Page 182 - 《广西植物》2023年第3期
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            子)分装到密封袋中ꎬ分别置于室温和 4 ℃ 冰箱中                          1.3 数据分析
            避光保存ꎮ 分别取保存 1、3、6 个月后的种子ꎬ用                             萌发率 = 全部萌发种子数 / 播种种子数ꎻ发芽
            4% NaClO 溶液浸泡 10 min 除菌ꎬ无菌水洗 6 次后                  势为萌发处理 15 d 后的种子萌发率ꎮ 运用 Excel
            进行播种ꎮ 每个培养皿播 100 粒左右的种子ꎬ每                          软件 对 数 据 进 行 统 计 和 均 值、 方 差 分 析ꎻ 利 用
            个处理 3 皿ꎬ每隔 2 ~ 3 d 加入 1 mL 无菌水保持种                  GraphPad Prism 5 软件进行显著性分析和绘图ꎮ
            子湿润ꎬ于 25 ℃ 培养箱的暗培养条件下进行萌
            发ꎮ 从萌发实验的第 10 天开始ꎬ每隔 2 d 统计种                       2  结果与分析
            子萌发数ꎬ若连续 10 d 无种子萌发则实验结束ꎮ
                 另外ꎬ取 4 ℃ 冰箱中保存的 2021 年种子ꎬ经                    2.1 温度对岩黄连种子活力及萌发率的影响
            4% NaClO 溶液浸泡及无菌水清洗后播种于培养                              取保存于 4 ℃ 冰箱的 2020、2021 年种子ꎬ于
            皿中ꎬ分别置于 20、25、30、35 ℃ 恒温培养箱中ꎬ黑                     2021 年 11 月开始分别进行室温和 4 ℃ 冰箱存储ꎬ
            暗条件下进行萌发实验ꎮ                                        分别在存储 1、3、6 个月后对种子进行萌发实验ꎮ 图
            1.2.2 化学试剂前处理对种子萌发的影响  取 4 ℃                       1 结果显示ꎬ4 ℃冰箱存储的 2020 年种子发芽率基
            冰箱中保存的种子ꎬ进行以下 4 种处理:①种子用清                          本没有降低ꎬ保持在 30%左右ꎻ4 ℃冰箱存储的 2021
            水漂洗后ꎬ直接用无菌水洗 6 次进行播种ꎻ②种子用                          年种子的发芽率不仅没有降低ꎬ还稍微有所提升ꎻ
            4% NaClO 溶液浸泡 10 minꎬ无菌水漂洗 6 次后播                   2020 年种子经室温保存后ꎬ发芽率随保存时间增加
            种ꎻ③种子用 1 molL HCl 溶液浸泡 1 hꎬ无菌水                   不断降低ꎻ2021 年种子与 2020 年种子相似ꎬ发芽率
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            漂洗 6 次后播种ꎻ④种子首先经 1 molL HCl 溶                    随室温保存时间增加也逐渐降低ꎮ 这说明相比于
                                                    ̄1
            液浸泡 1 hꎬ然后经 4% NaClO 溶液浸泡 10 minꎬ最                 室温ꎬ4 ℃冰箱保存更有利于延长种子活力ꎬ4 ℃ 冰
            后用无菌水漂洗 6 次后播种ꎮ 在 25 ℃ 黑暗条件下                       箱保存 2 a 的种子萌发率仍能达到 30%ꎮ

            进行萌发实验ꎮ                                                以 2021 年种子为材料ꎬ分别在 20、25、30、35
            1.2.3 光照、干旱及 pH 对种子萌发的影响  取 4 ℃                    ℃ 的恒温培养箱中进行萌发实验ꎮ 图 2 结果显
            冰箱保存的 2021 年种子ꎬ用 1.2.2 的 4 种处理方                    示ꎬ20 ℃ 条件下的种子发芽率最高ꎬ25 ℃ 发芽率
            式处理种子后分别在 25 ℃ 周期性光照( 12 h 光                       与 20 ℃ 相比虽稍微有所降低ꎬ但不显著ꎻ在 30 ℃
