Page 86 - 《广西植物》2021年第4期

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জজ 环阿屯醇ྉ ዹᢃዹ᤟ᆍᑕʢᡷᔀႿᆍ᤟ɯ 为植物甾醇类化合
物ᖔ广泛分布于植物中ᤥ 近年来研究发现环阿屯 ϟজ 材料与方法
醇具有明显的抗炎ྉ ዶҴᔽၤᔽ༁ᑕ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡԡԡɯܦ抗氧化

ྉ᧧༁᤟ᑕቝ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡԡँɯܦ抗肿瘤ྉ۪ʢᑕҴᑕ༁ၤ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡԡ࿗ɯܦ ϓॹϓ 试验材料
调节胆固醇ྉ èࣼҴࣼᆍҴᑕ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡϟ࿗ɯ 等药理活性ଫ它 滇牡丹ྉۗᐹᓣᅳႥᔠᐹ ʐᓣᤀᐹצᐹᡥᔠɯ 种植于云南省林业
还是重要的药物中间体和先导化合物ᖔ是菜油甾 科学院苗圃基地ᤥ 采集滇牡丹的根ܦ茎ܦ叶ܦ种子ܦ
醇ྉዹᑕቝᡱᔀ༁ᡷᔀʢᆍ᤟ɯ等植物甾醇及甾体皂苷等化合物 花蕊ܦ花芽ྉ 花完全被花萼包裹ɯܦ花蕾ྉ 露出花

生物及半化学合成的关键前体物质ྉ 张忠廉等ᖔ 瓣ɯ及花开ྉ 花瓣全部展开ɯܦ花谢ྉ 花瓣 开始枯
԰ԡϟᎮɯᤥ 环阿屯醇的含量高低决定了植物甾醇类 萎ɯ时期的花瓣ᖔ立即用液氮冷冻保存ᤥ
化合物的生物合成效率ଫ此外ᖔ环阿屯醇对植物的 ϓॹԣ ቴટዛ 提取与 ዞᦵટዛ 合成

生长发育具有显著影响ྉ᥈ᑕ༁᥋۪ᑕ༁ዹࣼᑕ᤟ ᔀᡷ ᑕ᤟ᖔ԰ԡϟ࿗ɯᤥ 先用植物总 ኏શዶ 提取试剂盒提取滇牡丹根ܦ
环阿屯 醇 合 成 酶 ྉ ዹᢃዹ᤟ᆍᑕʢᡷᔀႿᆍ᤟ ༁ᢃႿᡷၤᑕ༁ᔀᖔ 简称 茎ܦ叶ܦ种子及各发育期花的总 ኏શዶଫ然后再用浓

ऊዶ୩ɯ属 于 氧化鲨烯环化酶 ྉ ᆍ଴ᔽʛᆍ ༁ीࣼᑕ᤟ᔀႿᔀ 度为 ϟᠮ的琼脂糖凝胶电泳完成 ኏શዶ 质量检测ᖔ
ዹᢃዹ᤟ᑕ༁ᔀᖔᨃ୩ऊɯ家族ᖔ该合成酶基因是合成环阿屯醇 用 શᑕႿᆍ᧕ʢᆍᡱ ԰ԡԡԡ 检测 ኏શዶ 浓度ଫ 再反转录成
ఋᥘ
和合成植物甾醇及甾体类物质的关键调控基因 ዹ᧕શዶᖔ保存于ͱ԰ԡ ቩ 冰箱中备用ᤥ
ྉ张忠廉等ᖔ԰ԡϟᎮଫ刘梦迪等ᖔ԰ԡϟँɯᤥ 目前ᖔ已有 ϓॹᇺ ۗʐࣷዛ୒ 基因的克隆
԰ԡ 多种植物的 ࣷዛ୒ 基因被分离和克隆出来ᖔ如刺 采用仙客来ྉ ࣷᡥዞᤀᐹቂᓣႥ ᡓᓣʗ໧ᔠዞࣩቂɯ 的 ࣷዛ୒ 基因

五加ྉጛᤀᓣࣩᡙ၊ᓣʗᅳዞᅳዞዞࣩ໧ ໧ᓣႥᡙᔠዞᅳ໧ࣩ໧ɯྉ邢朝斌等ᖔ԰ԡϟ԰ɯܦ 为模板ᖔାᓂዶ୩ఋ 搜索滇牡丹花瓣的转录组数据ᖔ得
丹参ྉ ୒ᐹᤀצᔠᐹ ቂᔠᤀᡙᔠᅳʗʗ၊ᔠऊᐹɯྉ 李珍等ᖔ԰ԡϟሕɯ 和黄芪 到滇 牡丹的环阿屯醇合成酶基因 ྉ ۗʐࣷዛ୒ɯ 的

