Page 100 - 《广西植物》2021年第7期

Ꭾ 期 赵玉瑛等᧥ 剑叶龙血树内生真菌的分离及体外抑菌活性筛选 ϟ ϟ ԰ ँ
同源序列ᖔ选出与该序列相关性较高的核酸序列ᖔ 表 ϓই 剑叶龙血树内生真菌抑菌活性初筛结果
进行多序列比对分析ᖔ采用 ᥘጶ᥈ዶ ᤃ঎ԡྉ શȮ 法ɯ 构 ఋᑕᤦ᤟ᔀ ϟজ ዶႿᡷᔽቝᔽዹʢᆍᤦᔽᑕ᤟ ᑕዹᡷᔽ׹ᔽᡷᔽᔀ༁ ᆍ஦ ᔀႿʛᆍᡱၤᢃᡷᔽዹ ஦ࣼႿ੫ᔽ
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建系统发育进化树ྉ杨明俊等ᖔ԰ԡϟ࿗ɯᤥ
内生真菌所占比例
԰জ 结果与分析 指示菌编号 ۪ʢᆍᡱᆍʢᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ᔀႿʛᆍᡱၤᢃᡷᔀ༁ ྉᠮɯ
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总数
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ԣॹϓ 剑叶龙血树内生真菌的分离
大肠杆菌 ϟሕ঎ऐ԰ ँሕ঎ԡԡ ᤃ԰঎ሕᎮ ࿗ँ঎ऐᤃ
从三份剑叶龙血树植物 样品中共分离得到 ጛ໧ዞ၊ᓣʗᔠዞ၊ᔠᐹ ዞᅳᤀᔠ ዶఋऊऊ ԰ጢँ԰԰
ሕ࿗ጢ 株内生真菌ᤥ 其中勐仑镇采集的叶片材料分 金黄色葡萄球菌 ጢԡ঎ᤃᤃ ँᤃ঎ԡԡ ँ԰঎࿗Ꭾ Ꭾጢ঎ԡጢ
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离得到 ϟጢ԰ 株ᖔ编号为 ାϟͱϟጢ԰ᖔ占总数的 ࿗࿗঎ԡጢᠮଫ
枯草芽孢杆菌 ϟጢ঎Ꭾँ Ꭾऐ঎ԡԡ ᤃऐ঎ऐ԰ ࿗ऐ঎ϟ԰
从热带花卉园采集的茎中分离得到 ϟԡԡ 株ᖔ编号 ଧᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ ໧ࣩᤇᡙᔠᤀᔠ໧ ዶఋऊऊ ᤃᤃሕሕ
铜绿假单胞菌 ԰ሕ঎ԡሕ ऐᎮ঎ԡԡ ᤃँ঎ऐँ ጢ࿗঎԰ԡ
为 ኏Ȯϟͱϟԡԡᖔ占总数的 ԰ऐ঎ँँᠮᖔ叶中分离得到 ँሕ
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株ᖔ编号为 ኏ɟϟͱँሕᖔ占总数的 ԰ᤃ঎ँᤃᠮᤥ 可见傣药 鼠伤寒沙门氏菌 ϟጢ঎Ꭾँ ᤃँ঎ԡԡ ᤃᎮ঎Ꭾ࿗ ࿗ጢ঎԰԰
剑叶龙血树中蕴藏着丰富的内生真菌资源ᤥ ୒ᐹᤀቂᅳႥᓣᤀᤀᐹ ᡙᡥᡓ၊ᔠቂࣩʗᔠࣩቂ ۫ ऐँጢᤃ