            照 / 12 h 暗)和完全黑暗条件下进行萌发实验ꎮ                         时ꎬ种子基本不能萌发ꎬ35 ℃ 时种子完全不能萌
                 以 PEG6000 建立干旱胁迫ꎬ研究不同干旱胁迫                     发ꎬ与 20 ℃ 条件相比均呈显著降低ꎮ 这说明高温
            下种子的萌发情况ꎮ 取 4 ℃ 冰箱保存的 2021 年种                      明显不利于种子的萌发ꎮ
            子ꎬ经 4% NaClO 溶液浸泡 10 min 后用无菌水清洗                       以上结果说明ꎬ温度是影响种子活力及萌发率
            6 次ꎬ分别置于去离子水对照和 5%、10%、15%、20%                     至关重要的因素之一ꎮ 与室温相比ꎬ低温保存更有
            的 PEG6000 溶液浸润滤纸的培养皿中ꎬ每隔 2 ~ 3 d                   利于延长种子的活力ꎻ种子在 20 ~25 ℃ 条件下的发
            向培养皿中加入 1 mL 的无菌水ꎬ保持 PEG6000 的                     芽势及发芽率都能保持在较高水平ꎬ而在 30 ℃以上
            相应浓度ꎬ于 25 ℃黑暗条件下进行萌发实验ꎮ                            的高温下ꎬ种子几乎完全失活ꎬ从而丧失萌发率ꎮ
                                                               2.2 化学试剂处理对岩黄连种子萌发的影响
                 分别用 HCl、NaOH 溶液调节无菌去离子水 pH
            值至 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0ꎬ取 4 ℃ 冰箱保存的                 图 3 结果显示ꎬ与 H O 对照相比ꎬ4% NaClO 溶
                                                                                     2
            2021 年种子ꎬ经 4% NaClO 溶液浸泡 10 min 后用                 液处理种子对发芽势无促进作用ꎬ甚至会使发芽势
            无菌水清洗 6 次ꎬ置于不同 pH 值去离子水浸润滤                         稍微降低ꎬ而 1 molL HCl、HCl+NaClO 处理均能
                                                                                    ̄1
            纸的培养皿中ꎬ每隔 2 ~ 3 d 向培养皿中加入 1 mL                     显著提高种子发芽势( 图 3:A)ꎮ 无论是 1M HCl、
            相应 pH 值的无菌水ꎬ于 25 ℃ 黑暗条件下进行萌                        4% NaClO 单独处理还是两种试剂合并处理ꎬ均能
            发实验ꎮ                                               显著提高种子发芽率 ( 图 3: B)ꎮ 除利用 HCl 和
            1.2.4 混沙保湿冷藏对种子萌发的影响  将 4 ℃ 冰                      NaClO 溶液处理种子外ꎬ还尝试使用 NaOH 溶液处
            箱保存的 2020、2021 年种子与干净的河沙、无菌                        理种子ꎬ处理后基本未能观察到种子萌发ꎮ 这说明
            水按 1 ∶ 10 ∶ 3 的体积比例混合ꎬ置于密封袋中ꎬ                      酸性化学试剂对种子的前处理能显著提高其发芽
            并于 4 ℃ 冰箱中避光保藏 60 dꎬ之后取出种子于                        率ꎬ其中 HCl、HCl+NaClO 溶液的处理能同时显著提
            室温条件下进行萌发ꎮ 同时ꎬ以干燥冷藏的种子                             高发芽势和发芽率ꎬ是较优的种子前处理方法ꎮ
            作为对照ꎬ将其直接与河沙、无菌水混合后于室温                             2.3 光照和化学试剂处理对岩黄连种子萌发的影响
            条件下进行萌发ꎮ                                               图 4 结果显示ꎬ以 2021 年种子为材料ꎬ经 4 种
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