Page 144 - 《广西植物》2020年第9期
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９ 期 奠佐红等: ２３ 种中草药体外抗菌活性筛选 １ ３ ５ ９
(ＰＡ ８７、 ＰＡ １２０、 ＰＡ １２９、 ＰＡ ２１６、 ＰＡ ２４４、 ＰＡ 湾中药材市场ꎬ均由中国人民解放军联勤保障部
２５０、ＰＡ ２８１、ＰＡ ３０７、ＰＡ ３１４、ＰＡ ３１９)ꎻ耐药白色 队第九二○医院药学部天然药物研究中心鉴定ꎮ
念珠 菌 ( ＣＡ １００、 ＣＡ １５２、 ＣＡ ６４９、 ＣＡ ８１９、 ＣＡ １.２ 方法
９５３、ＣＡ ９５６) 均由中国人民解放军联勤保障部队 １.２.１ 中草药提取物的制备 将 ２３ 种中草粉药碎
第九二○医院微生物实验室临床分离得到ꎮ 为粗粉ꎬ各称 ８０ ｇꎬ常温下用 ８０％乙醇分别浸泡 ７、
１.１.２ 材料 培养基:营养琼脂培养基、营养肉汤 ５、５、４、３ ｄꎬ每次浸泡液用 ８ 层纱布过滤ꎬ合并滤
培养基( Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ａｇａｒ、Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｂｒｏｔｈꎬ北京三药科 液ꎬ于 ４０ ℃ 以下减压旋转蒸发得到浸膏ꎬ密封常
技开发公司ꎬ批号:１８０５０３、１７１１１０、)ꎬ沙氏琼脂培 温保存备用ꎮ
养基、 液 体 沙 氏 培 养 基 ( Ｓｂｏｕｒａｕｄ’ ｓ Ａｇａｒ、 Ｌｉｑｕｉｄ １.２.２ 测定耐药菌株的耐药谱 药敏试验用 Ｋ￣Ｂ
Ｓａｂｏｕｒａｕｄ Ｍｅｄｉｕｍꎬ青岛高科技工业园海博生物科 纸片扩散法( Ｋｉｒｂｙ￣Ｂａｕｅｒ 法)ꎬ药敏结果判定参照
技术有 限 公 司ꎬ 批 号: ２０１６０８１１、 ２０１６０８２２)ꎮ 试 ＣＬＳＩ(Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ)２０１７ 版
剂:氯 化 钠 ( 四 川 西 陇 化 工 有 限 公 司ꎬ 批 号: (ＣＬＳＩ:Ｍ０２￣Ａ１２ꎬ ２０１７)ꎮ
２０１５１２１９ )ꎬ 二 甲 基 亚 砜 [ Ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅꎬ １.２.３ 药液和菌液制备 药液:精确称取中草药提
ＤＭＳＯꎬ利安隆博华( 天津) 医药化学有限公司ꎬ批 取物 ５０ ｍｇ 于 ＥＰ 管中ꎬ加 １０％ ＤＭＳＯ 作助溶剂溶
号:２０１５１００９]均购于昆明福海达化玻仪器有限公 解ꎬ用无菌生理盐水配成浓度为 ５０ ｍｇｍＬ 的药
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司ꎮ 药敏纸片 氟喹诺酮类:左氧氟沙星( ＬＶＸ)、 液ꎮ 菌液:将细菌、真菌菌种分别接种于营养琼脂
环丙 沙 星 ( ＣＩＰ )、 加 替 沙 星 ( ＧＡＴ)、 莫 西 沙 星 培养基、沙氏琼脂培养基上ꎬ在 ３５ ℃ 恒温培养箱
(ＭＸＦ)ꎻ β￣内 酰 胺 类: 青 霉 素 ( Ｐ )、 苯 唑 西 林 培养 ２４ ｈꎮ 细菌用 ０. ５ 号麦氏比浊管配 成 浓 度
(ＯＸ)、氨苄西林( ＡＭ)、氨曲南( ＡＺＴ)ꎻ头孢菌素 １.５×１０ ＣＦＵｍＬ ꎬ真菌用细胞计数板配成浓度
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类:头孢唑林( ＣＺ)、头孢呋辛( ＣＸＭ)、头孢他啶 １.０×１０ ＣＦＵｍＬ ꎬ用于菌株药敏测试和琼脂扩