ԣॹԣ 优势菌株的筛选 肺炎克雷伯氏菌 ϟሕ঎ऐ԰ ऐሕ঎ԡԡ ጢँ঎ϟ࿗ ࿗ᤃ঎ԡँ
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对分离自剑叶龙血树的 ሕ࿗ጢ 株内生真菌进行 白色葡萄球菌 ϟሕ঎ऐ԰ ᤃँ঎ԡԡ ᤃሕ঎ᤃ ࿗ሕ঎ᎮᎮ
抗病原细菌ܦ抗病原真菌ܦ化学多样性及产量研 ୒ᡙᐹᡓ၊ᡥᤀᅳዞᅳዞዞࣩ໧ ᐹᤀᤇࣩ໧ ϟԡ԰ँ
耻垢分枝杆菌 ሕጢ঎ጢሕ ँ࿗঎ԡԡ Ꭾሕ঎ϟ԰ ᤃ԰঎ᤃϟ
究ᖔ拟筛选出兼具多种抗菌活性ᖔ且化学多样性丰 ᤹ᡥዞᅳᤇᐹዞᡙᓣʗᔠࣩቂ ໧ቂᓣ੖ቂᐹᡙᔠ໧ ϟԡሕᎮ
富ܦ产量较高的优势菌株ᤥ 筛选结果表明ᖔ分离自 鲍曼不动杆菌 ϟጢ঎Ꭾँ Ꭾँ঎ԡԡ ᤃጢ঎ጢँ ࿗Ꭾ঎ጢ࿗
云南省西双版纳勐腊县勐仑镇剑叶龙血树的菌株 ዛዞᔠႥᓣᡙᅳᤇᐹዞᡙᓣʗ ᤇᐹࣩቂᐹႥᔠᔠ ዶఋऊऊ ϟँᤃԡᤃ
粪肠球菌 ԰ϟ঎ԡጢ Ꭾँ঎ԡԡ ᤃሕ঎࿗࿗ ࿗ँ঎԰ऐ
ྉ样品编号为 ାɯᖔ其发酵产物在各种显色条件下 ጛႥᡙᓣʗᅳዞᅳዞዞࣩ໧ ஏᐹᓣዞᐹᤀᔠ໧ ዶఋऊऊ ԰ँ԰ϟ԰
条带 ᣰ 斑点数最多ᖔ预示着有丰富的代谢产物ᖔ且 白色念球菌的临床耐药菌 ϟ ԰ሕ঎ᤃऐ ᤃጢ঎ԡԡ Ꭾ࿗঎ϟँ ࿗ँ঎԰ऐ
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有 ϟԡँ 株菌ྉᎮϟ঎Ꭾϟᠮɯ对一种以上指示菌有抑制活
白色念球菌的临床耐药菌 ԰ ϟँ঎ԡऐ Ꭾሕ঎ԡԡ ᤃऐ঎ऐ԰ ࿗ऐ঎ϟ԰
性ଫ分离自云南省热带作物科学研究所ͱ西双版纳 ᧕ʢࣼ੫᥋ʢᔀ༁ᔽ༁ᡷᑕႿᡷ ࣷᐹႥʐᔠʐᐹ ᐹᤀᤇᔠዞᐹႥ໧ ԰
热带花卉园的剑叶龙血树茎部的菌株ྉ 样品编号 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ϟ ሕԡ঎԰ᤃ ऐሕ঎ԡԡ ऐԡ঎ᤃጢ ጢँ঎ϟሕ
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为 ኏Ȯɯ抗菌活性最好ᖔ抗菌谱最广ᖔ所有菌株对至
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ԰ ϟᎮ঎ϟϟ Ꭾँ঎ԡԡ Ꭾँ঎ጢᎮ ጢϟ঎ऐऐ
少一种指示菌有抑制活性ଫ分离自云南省热带作 ᥘ኏୩ዶ ԰
