＯＣ) 采用
２ 重铬酸钾氧化－硫酸氧化法测定ꎮ δ Ｃ的测定采用
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(ｃｍ )ꎮ 测定设 ５ 个重复ꎮ
枝条空腔比( 导管面积 / 木质部面积) (％) ＝ 同位素质谱仪( ＩｓｏＰｒｉｍｅ１００ꎬＩｓｏ￣ＰｒｉｍｅꎬＭａｎｃｈｅｓｔｅｒꎬ
导管面积×导管数量 / 枝条横截面面积ꎬ脆性指数 ＵＫ)进行元素分析ꎬ碳同位素比值采用千分比单位
(ＶＩ)＝ 导管直径 / 导管密度( 张超男等ꎬ２０１４)ꎮ 测 (‰)ꎬ用 δ 表示ꎮ 根据国际标准公式计算ꎬδ(‰) ＝
定设 ５ 个重复ꎮ [(Ｒ / Ｒ )－１] × １ ０００ꎮ 式中:Ｒ 表示样品的相
ｓａｍ ｓｔｄ ｓａｍ
１.２.２ 生理特征测定 对丰度ꎻＲ 表示国际标准物的相对丰度ꎮ 碳同位素
ｓｔｄ
１.２.２.１ 叶绿素含量测定 以 ８０％的丙酮浸提叶片 国际标准物为 Ｐｅｅ Ｄｅｅ Ｂｅｌｅｍｎｉｔｅ(ＰＤＢ)ꎬ即美国南
样品ꎬ用紫外分光光度计( ＵＶ￣３８０２ꎬＵｎｉｃｏ) 分别于 卡罗来纳州白垩系皮狄组地层中的美洲拟箭石
６６３ ｎｍ 和 ６４５ ｎｍ 处测定吸光度ꎬ计算叶片的叶绿 (Ｒ ＰＤＢ ＝ ０.０１１２３７２ꎬδ Ｃ ＰＤＢ ＝ ０‰)(熊鑫等ꎬ２０１６)ꎮ
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素 ａ、叶绿素 ｂ、总叶绿素含量及叶绿素 ａ / ｂ 的比值 １.２.４ 土壤理化性质测定 清除银毛树植株根际
(林植芳等ꎬ１９８４)ꎮ 测定设 ３ 个重复ꎮ 地表凋落物ꎬ取 ６ 个 ０ ~ ２０ ｃｍ 的表层土ꎬ放入密封
１.２.２.２ 可溶性蛋白和脱落酸(ＡＢＡ)的测定 可溶 袋低温保存ꎬ带回实验室风干ꎬ过 ２ ｍｍ 筛ꎮ 土壤
性蛋白采用考马斯亮蓝法ꎬ叶片提取液 ０.１ ｍＬ 加 理化性质的测定指标ꎬ参照土壤理化分析标准( 刘
考马斯亮蓝试剂 ２.５ ｍＬ 混合后用紫外分光光度计 光崧ꎬ１９９６)进行ꎮ
(ＵＶ￣３８０２ꎬＵｎｉｃｏ) 比色ꎬ波长为 ５９５ ｎｍꎬ以试剂空 １.３ 数据处理
白调零ꎬ读取吸光度( 关岚岚等ꎬ２００８)ꎻＡＢＡ 采用 数据整理分析及作图采用软件 Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ ｏｆｆｉｃｅ
高效液相色谱法( 孙崇臻等ꎬ２０１３) 测定ꎮ 各测定 Ｅｘｃｅｌ ２０１０ 和 Ａｄｏｂｅ Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ ＣＣ ２０１５ 进行ꎮ
设 ３ 个重复ꎮ
１.２.２. ３ 脯 氨 酸 和 丙 二 醛 含 量 的 测 定 脯 氨 酸 ２ 结果与分析
(Ｐｒｏ)含量采用磺基水杨酸提取、酸性茚三酮染色
法测定ꎬ在 ５２０ ｎｍ 处读取吸光值ꎻ丙二醛( ＭＤＡ) ２.１ 形态解剖学特征
含量采用硫代巴比妥酸法测定ꎬ读取 ５３２ ｍ 和 ６００ 在野外调查中发现银毛树具有肉质的叶片ꎬ
ｎｍ 处的吸光值并计算差值(孙群等ꎬ２００６)ꎮ 各测 上下表面被一层厚密的白色绢毛ꎬ起着防止失水