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(ＣＡＺ)、头孢哌酮( ＣＦＰ)、头孢吡肟( ＦＥＰ)ꎻ碳青 散法测抑菌圈ꎮ 将细菌稀释 ３００ 倍成浓度 ５×１０ ５
霉烯 类: 亚 胺 培 南 ( ＩＰＮ)ꎻ 头 霉 素 类: 头 孢 西 丁 ＣＦＵ ｍＬ ꎬ 真 菌 稀 释 １００ 倍 成 浓 度 １. ０ × １０ ４
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(ＣＦＸ)ꎻ 糖 肽 类: 万 古 霉 素 ( ＶＡ )、 替 考 拉 宁 ＣＦＵｍＬ ꎬ用于 ＭＩＣ / ＭＢ(Ｆ)Ｃ 的测定ꎮ
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(ＴＣＬ)ꎻ磷霉素类:磷霉素( ＦＯＳ)ꎻ氨基糖苷类:妥 １.２.４ 琼脂打孔法测定抑菌圈 用直径 ６ ｍｍ 的无
布霉素(ＴＭ)、阿米卡星( ＡＮ)、奈替米星( ＮＥＴ)、 菌打孔器将琼脂平板每块打孔 ５ 个备用ꎬ用无菌
丁胺卡那(ＡＮ)ꎻ多黏菌素类:多黏菌素 Ｂ(ＰＢ)ꎻ大 棉签蘸取浓度为 １.５×１０ ＣＦＵｍＬ 的标准细菌菌
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环内酯类:阿奇霉素( ＡＺＭ)ꎻ四环素类:米诺环素 液均匀 涂 布 在 营 养 琼 脂 平 板 培 养 基 上ꎬ 浓 度 为
(ＭＮＯ)ꎻ其他:头孢哌酮 / 舒 巴 坦 ( ＳＣＦ)、哌 拉 西 １.０×１０ ＣＦＵｍＬ 的标准真菌菌液均匀涂布于沙
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林 / 他唑 巴 坦 ( ＰＩＴ)、 克 林 霉 素 ( ＣＬＩ)、 利 福 平 氏琼脂培养基上ꎬ每孔加入浓度为 ５０ ｍｇｍＬ 的
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(ＲＡ)ꎬ以上用于细菌ꎮ 以下用于真菌ꎬ多烯类:两 药液 １００ μＬꎬ药液不得溢出ꎮ 将琼脂平板置于 ３５
性霉素 Ｂ( ＡＭＢ)、制霉菌素( ＮＹＳ)ꎻ丙烯胺类:特 ℃ 恒温培养箱中培养 ２４ ｈꎬ用卡尺测量抑菌圈ꎬ平
比奈 芬 ( ＴＥＲ)ꎻ 唑 类: 益 康 唑 ( ＥＣＯ)、 酮 康 唑 行 ３ 次实验ꎬ取平均值ꎮ 根据药理学方法判定:抑
(ＫＥＴ)、克霉唑( ＣＬＯ)、氟康唑( ＦＬＵ)、伊曲康唑 菌圈直径 ｄ<１０ ｍｍ 为细菌对药物表现耐药和无抑
(ＩＴＣ)、 伏 立 康 唑 ( ＶＯＲ)ꎻ ５￣ＦＣ 类: ５￣氟 胞 嘧 啶 菌作用ꎻｄ ＝ １０ ｍｍ 为轻度敏感ꎻ１１ ｍｍ≤ｄ≤１５ ｍｍ
(ＦＣ)ꎻ其他:咪康唑 / 达克宁( ＭＩＣ)ꎮ 以上药品均 为中度敏感ꎻｄ≥１６ ｍｍ 为高度敏感ꎮ
由中国药品生物制品检定所提供ꎮ 中草药:滇龙 １.２.５ ＭＩＣ 和 ＭＢＣ / ＭＦＣ 的测定 ＭＩＣ 的测定:按
胆草、头花蓼、何首乌、仙鹤草、金丝梅、马鞭草由 照 ＣＬＳＩ２０１７ 版指南进行(ＣＬＳＩ:Ｍ０７￣Ａ１０ꎬ ２０１７)ꎬ
本人于 ２０１８ 年 ８ 月 １ 日至 ８ 月 ８ 日采自云南省曲 采用微量肉汤倍比稀释法ꎮ ＭＢＣ / ＭＦＣ 的测定:确
靖市富源县富村镇(１０５°０'２０″ Ｅ、２５.５°—３５° Ｎ 之 定 ＭＩＣ 后ꎬ将 ＭＩＣ 孔前 ３ ~ ５ 孔的液体培养基用无
间ꎬ海拔 １ ９８０ ｍ)ꎬ其余均购于云南省昆明市螺蛳 菌接种环接种于琼脂平板培养基上( 细菌用营养