物科学研究所ͱ西双版纳热带花卉园的剑叶龙血 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ሕ ԰ጢ঎ᤃᤃ ࿗ऐ঎ԡԡ ᤃጢ঎ጢँ ࿗԰঎ँԡ
ᥘ኏୩ዶ ሕ
树叶部的菌株ྉ样品编号为 ኏ɟɯ产量最高ᖔ抗菌活
জ 注᧥ା᥋表示分离自云南省西双版纳勐腊县勐仑镇剑叶龙血树
性较好ᖔ有 ऐԡ 株菌ྉऐᤃ঎ԡ԰ᠮɯ对一种以上指示菌有
叶片的菌株ଫ኏Ȯ᥋表示分离自云南省热带作物科学研究所ͱ西双
抑制活性ᤥ 在所有分离到的内生真菌中ᖔ对金黄 版纳热带花卉园的剑叶龙血树茎部的菌株ଫ኏ɟ᥋表示分离自云
南省热带作物科学研究所ͱ西双版纳热带花卉园的剑叶龙血树
色葡萄球菌和耻垢分支杆菌有抑制效果的内生真
叶部的菌株ᤥ
菌数量最多ᖔ分别占总数的 Ꭾጢ঎ጢᠮ和 ᤃ԰঎ᤃϟᠮᤥ 不 জ શᆍᡷᔀ᧥ ା᥋ ቝᔀᑕႿ༁ ᡷၤᔀ ༁ᡷʢᑕᔽႿ༁ औᔀʢᔀ ᔽ༁ᆍ᤟ᑕᡷᔀʛ ஦ʢᆍቝ ᤟ᔀᑕ஦ ᡷᔽ༁༁ࣼᔀ༁ ᆍ஦ ᦵॹ
同来源的内生真菌对 ϟጢ 株病原指示菌的抑制活 ዞᅳዞ၊ᔠႥዞ၊ᔠႥᓣႥ໧ᔠ໧ ዹᆍ᤟᤟ᔀዹᡷᔀʛ ஦ʢᆍቝ ᥘᔀႿ੫᤟ࣼႿ ఋᆍऔႿᖔ ᥘᔀႿ੫᤟ᑕ ऊᆍࣼႿᡷᢃᖔ
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性如表 ϟ 所示ᤥ ஦ʢᆍቝ ༁ᡷᔀቝ ᡷᔽ༁༁ࣼᔀ༁ ᆍ஦ ᦵॹ ዞᅳዞ၊ᔠႥዞ၊ᔠႥᓣႥ໧ᔠ໧ ዹᆍ᤟᤟ᔀዹᡷᔀʛ ஦ʢᆍቝ ᣮᔽ༁ၤࣼᑕႿ੫ᤦᑕႿႿᑕ
结合内生真菌发酵粗提 物体外抑菌活性和 ఋʢᆍᡱᔽዹᑕ᤟ è᤟ᆍऔᔀʢ༁ ᑕႿʛ ۪᤟ᑕႿᡷ༁ ᥈ᑕʢʛᔀႿଫ ኏ɟ᥋ ቝᔀᑕႿ༁ ᡷၤᔀ ༁ᡷʢᑕᔽႿ༁ औᔀʢᔀ
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ఋᓂऊ 检测结果ᖔ筛选到多株活性强且化学多样性 ᣮᔽ༁ၤࣼᑕႿ੫ᤦᑕႿႿᑕ ఋʢᆍᡱᔽዹᑕ᤟ è᤟ᆍऔᔀʢ༁ ᑕႿʛ ۪᤟ᑕႿᡷ༁ ᥈ᑕʢʛᔀႿ঎
丰富的优势菌株ᖔ综合结果较好的前 ϟԡ 株菌的发
酵提取物对 ϟጢ 株病原菌的体外抑菌活性结果见 各份样品在在各种显色条件下条带 ᣰ 斑点数较多ᖔ
表 ԰ᤥ 图 ϟ 为部分菌株对大肠杆菌ܦ耻垢分支杆 显色特异ᖔ初步判断其化学多样性丰富ᖔ具有挖掘
菌ܦᥘ኏୩ዶ ϟ 和 ᥘ኏୩ዶ ԰ 抑制作用效果ᤥ 图 ԰ 为优 新颖化合物的潜力ᤥ
势菌株的发酵粗提物的 ఋᓂऊ 检测结果ᖔ从上到下 ԣॹᇺ 优势菌株的分子鉴定
结合体外抑菌活性评价ܦఋᓂऊ 筛选和代谢产物
依次为紫外 ԰ጢ࿗ Ⴟቝܦሕᤃጢ Ⴟቝܦ碘ܦ硫酸乙醇下显色ᖔ