Page 122 - 《广西植物》2022年第12期

２ １ １ ２ 广 西 植 物 ４２ 卷
愈伤组织表面有结节状的小突起(图 １:ａ)ꎬ它们在 织的重量和可溶性蛋白含量呈先升高后降低的趋
不同碳源、蔗糖浓度和有机氮源上的外观形态无 势ꎬ以 Ｃ２ 最高ꎻ胚性愈伤组织可溶性糖含量则随蔗
差异ꎮ 胚性愈伤组织在体胚诱导培养基中培养 ４ 糖浓度增加呈逐渐增加趋势ꎬ在 Ｃ４ 处理中最高ꎬ分
周后相继发育形成表面光滑、白色、透明状和类似 别是 Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３ 处理的 ２.８５、１.９０、１.３０ 倍ꎮ 结果表
球形胚的体细胞胚( 图 １:ｂ)ꎬ体细胞胚在体胚分 明蔗糖浓度对培养基的 ｐＨ 值影响较小ꎬ对胚性愈
化培养基中进一步分化形成幼芽(图 １:ｃ)ꎮ 伤组织的生长及其有机物积累影响较大ꎮ
２.１.１ 碳源对胚性愈伤组织诱导及发育的影响 ２.２.３ 有机氮源对愈伤组织生长及有机物积累的
添加 ３ 种碳源的花榈木成熟胚愈伤组织诱导率均 影响 有机氮源对培养基 ｐＨ 值和胚性愈伤组织
为 １００％(图 ２)ꎬ但胚性愈伤组织诱导率差异显著 淀粉含量的影响不显著( Ｐ>０.０５)ꎬ但对胚性愈伤
(Ｐ<０.０５)ꎮ 其中ꎬＴ１ 处理的胚性愈伤组织诱导率 组织重量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量的影
最高ꎬ比 Ｔ２ 和 Ｔ３ 分别高 ９.３％和 ９.７％ꎮ 不同碳源 响显著 ( Ｐ < ０. ０５ꎬ 表 ３)ꎮ 胚 性 愈 伤 组 织 重 量 在

体细胞 胚 诱 导 率 和 分 化 率 的 差 异 不 显 著 ( Ｐ > Ｎ５、Ｎ１ 和 Ｎ０ 处理中较高ꎻＮ０ 胚性愈伤组织可溶
０.０５)ꎬ但均以 Ｔ１ 最高ꎮ 性糖 含 量 分 别 比 Ｎ１ － Ｎ６ 高 ２２％、 １７％、 ３４％、
２.１.２ 蔗糖浓度对胚性愈伤组织诱导及发育的影 ９.８％、１６％和 ２.４％ꎻ相反ꎬＮ１－Ｎ６ 胚性愈伤组织可
响 花榈木成熟胚愈伤组织诱导率随蔗糖浓度的 溶性蛋白含量显著高于 Ｎ０ꎮ 可见ꎬ有机氮源的添