ྉዛ໧ᡙʗᐹ੖ᐹᤀࣩ໧ ቂᓣቂᤇʗᐹႥᐹዞᓣࣩ໧ɯ ྉ ऊၤᔀႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡϟጢɯ 等ᖔ ዹ᧕શዶ 序列ᖔ以该序列为基础ᖔ设计含有起始密码
有些还通过异源表达进行了功能验证ᤥ 但是至今 子和 终 止 密码子的特异引物 ྉ۪ʛऊዶ୩ϟè᧥ ጢࣕ᥋
未见到关于滇牡丹ྉ ۗᐹᓣᅳႥᔠᐹ ʐᓣᤀᐹצᐹᡥᔠɯ 环阿屯醇合 ዶఋ᥈ఋ᥈᥈ዶዶ᥈ऊఋ᥈ዶዶ᥈ዶఋऊ᥈ऊ᥋ሕࣕ 和 ۪ʛऊዶ୩ϟ኏᧥ ጢࣕ᥋

成酶基因的相关研究ᤥ ఋऊዶ᥈᥈ዶ᥈ዶऊఋఋ᥈ऊዶዶఋዶऊऊऊ᥋ሕࣕɯᤥ 用滇牡丹花瓣
滇牡 丹 ྉ ۗᐹᓣᅳႥᔠᐹ ʐᓣᤀᐹצᐹᡥᔠ ɯ 是芍药科 ዹ᧕શዶ 为模板ᖔ۪ʛऊዶ୩ϟè 和 ۪ʛऊዶ୩ϟ኏ 为引物ᖔ 以
ྉ۪ᑕᔀᆍႿᔽᑕዹᔀᑕᔀɯ芍药属ྉۗᐹᓣᅳႥᔠᐹɯ 植物ᤥ 芍药属植物 ጶᑕ༁ᢃ۪஦ࣼ ᧕શዶ 聚合酶扩增得到 ۗʐࣷዛ୒ 全基因片段ᤥ
根皮是一种传统中药材ᖔ通常称其为ᥥ牡丹皮ɼ或者 经过电泳检测后将目的片段连接到 ᡱ᥈ᥘఋ 载体上ᖔ
ᥥ丹皮ɼᖔ所含主要有效成分为酚类ྉ如丹皮酚ɯܦ萜 经 ۪ऊ኏ 检测ᖔ送往上海生工进行测序ᤥ
类ܦ苷类ྉ如芍药苷ɯܦ鞣质等ᖔ具有抗凝血ܦ降压ܦ抗 ϓॹ྽ ۗʐࣷዛ୒ 基因蛋白序列分析
炎ܦ抑制中枢神经系统等功能ᤥ 作为芍药属的一个 先获得滇牡丹 ۗʐࣷዛ୒ 基因 ዹ᧕શዶ 序列ᖔ利用
牡丹类群ᖔ滇牡丹也被视为一种民族药材被广泛使 શऊା᧧ ྉ ၤᡷᡷᡱ᧥ ᣰ ᣰ औऔऔ঎ Ⴟዹᤦᔽ঎ Ⴟ᤟ቝ঎ Ⴟᔽၤ঎ ੫ᆍ׹ ᣰ ɯ 上的 ᨃ኏è
用ᖔ其根皮具有抗菌活性ᖔ 可用于镇痛ܦ镇静ܦ抗炎 èᔽႿʛᔀʢ ྉ ၤᡷᡷᡱ༁᧥ ᣰ ᣰ औऔऔ঎ Ⴟዹᤦᔽ঎ Ⴟ᤟ቝ঎ Ⴟᔽၤ঎ ੫ᆍ׹ ᣰ ᆍʢ஦஦ᔽႿʛᔀʢ ᣰ ɯ

及女性疾病的治疗ྉۼࣼ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡԡ԰ɯᤥ 分析获得其蛋白氨基酸序列ᖔ并用 ۪ʢᆍ۪ᑕʢᑕቝ 预测
本研究在滇牡丹转录组测序的基础上ᖔ成功 其蛋白的理化性质ଫ然后通过 શऊା᧧ 对环阿屯醇合
克隆得到滇牡丹环阿屯醇合成酶ྉऊዶ୩ɯ 基因ᖔ并 成酶 ۗʐࣷዛ୒ 基因的蛋白氨基酸序列进行搜索ᖔ选
进行生物信息学分析ܦ系统进化树构建及表达分 择与 ۪ʛऊዶ୩ 蛋白序列同源性较高的植物环阿屯醇
析ᖔ为进一步研究环阿屯醇合成酶基因在滇牡丹 合成 酶蛋白序列ଫ 再用 ᥘጶ᥈ዶ ᤃ঎ ԡ 构建系统进

中的功能奠定基础ᤥ 化树ᤥ