Page 26 - 《广西植物》2022年第9期
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ϟ ࿗ ᤃ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
ጶዹᔽᡱ༁ᔀ ᣮ᧕ା᥋ऊ ྉ࿗ᤃ ቝቝġጢԡ ቝቝᖔጢ ဂቝɯᖔ流动相 ࿗ ϟ Вኡቝᓂ ሂͱ葡萄糖苷酶溶液的配制জ 准确
᥋ϟ
ϟऐ
为乙腈ͱԡϟᠮ磷酸水ྉጢ ᨒ ँጢɯᖔ进样量为 ԡ ဂᓂଫ流 称取 ϟቝ੫ ሂͱ葡萄糖苷酶ᖔ溶于 ጢ࿗ ቝᓂ ۪ା୩ 中ᖔ现
速设定为 ԡऐ ቝᓂኼቝᔽႿ ଫ检测波长为 ϟԡ Ⴟቝᖔ柱温 配现用ᤥ
᥋ϟ
᥋ϟ
为室温ᤥ ࿗ሕ ϟ ቝቝᆍኡᓂ ۪શ۪᥈ 溶液的配制জ 称取 ሕቝ੫
对 ᡱ̀ 区带逆流色谱分离到的结构采用高分 ۪શ۪᥈ 加入 ϟԡ ቝᓂ ۪ା୩ 溶液中超声溶解ᖔ 现配
辨质谱ܦ核磁共振氢谱ܦ核磁共振碳谱分析进行 现用ᤥ
᥋ϟ
鉴定ᤥ ࿗࿗ ԡ ቝᆍኡᓂ શᑕ ऊᨃ 溶液配制জ 称取 ϟᤃ ੫
ሕ
ሕሕ 化合物结构鉴定 શᑕ ऊᨃ 于烧杯中ᖔ加蒸馏水定容至 ϟԡԡ ቝᓂᤥ
ሕ
化合 物 ϓ জ 白色粉末ᖔྉ շɯ̀᥋ጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥ ࿗ጢ 实验步骤জ 采用 ۪શ۪᥈ 法进行测定ྉ 李古月
࿗ँϟँᤃ ᤃᎮ Џ ᥘ շ ̀ ྉ 计算相对分子质量为 等ᖔԡϟጢɯᖔ反应在 ँᤃ 孔板中进行ᖔ按照顺序加入
շ
շ
࿗ँϟँᤃ ᤃɯᖔ 其 对 应的分子式为 ऊ ̀ શ ᨃ ᤥ ጢԡ ဂᓂ ۪ା୩ 缓冲液ᖔԡ ဂᓂ 不同浓度的阿卡波糖溶
ϟጢ ጢ
ϟ 液ᖔϟԡ ဂᓂ ሂͱ葡萄糖苷酶溶液ᖔ置于 ሕᎮ ቩ 油浴锅
̀ શᥘ ྉጢԡԡ ᥘ̀झᖔऊ᧕ऊ ɯЬ᧥ ࿗ሕऐ ྉϟ̀ᖔ ʛʛᖔ ȣ ᢉ
ሕ
ϟጢᖔ ࿗ϟ ̀झᖔ ̀᥋ϟᎮᔀɯᖔ ሕऐԡ ྉϟ̀ᖔ ʛᡷᖔ ȣ ᢉ ँጢᖔ ᤃϟ 中预热 ጢቝᔽႿᖔ然后加入 ԡ ဂᓂ ۪શ۪᥈ 溶液ᖔ于 ሕᎮ
̀झᖔ ϟϟ᥋̀ɯᖔ ሕԡሕ ྉϟ̀ᖔ ᡷᖔ ȣ ᢉ ϟጢ ̀झᖔ ̀᥋ϟᎮᑕɯᖔ ቩ 油浴锅中继续加热 ጢ ቝᔽႿ 后取出ᖔ加入 ጢԡ ဂᓂ
