Page 44 - 《广西植物》2023年第3期
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４ ４ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
２０１７)、遗传多样性(刘凯等ꎬ２０１９ꎻ卢家仕等ꎬ２０２１) 取 ２ 次ꎬ每次 １ ｈꎬ提取完后离心取上清液过滤ꎬ用
等方面ꎬ对于不同生境下金花茶组植物的钙适应机 ５％盐酸定容ꎮ 然后ꎬ依次使用蒸馏水、１ ｍｏｌＬ ￣１
制仍然知之甚少ꎮ 氯化钠、２％醋酸、０.６％盐酸重复上述步骤ꎬ共获得
本研究以 １０ 种石灰土金花茶和 ４ 种酸性土金 ５ 种提取液ꎮ 最后ꎬ将剩余残渣转入洁净的高脚烧
花茶为对象ꎬ测定其生境土壤的钙含量和 ｐＨ 值以 杯中ꎬ电热板加热使杯内液体挥发干ꎬ于 ＫＥＲＲＩＣ
及该生境下植物叶中各钙形态的含量ꎮ 主要探 通风橱内加硝酸－高氯酸(４ ∶ １ꎬＶ / Ｖ)５ ｍＬꎬ摇匀ꎬ
究:(１)不同生境下金花茶组植物的叶钙形态是否 ５０ ℃ 电热板上浸泡过夜ꎻ次日再加硝酸 －高氯酸
存在差异ꎻ(２)土壤因素是否对叶钙形态产生显著 (４ ∶ １ꎬＶ / Ｖ)１０ ｍＬꎬ并在瓶口加一玻璃小漏斗ꎬ８０
影响ꎻ(３)各金花茶组植物的叶钙形态特征ꎮ 本研 ℃ 消解 ３０ ｍｉｎꎬ升温至 １５０ ℃ 消解 １ ｈ 后ꎬ继续升
究结果将有助于深入理解金花茶组植物对其生境 温至 １８０ ℃ 消解ꎬ使瓶口产生的棕色烟转为白色
土壤的钙适应机制ꎬ以期为金花茶组植物保育措 烟ꎻ待瓶口白烟冒净ꎬ高脚烧杯中液体挥发完全
施的制定提供科学依据ꎮ 后ꎬ分 ２ 次加入 ０.２％硝酸共 １５ ｍＬꎬ在电热板上加
热使底部沉淀物充分溶解ꎬ冷却后ꎬ定量转移至 ２５
１ 材料与方法 ｍＬ 容量瓶中ꎬ用 ０. ２％ 硝酸定容ꎬ摇匀后于 ０. ４５
μｍ 滤膜过滤ꎬ获得残渣钙提取液ꎮ 同时ꎬ消煮空
１.１ 材料 白和标准样品进行质量控制和结果校正ꎮ 使用原
在金花茶组植物的主要自然分布区内选择了 子吸收分光光度计法分别测定上述 ６ 种提取液中
１４ 个物种(表 １)ꎬ包括 １０ 种石灰土金花茶ꎬ即凹 的硝 酸 钙 和 氯 化 钙 ( ｃａｌｃｉｕｍ ｎｉｔｒａｔｅ ａｎｄ ｃａｌｃｉｕｍ
脉金花茶( Ｃａｍｅｌｌｉａ ｉｍｐｒｅｓｓｉｎｅｒｖｉｓꎬＣＩＭ)、龙州金花 ｃｈｌｏｒｉｄｅꎬＡＩＣ￣Ｃａ)、水溶性有机酸钙( ｗａｔｅｒ ｓｏｌｕｂｌｅ
茶 ( Ｃ. ｌｏｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓꎬ ＣＬＯ )、 柠 檬 金 花 茶 ( Ｃ. ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄ ｃａｌｃｉｕｍꎬＨ Ｏ￣Ｃａ)、果胶酸钙( ｃａｌｃｉｕｍ
２
ｌｉｍｏｎｉａꎬＣＬＩ)、弄岗金花茶(Ｃ. ｇｒａｎｄｉｓꎬＣＧＲ)、毛瓣 ｐｅｃｔａｔｅꎬ ＮａＣｌ￣Ｃａ )、 磷 酸 钙 和 碳 酸 钙 ( ｃａｌｃｉｕｍ
