Page 9 - 《广西植物》2021年第8期

ऐ 期 武丽霞等᧥ 生长素输出载体蛋白 ۪᧧શϟ 在作物根和胚中的亚细胞定位 ϟ ԰ ԰ ሕ
结果发现 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 及其同源物分布在水稻ܦ小麦ܦ
玉米和大豆的根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜
及细胞质中ᤥ 不同作物中的相同细胞定位表明
۪᧧શϟ 在不同植物发育中ᖔ其调节生长素分布功能

是保守的ᤥ 此外ᖔ我们也注意到与拟南芥 ዶᡷ۪᧧શϟ
的极性定位相比ྉèʢᔽቝ᤟ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡሕɯᖔ在不同农作
物的根表皮细胞中ᖔᨃ༁۪᧧શϟ 及其同源物的定位是
非极性的ᤥᨃ༁۪᧧શϟᤦ 的氨基酸序列与 ዶᡷ۪᧧શϟ 具有
ጢऐ঎ᤃᠮ的相似性ᖔ因此ᖔ不同作物和拟南芥 ዶᡷ۪᧧શϟ
蛋白的亚细胞定位模式存在的差异可能与不同植
物中 ۪᧧શϟ 蛋白结构差异有关ᤥ 玉米中的
Իቝ۪᧧શϟᑕ 在不同玉米组织中的定位存在极性定位

ྉ ऊᑕʢʢᑕʢᆍ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡᤃଫ ᥈ᑕ᤟᤟ᑕ׹ᆍᡷᡷᔽ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡऐଫ ᥘᆍᆍႿ
提取水稻ጸ日本晴ᆥ叶片ྉዛɯ 和根ྉ ଧɯ 中的总蛋白ᖔ用抗兔 ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟሕଫ ᣽ᑕቝᑕʛᑕ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟऐɯܦ 非极性定位
的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 多克隆抗体进行免疫杂交ᤥ 箭头指示目标蛋白
ྉ୩ҴᔽʢᡱᑕႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡँɯ和胞质定位 ྉèᆍʢᔀ༁ᡷᑕႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ
ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 的条带ᤥ
ఋᆍᡷᑕ᤟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ༁ ᆍ஦ ʢᔽዹᔀ ᤟ᔀᑕ׹ᔀ༁ ྉዛɯ ᑕႿʛ ʢᆍᆍᡷ༁ ྉଧɯ औᔀʢᔀ ᔽ༁ᆍ᤟ᑕᡷᔀʛ ԰ԡϟ԰ɯᖔ一些研究也发现 ዶᡷ۪᧧શϟ 的极性分布与胚
஦ʢᆍቝ ʢᔽዹᔀ ጸ શᔽᡱᡱᆍႿᤦᑕʢᔀᆥ ᑕႿʛ ᤦ᤟ᆍᡷᡷᔀʛ औᔽᡷၤ ᑕႿᡷᔽ᥋ʢᑕᤦᤦᔽᡷ ᨃ༁۪᧧શϟᤦ
发育中的生长素动态相关ྉ èʢᔽቝ᤟ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡሕɯᤥ
ᡱᆍ᤟ᢃዹ᤟ᆍႿᑕ᤟ ᑕႿᡷᔽᤦᆍʛᢃ঎ ዶʢʢᆍऔ ᡱᆍᔽႿᡷ༁ ᡷᆍ ᡷၤᔀ ᡷᑕʢ੫ᔀᡷ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᨃ༁۪᧧શϟᤦ঎
在本研究中ᖔ用于 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 及其同源物细胞定位
图 ԰জ 蛋白免疫杂交检测水稻叶片和根中的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ
观察的胚根及子叶胚都处于植物发育的早期阶
èᔽ੫঎ ԰জ ᧕ᔀᡷᔀዹᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ᨃ༁۪᧧શϟᤦ ᔽႿ ʢᔽዹᔀ ᤟ᔀᑕ׹ᔀ༁ ᑕႿʛ
段ᖔ这表明不同作物中 ۪᧧શϟ 的定位还与作物组织
ʢᆍᆍᡷ༁ ᤦᢃ औᔀ༁ᡷᔀʢႿ ᤦ᤟ᆍᡷ ቝᔀᡷၤᆍʛ
发育阶段有关ᤥ 此外ᖔ利用抗兔的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 多克
胞的细胞质膜上ᖔ而在胚的子叶表皮细胞中则分 隆抗体可以检测到 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 蛋白ᤥ 进一步分析结

布于细胞质中ྉ图 ሕ᧥̀ɯᤥ 果发现 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 与 ᨃ༁۪᧧શϟᑕ 氨基酸序列相似性为
ԣॹ྽ 水稻中 ᧣໧ۗᧇટϓᤇ 的胞吞检测 ᤃ԰঎ ࿗ᠮᖔ ᨃ༁۪᧧શϟᑕܦ ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 蛋白分子量分 别 为
由于 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 蛋白定位于细胞质膜上ྉ 图 ሕ᧥ ᤃ࿗঎Ꭾܦጢँ঎ሕ Ҵ᧕ᖔ且 ᨃ༁۪᧧શϟᑕ 氨基酸序列中含有用于
ዶᖔጶɯᖔ因此ᖔ我们进一步检测了 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 是否可以 制 备抗兔的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 多克隆抗体的序列
通过胞吞的方式从细胞质膜转运入细胞质ᤥ 用蛋 ͐୩୩኏શ۪ఋ۪኏᥈୩୩èશऊᤥ 因此ᖔ不能完全排除所检测

白转运抑制剂 ାèዶ 处理水稻ጸશᔽᡱᡱᆍႿᤦᑕʢᔀᆥ和ጸᓂఋ̀ᆥ 到的蛋白条带中含有 ᨃ༁۪᧧શϟᑕᖔ而这也可能部分解
的根尖ᖔ用抗兔的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 多克隆抗体开展免疫组 释了我们在根表皮细胞中所观察到的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 及
织化学 实 验ᖔ 结果发现在细胞质中可以检测到 其同源物的非极性定位ᤥ

ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 蛋白的聚集ྉ图 ࿗ɯᤥ 这表明 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 可以 ۪᧧શ 蛋白由于胞吞作用而产生的细胞定位的
通过胞吞途径从细胞质膜转移到细胞质中ᤥ 改变可影响生长素的极性运输ᖔ从而进一步调控
器官形成ྉ᣽᤟ᔀᔽႿᔀ᥋჆ᔀၤႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡऐɯᤥ 本研究结果
ሕজ 讨论与结论 发现 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 可以通过胞吞途径进入到细胞质
中ᤥ 这显示由于细胞的胞吞作用ᖔᨃ༁۪᧧શϟᤦ 及其同
生长素输出载体蛋白 ۪᧧શ 家族在植物发育中 源物的细胞质膜及细胞质定位可能会发生变化ᖔ
起着至关重要的作用ᤥ 在这项研究中ᖔ我们利用 并参与调控植物内生长素的分布ᤥ۪᧧શ 蛋白的细
抗兔的 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 多克隆抗体有效检测了水稻ܦ小 胞定位可受到其他物质如水杨酸的 调 控 ྉ᧕ࣼ ᔀᡷ
麦ܦ玉米和大豆的胚根分生区表皮细胞及胚中子 ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟሕɯᤥ 但是ᖔ我们观察到 ᨃ༁۪᧧શϟᤦ 的定位可

叶表皮细胞的 ᨃ༁۪᧧શϟ 及其同源物的亚细胞定位ᖔ 由自身胞吞作用而改变ᖔ 因此ᖔ不同作物中 ۪᧧શϟ 蛋