ऐԡ ྉ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ϟϟ ᤃ ̀झᖔ̀᥋ϟԡᔀᖔ̀᥋ᔀɯᖔ ࿗ϟ શᑕ ऊᨃ 终止反应ᤥ 实验平行 ሕ 次ᖔ于波长 ࿗ԡጢ Ⴟቝ
ሕ
ྉϟ̀ᖔ ʛᡷᖔ ȣ ᢉ ϟᎮԡᖔ ࿗ϟ ̀झᖔ ̀᥋ϟ࿗ᔀɯᖔ ሕ ྉϟ̀ᖔ ቝᖔ 处测定吸光度ᤥ 通过 ୩ᡷᑕᡷᔽ༁ᡷᔽዹᑕ ۪ʢᆍʛࣼዹᡷ ᑕႿʛ ୩ᔀʢᔽዹᔀ
̀᥋ϟ࿗ᑕɯᖔ ԡᎮ ྉ̀ᖔ ቝɯᖔ ϟँԡ ྉሕ̀ᖔ ቝɯᖔ ϟᎮँ ྉϟ̀ᖔ ୩ᆍࣼᡷᔽᆍႿ༁ 软件计算出其 ᧧ऊ 值ᤥ
ጢԡ
ϟሕ
ቝᖔ ̀᥋ँᑕɯᖔ ϟ Ꭾሕ ጲ ϟ ሕ࿗ ྉϟϟ̀ᖔ ቝɯᤥ ऊશᥘ ྉ ϟጢ 将待测样品代替阿卡波糖按照上述步骤操
ᥘ̀झᖔऊ᧕ऊ ɯЬ᧥ ϟᤃጢँऐ ྉऊ᥋ϟጢɯᖔ ᤃሕँሕ ྉऊ᥋ᤃɯᖔ ጢᎮ࿗ሕ 作ᖔ得到待测样品 ᧧ऊ 值ᤥ 实验平行 ሕ 次ᖔ将测得
ሕ ጢԡ
ྉऊ᥋ɯᖔ ጢᎮሕᤃ ྉ ऊ᥋ϟԡɯᖔ ࿗ሕሕᎮ ྉ ऊ᥋ϟᎮɯᖔ ࿗ϟᤃԡ ྉ ऊ᥋ 结果与阳性对照品阿卡波糖的 ᧧ऊ 值对比ᤥ
ጢԡ
Ꭾɯᖔ ሕጢ࿗ँ ྉ ऊ᥋ጢɯᖔ ሕँᎮ ྉ ऊ᥋ϟ࿗ɯᖔ Ꭾँԡ ྉ ऊ᥋ϟɯᖔ ሂͱ葡萄糖苷酶抑制率公式᧥
Ꭾऐ ྉऊ᥋࿗ɯᖔ ᤃᤃԡ ྉऊ᥋ऐɯᖔ ϟሕ ྉऊ᥋ሕɯᖔ ԡँϟ ྉऊ᥋ 抑制率 ᢉ Џϟͱྉዛ ͱዛ ᣰ ଧ ͱଧ ɯ ġϟԡԡᠮᤥ
ϟ ϟ
ँɯᖔ ϟँ ϟϟ ྉ ऊ᥋ϟሕɯᤥ 将数据与文献 ྉ 董刘宏等ᖔ 式中᧥ ዛ ܦዛ ܦଧ ܦଧ 分别代表 ࿗ԡጢ Ⴟቝ 下测得
ϟ ϟ
ԡϟԡɯ比较ᖔ确定其为苦参碱ᤥ 的样品组ܦ背景组ܦ阴性对照组ܦ空白对照组的吸
化合物 ԣ জ 无色 粉 末ᖔྉ շɯ̀᥋ጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥ 光值ᤥ
ᤃጢϟँϟ ᤃϟ Џ ᥘ շ ̀ ྉ 计 算相对分子质量
շ
շ ϟ
ᤃጢϟँϟ ᤃԡɯᖔ其对应的分子式为 ऊ ̀ શ ᨃ ᤥ ̀ 表 ϓই ሂͦ葡萄糖苷酶反应体系 单位ᧅ ᒦɤ
ϟጢ ጢ
શᥘ ྉ ጢԡԡ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ऊ ɯ Р᧥ጢ ԡᎮ ྉ ϟ̀ᖔ ʛᡷᖔ ȣ ᢉ ఋᑕᤦᔀ ϟজ ሂ᥋੫ࣼዹᆍ༁ᔽʛᑕ༁ᔀ ʢᔀᑕዹᡷᔽᆍႿ ༁ᢃ༁ᡷᔀቝ ྉВႿᔽᡷ᧥ ဂᓂɯ