金花 茶 ( Ｃ. ｐｕｂｉｐｅｔａｌａꎬ ＣＰＵ )、 崇 左 金 花 茶 ( Ｃ. ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎｄ ｃａｌｃｉｕｍ ｃａｒｂｏｎａｔｅꎬＨＡＣ￣Ｃａ)、草酸钙
ｐｅｒｐｅｔｕａꎬＣＰＥ)、顶生金花茶( Ｃ. ｔｅｒｍｉｎａｌｉｓꎬＣＴＥ)、 (ｃａｌｃｉｕｍ ｏｘａｌａｔｅꎬＨＣｌ￣Ｃａ)、硅酸钙(ｃａｌｃｉｕｍ ｓｉｌｉｃａｔｅꎬ
淡黄金 花 茶 ( Ｃ. ｆｌａｖｉｄａꎬ ＣＦＬ)、 平 果 金 花 茶 ( Ｃ. Ｒｅｓ￣Ｃａ)的含量ꎮ 叶总钙( ｔｏｔａｌ ｃａｌｃｉｕｍꎬＴｏｔ￣Ｃａ) 含
ｐｉｎｇｇｕｏｅｎｓｉｓꎬＣＰＩ)、贵州金花茶 ( Ｃ. ｈｕａｎａꎬＣＨＵ) 量为这 ６ 种钙形态含量之和ꎮ
[注:原天峨金花茶(Ｃ. ｔｉａｎｅｅｎｓｉｓ) 已并入贵州金花 １.２.２ 土壤指标的测定 土壤样品经过自然风干、
茶] 和 ４ 种 酸 性 土 金 花 茶ꎬ 即 东 兴 金 花 茶 ( Ｃ. 除杂、混合、磨细、过 １００ 目筛ꎬ制成分析样品备用ꎮ
ｔｕｎｇｈｉｎｅｎｓｉｓꎬＣＴＵ)、金花茶(Ｃ. ｎｉｔｉｄｉｓｓｉｍａꎬＣＮＩ)、显 土壤 ｐＨ(Ｓｏｉｌ￣ｐＨ) 用玻璃电极法测定ꎬ即称取土样
脉金 花 茶 ( Ｃ. ｅｕｐｈｌｅｂｉａꎬ ＣＥＵ)、 小 瓣 金 花 茶 ( Ｃ. １０ ｇ 于 ５０ ｍＬ 高型烧杯中ꎬ加 ２５ ｍＬ 去离子水ꎬ用玻
ｐａｒｖｉｐｅｔａｌａꎬＣＰＡ)ꎮ 在各采样点ꎬ选择长势基本一 璃棒搅拌 １ ｍｉｎꎬ使土粒充分分散ꎬ放置 ３０ ｍｉｎ 后采
致的 ３ 株成年植株ꎬ每株从东、南、西、北 ４ 个方向 用玻璃 电 极 法 测 定 上 清 液 ｐＨ 值ꎮ 土 壤 钙 含 量
分别采集一年生成熟叶ꎬ每株采集叶片约 １００ ｇꎬ (Ｓｏｉｌ￣Ｃａ)用微波消解－火焰原子吸收分光光度法测
共 ４２ 个叶样ꎬ并相应地采集植株根部周围的表层 定ꎬ即称取土样 ０.ｌ ｇꎬ加入 ４ ｍＬ 浓硝酸和 ２ ｍＬ 氢氟
(０ ~ ２０ ｃｍ)土壤ꎬ每个土样采集约 １ ｋｇꎮ 酸ꎬ放置一会ꎬ放到微波样品制备仪上进行微波消
１.２ 测定方法 解ꎬ消解完成后用原子吸收分光光度计测定钙含量ꎮ
１.２.１ 植物叶片钙形态的测定 在实验室将叶样 １.３ 数据统计和分析
于 １０５ ℃ 杀青 ３０ ｍｉｎꎬ８０ ℃ 烘干 １２ ｈꎬ粉碎过 １００ 数据 统 计 及 分 析 采 用 ＳＰＳＳ ｖ２３. ０ 软 件ꎮ 其
目筛待测ꎮ 叶片各钙形态测定主要参考齐清文等 中ꎬ石灰土金花茶和酸性土金花茶的土壤环境及
(２０１３)的方法并略作改进ꎮ 首先ꎬ称取(０.５００ ０± 叶钙形态间的差异比较使用独立样本 Ｔ 检验ꎻ使
０.０００ ５) ｇ 叶样粉末加到 ５０ ｍＬ 的具盖离心管中ꎻ 用 Ｓｐｅａｒｍａｎ 系数计算叶钙形态与土壤指标间的相
加入 ２０ ｍＬ ８０％乙醇于 ３０ ℃ 恒温水浴锅中振荡提 关性并进行显著性检验ꎻ使用单因素方差分析(ｏｎｅ￣
取 １ ｈꎬ４ ０００ ｒｍｉｎ 离心 １０ ｍｉｎꎻ取上清液过滤至 ｗａｙ ＡＮＯＶＡ)比较不同金花茶物种间的叶钙形态差
￣１
５０ ｍＬ 容量瓶中ꎬ接着加入 １０ ｍＬ ８０％乙醇继续提 异ꎬ 并采用 Ｄｕｎｃａｎ 法进行多重检验ꎮ 使用 Ｒ 语言
