Page 8 - 《广西植物》2022年第5期
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Ꭾ ሕ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
ϓॹࣽ 数据分析 胁迫是否发生以及发生的程度ᤥ 结果表明ᖔ超表
所得试验数据采用 ᥘᔽዹʢᆍ༁ᆍᡷ ጶዹᔀ ԡϟँ 软件 达 ቴᒦۗᣞ 基因可以引起拟南芥发生氧化胁迫ᤥ
和 ᧧ାᥘ ୩۪୩୩ ԡ 软件进行处理ᖔ采用 ༁ᡷࣼʛᔀႿᡷ᥋ᡙ 检
验方法检验不同处理之间的差异显著性ྉ ۗጐԡԡጢᖔ
差异显著ɯᤥ 采用 ୩ᔽ੫ቝᑕ۪ᆍᡷ ϟ࿗ጢ 软件完成作图ᤥ
জ 结果与分析
ԣॹϓ 超表达 ቴᒦۗᣞԣ 基因促进转基因拟南芥衰老
选取筛选得到的 个 ఋሕ 代纯系进行表型分析ᖔ
首先通过 ఋ᥋۪ऊ 比较分析野生型及两个转基因系
ᨃᣮ᥋ϟ 和 ᨃᣮ᥋ 中的 ቴᒦۗᣞ 的基因表达量ᤥ 结果显
示野生型中未检测到该基因ᖔ而两个转基因株系中 ᥍表示 ۗጐԡԡጢଫ ᥍᥍表示 ۗጐԡԡϟᤥ 下同ᤥ
均有显著的扩增条带ᖔ表明两个转基因纯系确为 ᥍ቝᔀᑕႿ༁ ۗጐԡԡጢଫ ᥍᥍ ቝᔀᑕႿ༁ ۗጐԡԡϟ ఋၤᔀ༁ᑕቝᔀᤦᔀᆍऔ
ቴᒦۗᣞ 的超表达株系ྉ图 ϟɯᤥ 比较生长 ࿗ 周时的野 图 জ 野生型ྉۼఋɯ和 ᨃᣮ᥋ϟ 转基因拟南芥在自然
生型及转基因株系的拟南芥表型ᖔ可见两转基因株 衰老过程中丙二醛ྉᥘ᧕ዶɯ含量的变化
系拟南芥的抽苔和开花时间较野生型明显提前ྉ图 èᔽ੫ জ ऊၤᑕႿ੫ᔀ༁ ᆍ ቝᑕᆍႿʛᔽᑕʛᔀၤᢃʛᔀ ྉᥘ᧕ዶɯ ዹᆍႿᡷᔀႿᡷ༁ ᔽႿ
ᡷၤᔀ औᔽʛ᥋ᡷᢃᡱᔀ ྉۼఋɯ ᑕႿʛ ᡷʢᑕႿ༁੫ᔀႿᔽዹ ዛʗᐹᤇᔠʐᅳᡓᔠ ᡙ၊ᐹᤀᔠᐹႥᐹ
ϟɯᖔ表明 ቴᒦۗᣞ 促进拟南芥衰老进程ᤥ
ྉᨃᣮ᥋ϟɯ ʛࣼʢᔽႿ੫ ᡷၤᔀ Ⴟᑕᡷࣼʢᑕ ᑕ੫ᔽႿ੫ ᡱʢᆍዹᔀ༁༁
ԣॹᇺ 抗氧化酶系
为深入分析 ቴᒦۗᣞ 基因过表达对植株细胞抗
氧化性状的影响ᖔ分别检测了三个不同发育时期
ۼఋ 和 ቴᒦۗᣞ 转基因拟南芥植株叶片的 ୩ᨃ᧕ܦ۪ᨃ᧕
和 ऊዶఋ 酶活性ᖔ结果如图 ሕ 所示ᤥ 由图 ሕ 可知ᖔ在
同一 生 长 发育时期转基因拟南芥植株叶片的
୩ᨃ᧕ܦ۪ᨃ᧕ 和 ऊዶఋ 酶活性显著低于 ۼఋᤥ 试验结果
表明ᖔ超表达 ቴᒦۗᣞ 基因使胞内 ᨃ୩ 清除系统的
功能降低ᖔ从而导致膜系统受到伤害ᖔ并进一步造
成膜结构和功能的破坏ᤥ
ԣॹ 叶绿素荧光
如图 ࿗ 所示ᖔ无论是 ۼఋ 还是 ቴᒦۗᣞ 转基因
拟南芥植株在衰老的前期和中期叶片 Þ ᣰ Þ 几乎
ቂ
צ
未变ᖔ然而在衰老末期ᖔ衰老导致了拟南芥叶片
Þ ᣰ Þ 明显降低ᖔ且转基因拟南芥下降的更加明
צ ቂ
图 ϟজ ቴᒦۗᣞ 转基因拟南芥的表型及其表达检测
显ᤥ 在拟南芥叶片衰老过程中还有一个明显的 ۪୩
èᔽ੫ ϟজ ۪ၤᔀႿᆍᡷᢃᡱᔀ ᑕႿʛ ੫ᔀႿᔀ ᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ʛᔀᡷᔀዹᡷᔽᆍႿ ᆍ ቴᒦۗᣞ
֒激发压上升阶段ᖔ且转基因拟南芥比 ۼఋ 拟南芥
ᡷʢᑕႿ༁੫ᔀႿᔽዹ ዛʗᐹᤇᔠʐᅳᡓᔠ ᡙ၊ᐹᤀᔠᐹႥᐹ
上升更明显ᖔ表明前者比后者电子流受阻严重ᤥ
此外ᖔ۪୩֒光合电子传递量子效率 ಌ ܦ光化学
۪୩֒
ԣॹԣ ᤹ᦵዛ 含量 淬灭系数 फۗ 和光合电子传递速率 ጶఋ 在拟南芥
在三个不同发育时期ᖔ转 ቴᒦۗᣞ 基因拟南芥 叶片衰老过程中均呈降低趋势ᖔ且转基因拟南芥
植株叶片的 ᥘ᧕ዶ 含量显著高于 ۼఋ 拟南芥ྉ 图 下降更明显ᖔ表明在生育后期衰老过程中ᖔ转基因
ɯᤥ ᥘ᧕ዶ 是自由基作用于细胞膜脂发生过氧化 型比野生型叶片的 ۪୩֒功能下降更快ᖔ并且具有
反应的最终产物之一ᖔ能在一定程度上反映氧化 较低的光能利用效率ᤥ