ሕ
ϟԡ࿗ᖔ ᤃϟ ̀झᖔ̀᥋ϟϟɯᖔ ࿗ሕऐ ྉϟ̀ᖔʛʛᖔ ȣ ᢉ ϟԡᖔ 空白
背景组 阴性
ጢ ̀झᖔ ̀᥋ϟᎮᔀɯᖔ ࿗ϟጢྉϟ̀ᖔ ᡷᖔ ȣ ᢉ ϟԡᖔ ̀᥋ϟᎮᑕɯᖔ 样品组 对照组
试剂 ାᑕዹҴ᥋ 对照组
ఋᔀ༁ᡷ ାᑕႿҴ
ሕԡᎮ ྉጢ̀ᖔ ቝɯᖔ ᤃ࿗ ྉ̀ᖔ ቝɯᖔ ࿗ ྉϟ̀ᖔ ቝᖔ ̀᥋ ᔀᑕ੫ᔀႿᡷ ੫ʢᆍࣼᡱ ੫ʢᆍࣼႿʛ શᔀ੫ᑕᡷᔽᔀ ዹᆍႿᡷʢᆍ
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ϟ࿗ᔀɯᖔ ԡྉ̀ᖔ ቝᖔ ̀᥋ϟ࿗ᑕᖔ ̀᥋ϟᔀɯᖔ ԡ ྉϟ̀ᖔ
ቝᖔ ̀᥋ऐᔀɯᖔ ϟऐጢ ጲ ϟጢԡ ྉँ̀ᖔ ቝɯᖔ ϟሕ ྉϟ̀ᖔ ቝᖔ ۪ ା ୩ ጢ ԡ ᤃ ԡ Ꭾ ԡ ऐ ԡ
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̀᥋ϟᑕɯᤥ ऊ શᥘྉϟጢ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ऊ ɯР᧥ ϟᎮԡᤃ ྉऊ᥋ 样品 ୩ᑕቝᡱᔀ ԡ ԡ ԡ ԡ
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ϟጢɯᖔ ᤃँᤃᎮ ྉऊ᥋ϟԡɯᖔ ᤃँሕ ྉ ऊ᥋ɯᖔ ᤃᎮሕ ྉ ऊ᥋ᤃɯᖔ 酶液 ጶႿझᢃቝᔀ ༁ᆍࣼᡷᔽᆍႿ ϟԡ ԡ ϟԡ ԡ
ጢሕ ϟԡ ྉ ऊ᥋ϟϟ ɯᖔ ࿗ ऐᤃ ྉ ऊ᥋Ꭾɯᖔ ࿗ϟ ऐ࿗ ྉ ऊ᥋ϟᎮ ɯᖔ ۪શ۪᥈ ԡ ԡ ԡ ԡ
ሕ࿗ Ꭾϟ ྉ ऊ᥋ጢɯᖔ ሕሕ ԡጢ ྉ ऊ᥋ϟ࿗ ɯᖔ ऐ ᤃᎮ ྉ ऊ᥋ϟ ɯᖔ
શᑕ ऊᨃ ሕ ጢԡ ጢԡ ጢԡ ጢԡ
ᤃँ ྉऊ᥋࿗ɯᖔ ࿗ऐጢ ྉऊ᥋ऐɯᖔ ϟऐᎮऐ ྉऊ᥋ϟሕɯᖔ ϟᎮሕᎮ
ྉऊ᥋ሕɯᖔ ϟᎮሕ ྉऊ᥋ँɯᤥ 将数据与文献ྉ郭依俐和刘
ሕজ 结果与分析
庆ᖔԡϟँɯ比较ᖔ确定其为氧化苦参碱ᤥ
ԣॹ 阿卡波糖 ᧇࣷ 值的测定
ጇԔ
࿗ϟ ۪ା୩ 溶液的配制জ 将 ԡġ۪ା୩ 溶液用蒸馏水 ᇺॹϓ ̵ۗᒦࣷ 的条件优化
稀释 ԡ 倍即得ᤥ 实验优化了液相色谱条件以确保各组分达到