Page 184 - 《广西植物》2021年第4期
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ᤃ ᤃ ᤃ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷
表 ԣই फۗࣷቴ 引物名称及序列 表 ᇺই 三亲杂交验证引物名称及序列
ఋᑕᤦᔀ জ શᑕቝᔀ༁ ᑕႿʛ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀ༁ ᆍ ी۪ऊ ᡱʢᔽቝᔀʢ༁ ఋᑕᤦᔀ ሕজ ఋၤʢᔀᔀ᥋ᡱᑕʢᔀႿᡷ ၤᢃᤦʢᔽʛᔽझᑕᡷᔽᆍႿ ᔀʢᔽᔽዹᑕᡷᔽᆍႿᆥ༁
ᡱʢᔽቝᔀʢ Ⴟᑕቝᔀ༁ ᑕႿʛ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀ༁
引物名称 引物序列
引物名称 引物序列
۪ʢᔽቝᔀʢ Ⴟᑕቝᔀ ۪ʢᔽቝᔀʢ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀ
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ीఋ᥋ఋࣼᤦࣼᔽႿ ᥋è ጢࣕ ዶ᥈᥈ዶऊ᥈ऊఋ᥈ऊऊዶዶऊዶዶऊఋఋఋ ሕࣕ
ᡱᨃ᥋᥈В୩᥋è ጢࣕዶ᥈᥈ఋ᥈᥈ऊఋऊऊఋዶऊዶዶዶఋ᥈ऊऊ ሕࣕ
ीఋ᥋ఋࣼᤦࣼᔽႿ ᥋ ጢࣕ ఋఋ᥈ዶ᥈᥈᥈᥈ዶዶ᥈᥈᥈ఋዶዶዶఋዶ᥈ఋ᥈ ሕࣕ
ᡱᨃ᥋᥈В୩᥋ ጢࣕఋऊऊዶऊዶ᥈ఋఋఋఋऊ᥈ऊ᥈ዶఋऊऊዶ ሕࣕ
ीఋ᥋èቝȮዶԻϟ᥋è ጢࣕ ᥈᥈ऊ᥈᥈ఋऊዶዶዶఋ᥈ዶఋዶ᥈ఋఋఋఋऊ᥈ ሕࣕ
ीఋ᥋èቝȮዶԻϟ᥋ ጢࣕ ᥈ዶఋ᥈ఋఋఋ᥈ఋ᥈᥈ऊ᥈᥈ዶఋఋऊዶ᥈ ሕࣕ
ीఋ᥋èቝȮዶԻ᥋è ጢࣕ ዶ᥈ዶ᥈᥈ऊዶ᥈ऊዶዶऊዶዶఋ᥈᥈ዶ᥈ఋऊ ሕࣕ
ीఋ᥋èቝȮዶԻ᥋ ጢࣕ ఋऊఋఋఋዶዶऊ᥈ఋ᥈᥈ఋఋऊ᥈᥈ऊዶዶఋ ሕࣕ 相对表达量为 ϟԡᎮϟ ሕϟᖔ远低于最初的 ሕ࿗ँ ԡϟᖔ
ीఋ᥋ᥘɟऊ᥋è ጢࣕ ऊዶఋ᥈ऊఋఋఋऊ᥈ఋఋఋዶऊఋఋऊ᥈᥈᥈ ሕࣕ
这说明 ÞቂȣዛԮϟ 过表达受到 ᧕᧧ጶऊዶ 抑制ᖔÞቂȣዛԮϟ
ीఋ᥋ᥘɟऊ᥋ ጢࣕ ऊఋዶఋऊऊ᥈ऊऊఋऊఋఋఋዶዶऊऊዶऊዶ᥈ ሕࣕ
的合成受 Ȯዶ 调控ᤥ 随着时间的延长ᖔ᧕᧧ጶऊዶ 抑制
ीఋ᥋᥈ᓂϟ᥋è ጢࣕ ఋఋዶఋఋऊዶ᥈ఋ᥈᥈ऊఋऊዶఋऊ᥈ఋऊዶዶ᥈ ሕࣕ
ीఋ᥋᥈ᓂϟ᥋ ጢࣕ ዶዶऊఋऊऊዶఋዶዶఋఋऊ᥈ऊዶఋऊఋఋऊ᥈ ሕࣕ 作用减弱ᖔȮዶ 逐渐积累ᖔ处理 ሕၤ 后相对表达量为
ीఋ᥋ጶ᧧શሕ᥋è ጢࣕ ऊዶ᥈ዶ᥈᥈ऊ᥈᥈ఋఋఋऊऊዶఋఋዶ᥈ዶ᥈ ሕࣕ ሕँँԡ ԡ࿗ᖔ 较 ϟၤ 有大幅上升ଫ 处理后 ᤃၤ 的
ीఋ᥋ጶ᧧શሕ᥋ ጢࣕ ऊዶዶዶఋऊዶఋ᥈ऊ᥈᥈ऊఋఋऊఋఋ᥈ఋዶ ሕࣕ
