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引用本文:王鹏举, 王天云, 冯英才, 刘红涛, 薛乐勋.杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白的细胞定位[J].广西植物,2009,(1):55-58.[点击复制]
WANG Peng-Ju, WANG Tian-Yun, FENG Ying-Cai, LIU Hong-Tao, XUE Le-Xun.Cellular localization of MAR binding protein of Dunaliella salina[J].Guihaia,2009,(1):55-58.[点击复制]
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杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白的细胞定位
王鹏举1, 王天云2, 冯英才1, 刘红涛1, 薛乐勋1*
1.郑州大学 细胞生物学研究室, 郑州 450052;2.新乡医学院 生物化学与分子生物学教研室,河南 新乡 453003
摘要:
为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及N端和C端融合蛋白成功在CHO细胞表达,MBP和C端部分定位于细胞核且聚集于核仁,N端部分分布整个细胞,说明MBP定位于细胞核且细胞定位信号位于C端,MBP可能与rRNA前体结合发挥作用。
关键词:  杜氏盐藻  核基质附着区  核基质结合区结合蛋白  真核表达载体  细胞定位
DOI:
分类号:Q781
基金项目:
Cellular localization of MAR binding protein of Dunaliella salina
WANG Peng-Ju1, WANG Tian-Yun2, FENG Ying-Cai1, LIU Hong-Tao1, XUE Le-Xun1*
1.Laboratory of Cell Biology, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China;2.Department of Biochemistry and Molecular Biology, Xinxiang Medical College, Xinxiang 453003, China
Abstract:
To study the function of Matrix attachment region(MAR)binding protein(MBP),full length,N-terminal and C-terminal of MBP gene from Dunaliella salina were amplified by RT-PCR,and fused to the green fluorescence protein gene to construct the eukaryotic vector. Then,the recombinant vectors were transfected into Chinese hamster ovary(CHO)cells by Lipofectamine 2000. Fluorescence microscope and western blotting were performed to determine the expression of the fusion proteins and cellular localization. The results showed that the fusion proteins were expressed in CHO cells,the proteins of MBP and C-terminal part were localized in the nucleus and clearly detected in nucleoli,however, the N-terminal part was distributed into all cells.
Key words:  Dunaliella salina  matrix attachment region  MAR binding protein  eukaryotic expression  cellular localization
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