增加呈降低趋势(图 ３)ꎬ但差异不显著( Ｐ>０.０５)ꎻ 加有助于胚性愈伤组织的生长和可溶性蛋白的积
而胚性愈伤组织、体细胞胚诱导率和体细胞胚分 累ꎬ却不利于胚性愈伤组织可溶性糖的积累ꎮ
化率随蔗糖浓度的增加呈先升高后降低趋势ꎬ其
诱导率均以 Ｃ２ 最高ꎬ但体细胞胚分化率差异不显 ３ 讨论与结论
著(Ｐ>０.０５)ꎮ 值得注意的是ꎬＣ４ 的体胚诱导率急
剧下降ꎬ这说明高浓度蔗糖不利于体胚诱导ꎮ ３.１ 碳源对花榈木体胚发生诱导的影响
２.１.３ 有机氮源对胚性愈伤组织诱导及发育的影 碳源参与碳代谢途径ꎬ为植物生命活动提供
响 与对照 Ｎ０ 相比ꎬ添加不同有机氮源对愈伤组 能量和碳骨架ꎬ对植物生长发育是不可或缺的ꎬ影
织诱导率和体胚分化率差异不显著( Ｐ>０.０５)ꎻ但 响植物体胚诱导率的高低( Ｂａｒｔｏｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８)ꎮ
对胚性愈伤组织和体胚诱导率影响显著( Ｐ<０.０５ꎬ 本研究中ꎬ蔗糖胚性愈伤组织、体胚及体胚分化诱
图 ４)ꎬ其中ꎬＮ１ 胚性愈伤诱导率显著高于 Ｎ０ꎬ增 导率均高于葡萄糖和麦芽糖ꎬ与龙眼( Ｄｉｍｏｃａｒｐｕｓ
加了 １８％ꎻＮ１、Ｎ２ 和 Ｎ４ 体胚诱导率显著高于 Ｎ０ꎬ ｌｏｎｇａｎａ)(赖钟雄ꎬ１９９７)和胡桃楸(赵舒野ꎬ２０１３)
分别比 Ｎ０ 高 １８.５％、２０.５％和 １９.２％ꎮ 体胚诱导的结果一致ꎮ 胚性愈伤组织的重量以添
２.２ 碳氮源对胚性愈伤组织的生长及有机物积累 加蔗糖处理最高ꎬ可能与相同碳源浓度下蔗糖较
的影响 葡萄糖和麦芽糖能够更好地调节培养基中的低渗
２.２.１ 碳源对胚性愈伤组织生长及有机物积累的 环境ꎬ且蔗糖作为双糖经水解后形成同等量的葡
影响 不同碳源处理的胚性愈伤组织重量差异显 萄糖 和 果 糖ꎬ 有 助 于 提 高 蔗 糖 合 成 酶 ( ｓｕｃｒｏｓｅ
著(Ｐ<０.０５)ꎬ以 Ｔ１ 最高ꎬ分别比 Ｔ２、Ｔ３ 高 ２１％、 ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅꎬＳＳ)、蔗糖磷酸合成酶( ｓｕｃｒｏｓｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ
７.８％ꎬ而对培养基 ｐＨ 值、胚性愈伤组织的可溶性 ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅꎬＳＰＳ) 和转化酶( ｉｎｖｅｒｔａｓｅꎬＩＮＶ) 的活性ꎬ
糖、淀粉和 可 溶 性 蛋 白 含 量 的 影 响 不 显 著 ( Ｐ > 促进碳水化合物之间的相互转化和转运能力ꎬ从
０.０５ꎬ表 １)ꎮ 这表明不同碳源对胚性愈伤组织的 而增加碳水化合物含量ꎬ提供外植体更多的能量
生长影响较大ꎬ对培养基 ｐＨ 值、胚性愈伤组织碳 有关(Ｉｒａｑｉ ＆ Ｔｒｅｍｂｌａｙꎬ ２００１ꎻ罗凯等ꎬ２０２１)ꎮ 这

氮积累的影响较小ꎮ 些可能是蔗糖被作为大部分植物细胞培养碳源的
２.２.２ 蔗糖浓度对愈伤组织生长及有机物积累的影 主要原因ꎮ 此外ꎬ不同碳源处理下培养基 ｐＨ 值差
响 不同蔗糖浓度处理对培养基 ｐＨ 值和胚性愈伤 异不显著ꎬ与它们是非电解质有关ꎮ
组织淀粉含量的影响不显著(Ｐ>０.０５)ꎬ但对胚性愈 ３.２ 蔗糖浓度对花榈木体胚发生诱导的影响
伤组织的重量、可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响 蔗糖浓度影响培养基渗透压ꎬ适当的蔗糖浓
显著(Ｐ<０.０５ꎬ表 ２)ꎮ 随蔗糖浓度升高ꎬ胚性愈伤组 度为细胞膨大提供渗透推动力ꎬ 有助于提高蔗糖