ÞቂȣዛԮϟ 表达量达到峰值 ᤃऐԡ ँጢᤥ 随后 ϟऐܦϟܦ
࿗ ၤ 相对表达量回落ᖔ此时 ÞቂȣዛԮϟ 表达量仍是空
载的 ϟऐܦϟँ 倍ᖔ表现出过表达的特征ᖔ这一方面
说明瞬时侵染有效ᖔ另一方面显示 ᧕᧧ጶऊዶ 抑制减
弱后 ÞቂȣዛԮϟ 表达水平出现反弹的动态变化ᖔ也验
证了 ÞቂȣዛԮϟ 确实是 Ȯዶ 通路的关键基因ᤥ
᤹ ᧕ᓂԡԡԡ ᧕શዶ ᥘᑕʢҴଫ ϓ 阴性对照ଫ ԣ ᡱᨃ᥋᥈В୩ 载体ଫ
ᇺᖔ èቝȮዶԻϟ᥋ᡱᨃ᥋᥈В୩ᤥ
᤹ ᧕ᓂԡԡԡ ᧕શዶ ᥘᑕʢҴଫ ϓ શᔀ੫ᑕᡷᔽᔀ ዹᆍႿᡷʢᆍଫ ԣ ᡱᨃ᥋᥈В୩
ᔀዹᡷᆍʢଫ ᇺᖔ èቝȮዶԻϟ᥋ᡱᨃ᥋᥈В୩ 数据为 ÞቂȣዛԮϟ 侵染后的表达水平ᖔ大于 ϟ 为上调ᖔ小于 ϟ
为下调ᤥ 下同ᤥ
图 ሕজ èቝȮዶԻϟ᥋ᡱᨃ᥋᥈В୩ 过表达载体 ᧕ᑕᡷᑕ ᑕʢᔀ ᡷၤᔀ ᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᔀᔀ༁ ᆍ ÞቂȣዛԮϟ ᑕᡷᔀʢ ᔽႿᔀዹᡷᔽᆍႿᖔ
转入农杆菌 ۪ऊ 验证 ੫ʢᔀᑕᡷᔀʢ ᡷၤᑕႿ ϟ ᔽ༁ ࣼᡱ᥋ʢᔀ੫ࣼᑕᡷᔀʛᖔ ᔀ༁༁ ᡷၤᑕႿ ϟ ᔽ༁ ʛᆍऔႿ᥋
èᔽ੫ ሕজ ۪ऊ ᔀʢᔽᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ ᡷʢᑕႿ༁ᔀʢʢᔀʛ ዛʗᅳᤇᐹዞᡙᓣʗᔠࣩቂ ʢᔀ੫ࣼᑕᡷᔀʛ ఋၤᔀ ༁ᑕቝᔀ ᤦᔀᆍऔ
èቝȮዶԻϟ᥋ᡱᨃ᥋᥈В୩ ᆍᔀʢᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᔀዹᡷᆍʢ
图 ࿗জ ᧕᧧ጶऊዶ 处理后各个时间点 ÞቂȣዛԮϟ 表达量
èᔽ੫ ࿗জ ÞቂȣዛԮϟ ᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᑕᡷ ᔀᑕዹၤ ᡷᔽቝᔀ ᡱᆍᔽႿᡷ
示ᖔ瞬时侵染后 ሕᤃ ၤྉ 尚未进行 ᧕᧧ጶऊዶ 处理ᖔ即图 ᑕᡷᔀʢ ᧕᧧ጶऊዶ ᡷʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ
中 ԡၤ ɯÞቂȣዛԮϟ 相对表达量为 ሕ࿗ँ ԡϟྉ ᢦϟɯᖔ相
对空载侵染表达上调ᖔÞቂȣዛԮϟ 基因转入水曲柳组 对各个时间点 Ȯዶ 通路上下游的相关基因ᗵ
培苗ᖔ说明瞬时侵染有效ᤥ ÞቂȣዛԮܦᤩᒦϟܦጛᧇટሕܦ᤹ɔࣷ 的相对表达量进行分
由于 ᧕᧧ጶऊዶ 处理抑制了 Ȯዶ 的合成ᖔÞቂȣዛԮϟ 的 析ᖔ得到 ÞቂȣዛԮܦᤩᒦϟܦጛᧇટሕܦ᤹ɔࣷ 与 ÞቂȣዛԮϟ 的
表达也受到抑制并出现波动ᖔ处理后 ϟၤ 的 ÞቂȣዛԮϟ 相对表 达 量数据图 ྉ 图 ጢ ͱ ऐɯᤥ ᧕᧧ጶऊዶ 处理 ϟၤ