Page 77 - 《广西植物》2021年第8期

ऐ 期 樊莉娟等᧥ 植物菌根块菌分子鉴定及菌丝培养基优化的研究 ϟ ԰ ँ ϟ

᤹঎ᥘᑕʢҴᔀʢ ᧕ᓂ԰ԡԡԡଫ ϓͱϓᇺ঎ϟሕ 个块菌样品的 ۪ऊ኏ 扩增产物ᤥ
᤹঎ᥘᑕʢҴᔀʢ ᧕ᓂ԰ԡԡԡଫ ϓͱϓᇺ঎ ۪ऊ኏ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᡱʢᆍʛࣼዹᡷ༁ ᆍ஦ ϟሕ ᡷʢࣼ஦஦᤟ᔀ ༁ᑕቝᡱ᤟ᔀ༁঎
图 ԰জ ϟሕ 个块菌样品的 ᧧ఋ୩ 扩增
èᔽ੫঎ ԰জ ᧧ఋ୩ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ϟሕ ᡷʢࣼ஦஦᤟ᔀ ༁ᑕቝᡱ᤟ᔀ༁

԰੫ኼᓂ ܦ牛肉膏 ԰੫ኼᓂ ܦ氯化铵 ԰੫ኼᓂ ܦ硝酸铵 菌᧥印度块菌 ྉ ௴ࣩᤇᓣʗ ᔠႥʐᔠዞࣩቂɯܦ 假凹陷块菌 ྉ ௴ॹ
᥋ϟ
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԰੫ኼᓂ 作为氮源ᤥ 其他成分᧥葡萄糖 ԰ԡ ੫ኼᓂ ᖔ ᡓ໧ᓣࣩʐᅳᓣଝዞᐹצᐹᡙࣩቂɯ和中国块菌ྉ ௴ॹ ໧ᔠႥᓣႥ໧ᓣɯྉ 表 ϟɯᤥ
᥋ϟ ᥋ϟ ᥋ϟ
᣽̀ ۪ᨃ ϟ੫ኼᓂ ᖔᥘ੫୩ᨃ ϟ੫ኼᓂ ᖔ჆ାϟ ԡ঎ԡጢ ੫ኼᓂ ᖔ 由于目前中国块菌和印度块菌已被鉴定为同种
԰ ࿗ ࿗
᥋ϟ ྉऊၤᔀႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟϟɯᖔ故本次调查获得的块菌实际
琼脂粉 ԰ԡ ੫ኼᓂ ᤥ
჆ାϟ 筛选᧥将 ჆ାϟ 作为变量ᖔ分别设置空白对 只有 ԰ 个种ᤥ
照组与 ჆ାϟ 组ᤥ 其他成分᧥葡萄糖 ԰ԡ ੫ኼᓂ ᖔ蛋白 ԣॹԣ 块菌菌丝分离
᥋ϟ
᥋ϟ ᥋ϟ ᥋ϟ 菌丝提取 ᧕શዶ 后ᖔ进行 ᧧ఋ୩ 序列鉴定比对后
胨԰੫ኼᓂ ᖔ᣽̀ ۪ᨃ ϟ੫ኼᓂ ᖔᥘ੫୩ᨃ ϟ੫ኼᓂ ᖔ჆ାϟ
԰ ࿗ ࿗
᥋ϟ ᥋ϟ
ԡ঎ԡጢ ੫ኼᓂ ᖔ琼脂粉 ԰ԡ ੫ኼᓂ ᤥ 确定为印度块菌ᤥ
各设置 ሕ 个重复ᖔ自然 ᡱ̀ᖔ置于 ԰ጢ ቩ 培养ྉ马 ԣॹᇺ 单因素试验不同碳源对印度块菌菌丝生长的
欣燕等ᖔ԰ԡϟᤃɯᖔᎮ ʛ 后统计菌丝生长直径ᤥ 数据统 影响
计及 显著性分析采用 ᥈ʢᑕᡱၤ۪ᑕʛ ۪ʢᔽ༁ቝ ጢ 软件及 以菌丝直径为衡量指标ᖔ判断不同碳源对印
୩۪୩୩ ԰԰঎ԡ 软件的 ዶશᨃ჆ዶ 方法完成ᤥ 度块菌菌丝生长的影响ྉ 图 ሕɯᤥ 发现 ࿗ 种碳源均
ϟ঎԰঎࿗ 正交试验জ 将单因素试验筛选出的最佳因 能较好地被印度块菌所利用ᖔ而马铃薯浸出液培
子ᖔ结合前人研究表明对食用菌菌丝有促进作用 养基和麦芽糖培养基上的菌丝直径明显大于葡萄
的 ᥘ੫୩ᨃ 及 ᣽̀ ۪ᨃ 两个因素ྉ 何明霞等ᖔ԰ԡԡँଫ马 糖与蔗糖培养基ྉ 图 ሕ᧥ዶɯᤥ 其中ᖔ马铃薯浸出液
࿗ ԰ ࿗
欣燕等ᖔ԰ԡϟᤃɯ 进行正交试验ᖔ以筛选各因素的最 组ܦ麦芽糖组与葡萄糖组在 ሂ ᢉ ԡ঎ԡϟ 水平上具有极
佳组合ᖔ各设置 ࿗ 个重复ᖔ培养条件同上ᤥ 正交试 显著差异ଫ马铃薯浸出液组与麦芽糖组在 ሂ ᢉ ԡ঎ԡጢ

验极差分析采用 ᥘᔽႿᔽᡷᑕᤦ ϟᎮ 软件完成ᤥ 水平上也具有显著性差异ᖔ故马铃薯浸出液为本
试验中块菌最佳碳源ᖔ采用马铃薯进行后续正交
԰জ 结果与分析 试验ྉ图 ሕ᧥ାɯᤥ
ԣॹ྽ 单因素试验不同氮源对印度块菌菌丝生长的影响
ԣॹϓ 基于 ᧇ௴୒ 序列分子鉴定 因食用菌对无机氮源和有机氮源均能进行吸
以子实体提取的 ᧕શዶ 为模板ᖔ采取真菌通用 收利用ᖔ且部分食用菌对无机氮源利用率更高ྉ 牛
引物 ᧧ఋ୩ϟ 和 ᧧ఋ୩࿗ 进行 ۪ऊ኏ 扩增ᖔϟሕ 个样品均扩 玉蓉等ᖔ԰ԡϟሕɯᖔ故本次以菌丝直径为衡量指标ᖔ以
增出清晰条带ᖔ大小约 ᤃԡԡ ᤦᡱྉ图 ԰ɯᤥ 将样品序列 蛋白胨为对照ᖔ 对两类氮源均进行了试验ྉ图 ࿗ɯᤥ
在 શऊା᧧ 核酸数据库中进行比对ᖔ共匹配出 ሕ 种块 有机氮源和无机氮源对菌落直径的影响在 ሂ ᢉ ԡ঎ԡϟ